用于检测微小残留病的方法、试剂以及试剂盒.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN104471393A(43)申请公布日2015.03.25(21)申请号201380037624.4塞巴斯蒂安·博埃特赫尔朗托尼·威廉·朗格拉克(22)申请日2013.06.14埃斯特尔·迈斯特日科娃(30)优先权数据托马斯·什切潘斯基61/659,5242012.06.14US马蒂亚斯·里特根(85)PCT国际申请进入国家阶段日保罗·约根·蒙泰罗达席尔瓦卢西奥2015.01.14(74)专利代理机构北京集佳知识产权代理有限(86)PCT国际申请的申请数据公司11227PCT/NL2013/0504202013.06.14代理人郑斌彭鲲鹏(87)PCT国际申请的公布数据(51)Int.Cl.WO2013/187765EN2013.12.19G01N33/50(2006.01)(2006.01)(71)申请人鹿特丹伊拉斯姆斯大学医疗中心G01N33/574地址荷兰鹿特丹(72)发明人雅各布斯·约翰内斯·玛丽亚·万东恩何塞·阿尔贝托·奥尔方德马托斯克瑞亚埃韦尔朱安·亚历杭德罗·弗洛雷斯蒙特罗茱莉亚·玛丽亚·阿尔梅达帕拉文森特·亨利库斯·约翰内斯·万德费尔登权利要求书2页说明书11页附图6页(54)发明名称用于检测微小残留病的方法、试剂以及试剂盒(57)摘要本发明涉及微小残留病(MRD)诊断领域，其越来越多地应用于评价患有血液恶性肿瘤患者的治疗效力，例如B细胞前体急性淋巴细胞白血病(BCP-ALL)、B细胞慢性淋巴细胞白血病(B-CLL)和多发性骨髓瘤(MM)。所提供的独特试剂组合物具有经仔细选择和彻底测试的抗体组合，对于≥8色流式细胞术染色以及对于10色和12色流式细胞术染色，其可达到至少10-4甚至低至10-5的灵敏度。本发明还提供了诊断试剂盒和用于检测MRD的方法。CN104471393ACN104471393A权利要求书1/2页1.一种用于对人对象中的B细胞前体ALL(BCP-ALL)进行流式细胞术检测的试剂组合物，其包含至少八种不同的荧光染料缀合抗体的组，所述组至少包含针对核心标志物CD10、CD19、CD20、CD34和CD45的抗体。2.根据权利要求1所述的试剂组合物，其中所述组还包含选自针对CD38、CD81、CyIgμ和脱氧核苷酸转移酶(NuTdT)之抗体的一种或更多种抗体。3.根据权利要求1或2所述的试剂组合物，其中所述组还包含一个或更多个选自以下的抗体集：(a)针对CD66c和CD123的抗体集；(b)针对CD304和CD73的抗体集；以及(c)针对SmIgκ和SmIgλ的抗体集。4.根据权利要求3所述的试剂组合物，其中使每一个集内的抗体与相同的荧光染料缀合。5.根据权利要求1至4中任一项所述的试剂组合物，其包含针对以下标志物组合之一的不同的荧光染料缀合抗体：(i)CD20、CD45、CD81、CD66c、CD123、CD34、CD19、CD10和CD38，其中使针对CD66c和CD123的抗体与相同的荧光染料缀合；(ii)CD20、CD45、CD81、CD304、CD73、CD34、CD19、CD10和CD38，其中使针对CD304和CD73的抗体与相同的荧光染料缀合；(iii)CD20、CD45、NuTdT、SmIgκ、SmIgλ、CyIgμ、CD19、CD34和CD10，其中使针对SmIgκ和SmIgλ的抗体与相同的荧光染料缀合。6.根据权利要求5所述的试剂组合物，其包含针对标志物CD20、CD45、CD81、NuTdT、CD66c、CD123、CD304、CD73、CD34、CD19、CD10和CD38的不同的荧光染料缀合抗体，以及选自以下的一个或更多个抗体集：(a)针对CD66c和CD123的抗体集；(b)针对CD304和CD73的抗体集；以及(c)针对SmIgκ和SmIgλ的抗体集，其中使每一个集内的抗体与相同的荧光染料缀合。7.根据权利要求6所述的试剂组合物，其包含针对标志物CD20、CD45、CD81、NuTdT、CD66c、CD123、CD304、CD73、SmIgκ、SmIgλ、CyIgμ、CD34、CD19、CD10和CD38的不同的荧光染料缀合抗体，其中使针对CD66c/CD123、CD304/CD73和SmIgκ/SmIgλ中每一个集的抗体与相同的荧光染料缀合。8.一种用于对人对象中的慢性淋巴细胞白血病(CLL)进行流式细胞术检测的试剂组合物，其包含至少八种不同的荧光染料缀合抗体的组，所述组至少包含针对核心标志物CD5、CD27、CD79b、CD3、CD200、CD81和CD19的抗体。9.根据权利要求8所述的试剂组合物，其中将CD22和/或受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(ROR1)用作另外的标志物，优选与CD4