抗汉滩病毒鼠/人嵌合抗体及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105504057A(43)申请公布日2016.04.20(21)申请号201510973020.1A61P13/12(2006.01)(22)申请日2015.12.23(71)申请人中国人民解放军第四军医大学地址710032陕西省西安市长乐西路17号(72)发明人吴兴安王芳张晓晓应旗康刘梓谕张芳琳程林峰于澜张亮徐志凯(74)专利代理机构西安新思维专利商标事务所有限公司61114代理人李罡(51)Int.Cl.C07K16/18(2006.01)C12N15/13(2006.01)A61K39/395(2006.01)权利要求书1页说明书5页A61P31/14(2006.01)序列表6页附图2页(54)发明名称抗汉滩病毒鼠/人嵌合抗体及其应用(57)摘要本发明涉及一种抗汉滩病毒鼠/人嵌合抗体及其应用。抗汉滩病毒鼠/人嵌合抗体，包括重链和轻链，所述重链由鼠抗体重链可变区和人抗体重链恒定区组成，所述轻链由鼠抗体轻链可变区和人抗体轻链恒定区组成；所述鼠抗体重链可变区为抗汉滩病毒鼠单克隆抗体的重链可变区，所述鼠抗体轻链可变区为抗汉滩病毒鼠单克隆抗体的轻链可变区；所述人抗体重链恒定区为人抗体γ1恒定区，所述人抗体轻链恒定区为人抗体κ链恒定区。本发明具有较好的中和活性，与鼠单抗相比，嵌合抗体既保留了鼠源性抗体可变区的高亲和力，又具有人抗体Fc段的多种免疫杀伤功能，从而大大降低了人抗鼠抗体反应的发生率，在体内半衰期更长，具有较好的临床治疗效果。CN105504057ACN105504057A权利要求书1/1页1.抗汉滩病毒鼠/人嵌合抗体，包括重链和轻链，其特征在于：所述重链由鼠抗体重链可变区和人抗体重链恒定区组成，所述轻链由鼠抗体轻链可变区和人抗体轻链恒定区组成；所述鼠抗体重链可变区为抗汉滩病毒鼠单克隆抗体的重链可变区，所述鼠抗体轻链可变区为抗汉滩病毒鼠单克隆抗体的轻链可变区；所述人抗体重链恒定区为人抗体γ1恒定区，所述人抗体轻链恒定区为人抗体κ链恒定区。2.根据权利要求1所述的抗汉滩病毒鼠/人嵌合抗体，其特征在于：所述抗体重链可变区的氨基酸序列为SEQIDNo.1；所述抗体重链恒定区的氨基酸序列为SEQIDNo.2；所述抗体轻链可变区的氨基酸序列为SEQIDNo.3；所述抗体轻链恒定区的氨基酸序列为SEQIDNo.4。3.编码权利要求2所述的抗汉滩病毒鼠/人嵌合抗体的基因，其特征在于：编码抗体重链可变区的基因序列为SEQIDNo.5；编码抗体重链恒定区的基因序列为SEQIDNo.6；编码抗体轻链可变区的基因序列为SEQIDNo.7；编码抗体轻链恒定区的基因序列为SEQIDNo.8。4.权利要求2所述的抗汉滩病毒鼠/人嵌合抗体作为治疗肾综合征出血热的抗体药物的应用。2CN105504057A说明书1/5页抗汉滩病毒鼠/人嵌合抗体及其应用技术领域[0001]本发明涉及一种抗体，具体涉及一种抗汉滩病毒鼠/人嵌合抗体及其应用。背景技术[0002]单克隆抗体技术的发展极大地影响了对人类疾病治疗方法的研究。Kohler和Milstein应用细胞融合技术制备单克隆抗体在生物学引起了一场革命，其影响等同于重组DNA克隆技术。从杂交瘤产生的单克隆抗体已被广泛地应用于诊断和基础科学研究中；在治疗人类疾病中，包括病毒和微生物感染，其疗效有待进一步证实。[0003]尽管，鼠单克隆抗体通过其本身的特异性能够影响人类疾病的进展，但是由于其鼠源性的本质，应用于人类可以引起免疫排斥反应，限制了其在人类疾病治疗中的应用。同时，由于它们不同于人类蛋白质，被迅速从循环中清除，也不能被人免疫效应细胞或分子所识别。[0004]因此，制备人单克隆抗体可以防止这些问题的发生，但是在制备人单克隆抗体的过程中也遇到了一些困难，产生人单克隆抗体的细胞系是EB病毒永生化的细胞，不能用于大规模生产人单克隆抗体。永生化的人单克隆抗体细胞系也可能携带人类病毒基因，例如人免疫缺陷病毒等。[0005]此外，人类病毒在人免疫系统中进化，一些重要抗原已经不能被人免疫系统所识别，这些抗原在人体也不能产生有用的免疫反应。相比，这些病毒抗原对小鼠具有免疫原性，产生鼠单克隆抗体，可以用于疾病的治疗。发明内容[0006]本发明的目的是提供一种具有高效中和作用的抗汉滩病毒鼠/人嵌合抗体及其应用。[0007]本发明所采用的技术方案为：抗汉滩病毒鼠/人嵌合抗体，包括重链和轻链，其特征在于：所述重链由鼠抗体重链可变区和人抗体重链恒定区组成，所述轻链由鼠抗体轻链可变区和人抗体轻链恒定区组成；所述鼠抗体重链可变区为抗汉滩病毒鼠单克隆抗体的重链可变区，所述鼠抗体轻链可变区为抗汉滩病毒鼠单克隆抗体的轻链可变区；所述人抗体重链恒定区为人抗体γ1恒定区，所述