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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105646536A(43)申请公布日2016.06.08(21)申请号201511016840.8G01N33/558(2006.01)(2006.01)(22)申请日2015.12.29G01N33/532(71)申请人深圳市易瑞生物技术有限公司地址518000广东省深圳市宝安区新安街道桃花源科技创新园11号研发中心(72)发明人严义勇朱海付辉李细清毕思远汪凤林(74)专利代理机构深圳市科吉华烽知识产权事务所(普通合伙)44248代理人黄晓笛张英(51)Int.Cl.C07D501/36(2006.01)C07D501/04(2006.01)C07K14/765(2006.01)C07K1/107(2006.01)C07K16/44(2006.01)G01N33/94(2006.01)权利要求书2页说明书6页附图1页(54)发明名称一种头孢噻呋半抗原及其胶体金检测装置及其制备方法(57)摘要本发明提供了一种头孢噻呋半抗原及其胶体金检测装置及其制备方法,所述头孢噻呋半抗原,为具有式(1)所示的化学结构式。采用本发明的技术方案,特异性强,检测灵敏度高,准确性高,重复性好,能更加快速、简便地检测头孢噻呋残留;不需要任何仪器设备,便于携带;试纸条使用简单,无需专业人士操作;试纸制作容易,成本低廉,满足了食品安全检测中对头孢噻呋残留量检测需求。CN105646536ACN105646536A权利要求书1/2页1.一种头孢噻呋半抗原,其特征在于:其具有式(1)所示的化学结构式:2.根据权利要求1所述的头孢噻呋半抗原,其特征在于,采用以下步骤制备得到:步骤S1:将头孢噻呋钠溶解于甲醇中,加入冰乙酸,于20~30℃下搅拌10~120分钟,其中,所述冰乙酸的摩尔量是头孢噻呋钠摩尔量的1~3倍;再加入水,用二氯甲烷萃取,旋干有机相,得到淡粉红色固体;步骤S2:取步骤S1中得到的淡粉红色固体溶于DMF中,加入碳酸钾及溴丙酸,35~45℃下反应2~8小时,采用二氯甲烷萃取过柱提纯得所述头孢噻呋半抗原。3.一种头孢噻呋免疫抗原,其特征在于:采用权利要求1或2所述的头孢噻呋半抗原制备得到,将所述头孢噻呋半抗原与DCC、NHS混合,于4℃下搅拌,离心后取上清液;将人血清蛋白溶于pH值为8.0的PBS溶液中,加入DMF后搅拌,然后将所述上清液逐渐加入其中,4℃下反应6~24h,离心后,取上清液,透析纯化,得到所述头孢噻呋免疫抗原。4.根据权利要求3所述的头孢噻呋免疫抗原,其特征在于:所述透析纯化时,在4℃下用生理盐水透析3天,每天更换3次透析液。5.一种头孢噻呋单克隆抗体,其特征在于:采用权利要求3或4所述的头孢噻呋免疫抗原与免疫Balb/c小鼠经细胞融合,筛选得到分泌头孢噻呋单克隆抗体的杂交瘤细胞,用获得的杂交瘤细胞采用体内诱生腹水法制备得到头孢噻呋单克隆抗体。6.根据权利要求5所述的头孢噻呋单克隆抗体,其特征在于:所述体内诱生腹水法的步骤为:对小鼠腹腔注射液体石蜡油0.5mL/只,7天后腹腔注射所述杂交瘤细胞3~5×106/只,10天后,待小鼠腹部明显膨大时收集腹水,用正辛酸-硫酸铵沉淀法来纯化腹水得到所述头孢噻呋单克隆抗体。7.一种头孢噻呋胶体金检测装置,其特征在于:包括反应杯和检测试纸,所述检测试纸包括底板,以及底板上依次铺设的样品垫、硝酸纤维素膜和吸水纸;所述反应杯里含有胶体金标记的如权利要求5所述的头孢噻呋单克隆抗体,所述硝酸纤维素膜上设有检测线和控制线,所述检测线为采用权利要求3或4所述的头孢噻呋免疫抗原在硝酸纤维素膜上进行喷涂制得。8.根据权利要求7所述的头孢噻呋胶体金检测装置,其特征在于:所述控制线为采用兔抗鼠IgG进行喷涂制得,所述检测线和控制线相互平行。9.权利要求7或8所述的头孢噻呋胶体金检测装置的制备方法,其特征在于,其包括以下步骤:步骤A:将头孢噻呋钠溶解于甲醇中,加入冰乙酸,于20~30℃下搅拌10~120分钟,其2CN105646536A权利要求书2/2页中,所述冰乙酸的摩尔量是头孢噻呋钠摩尔量的1~3倍;再加入水,二氯甲烷萃取,旋干有机相,得到淡粉红色固体;将淡粉红色固体溶于DMF中,加入碳酸钾及溴丙酸,35~45℃下反应2~8小时,采用二氯甲烷萃取过柱提纯得所述头孢噻呋半抗原;利用碳二亚胺法将所述头孢噻呋半抗原与载体人血清蛋白偶联,制备得到头孢噻呋免疫抗原;步骤B:将所述头孢噻呋免疫抗原与免疫Balb/c小鼠经细胞融合,筛选得到分泌头孢噻呋单克隆抗体的杂交瘤细胞,用获得的细胞诱导小鼠产生腹水,纯化后获得头孢噻呋单克隆抗体;步骤C:用柠檬酸三钠与氯金酸反应制备胶体金;将胶体金与所述头孢噻呋单克隆抗体混合形成金标抗体,离心复溶后得到胶体金标记的头