用于检测微小残留病的方法、试剂以及试剂盒.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107422122A(43)申请公布日2017.12.01(21)申请号201710436056.5文森特·亨利库斯·约翰内斯·万(22)申请日2013.06.14德费尔登塞巴斯蒂安·博埃特赫尔(30)优先权数据朗托尼·威廉·朗格拉克61/659,5242012.06.14US埃斯特尔·迈斯特日科娃(62)分案原申请数据托马斯·什切潘斯基201380037624.42013.06.14马蒂亚斯·里特根(71)申请人鹿特丹伊拉斯姆斯大学医疗中心保罗·约根·蒙泰罗达席尔瓦卢西地址荷兰鹿特丹奥(72)发明人雅各布斯·约翰内斯·玛丽亚·万(74)专利代理机构北京集佳知识产权代理有限东恩公司11227何塞·阿尔贝托·奥尔方德马托斯代理人郑斌尹玉峰克瑞亚埃韦尔(51)Int.Cl.朱安·亚历杭德罗·弗洛雷斯蒙特G01N33/574(2006.01)罗G01N15/14(2006.01)茱莉亚·玛丽亚·阿尔梅达帕拉权利要求书2页说明书13页附图6页(54)发明名称用于检测微小残留病的方法、试剂以及试剂盒(57)摘要本发明涉及用于检测微小残留病的方法、试剂以及试剂盒。本发明涉及微小残留病(MRD)诊断领域，其越来越多地应用于评价患有血液恶性肿瘤患者的治疗效力，例如B细胞前体急性淋巴细胞白血病(BCP-ALL)、B细胞慢性淋巴细胞白血病(B-CLL)和多发性骨髓瘤(MM)。所提供的独特试剂组合物具有经仔细选择和彻底测试的抗体组合，对于≥8色流式细胞术染色以及对于10色和12色流式细胞术染色，其可达到至少10-4甚至低至10-5的灵敏度。本发明还提供了诊断试剂盒和用于检测MRD的方法。CN107422122ACN107422122A权利要求书1/2页1.一种用于对人对象中的MM或PCD进行流式细胞术检测的试剂组合物，其包含至少八种不同的荧光染料缀合抗体的组，所述组至少包含针对核心标志物CD138、CD38、CD56和CD19的抗体，其补充有选自CD27、CD117、CD81、CD229、CD45、CyIgκ和CyIgλ的至少四种另外的标志物。2.根据权利要求1所述的试剂组合物，其中CD45是第五标志物，优选与标志物CD27、CD117和CD81组合或与标志物CD229、CyIgκ和CyIgλ组合。3.根据权利要求1或2所述的试剂组合物，其包含针对以下标志物组合之一的不同的荧光染料缀合抗体：(iv)CD45、CD138、CD38、CD56、CD27、CD19、CD117和CD81(v)CD45、CD138、CD38、CD56、CD229、CD19、CyIgκ和CyIgλ(vi)CD138、CD27、CD38、CD56、CD45、CD19、CD117和CD81(vii)CD138、CD27、CD38、CD56、CD229、CD19、CyIgκ和CyIgλ(viii)CD138、CD27、CD38、CD56、CD45、CD19、CyIgκ和CyIgλ。4.根据权利要求3所述的试剂组合物，其包含针对标志物CD138、CD27、CD38、CD56、CD45、CD19、CD117、CD81的不同的荧光染料缀合抗体以及选自以下的一个或两个抗体集：(a)针对CD229和CD28的抗体集；(b)针对CyIgκ和CyIgλ的抗体集。5.一种用于对人对象中的慢性淋巴细胞白血病(CLL)进行流式细胞术检测的试剂组合物，其包含至少八种不同的荧光染料缀合抗体的组，所述组至少包含针对核心标志物CD5、CD27、CD79b、CD3、CD200、CD81和CD19的抗体。6.根据权利要求5所述的试剂组合物，其中将CD22和/或受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(ROR1)用作另外的标志物，优选与CD43和CD38组合。7.根据权利要求1至6中任一项所述的试剂组合物，其中对于每一个所述组使用以下的荧光染料组合：(1)pacificblue(PacB)、brilliantviolet421(BV421)或HorizonV450，(2)pacificorange(PacO)、HorizonV500(HV500)、BV510、Khromeorange(KO)或OC515，(3)异硫氰酸荧光素(FITC)或Alexa488，(4)藻红蛋白(PE)，(5)多甲藻素叶绿素蛋白/花菁5.5(PerCP-Cy5.5)、PerCP或PE-TexasRed，(6)藻红蛋白/花菁7(PE-Cy7)，(7)别藻蓝蛋白(APC)或Alexa647，以及(8)别藻蓝蛋白/hilite7(APC-H7)、APC-Cy7、Alexa680、APC-A750、APC-C750或Alexa700。8.根据权利要求7所述的试剂组合物，其中针对CD13