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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105851200A(43)申请公布日2016.08.17(21)申请号201610256480.7(22)申请日2016.04.22(71)申请人浙江大学宁波理工学院地址315199浙江省宁波市钱湖南路1号(72)发明人王进波齐莉莉梅乐和胡升喻鹏飞(74)专利代理机构宁波诚源专利事务所有限公司33102代理人邓青玲陈蕾(51)Int.Cl.A23B4/20(2006.01)A23L3/3562(2006.01)A23L3/3472(2006.01)A23L3/3481(2006.01)权利要求书2页说明书10页(54)发明名称一种水产品天然生物保鲜剂及其制备方法和应用(57)摘要本发明涉及一种水产品天然生物保鲜剂,按重量份数计由以下成分组成:硫酸软骨素寡糖16~24份,抗氧化肽35~40份,姜黄提取物41~45份,除菌水300~450份;还涉及该生物保鲜剂的制备方法和在水产品保鲜中的应用。本发明中的生物保鲜剂无毒、无残留、低成本,可有效避免水产品脂肪、蛋白质等不被氧化破坏,并保持水产品鲜亮的色泽;同时,充分利用姜黄提取物的广谱抗菌活性,防止各种水产品常见菌在水产品中保藏过程中的滋生和繁殖,从而对水产品起到有效的保鲜作用,显著延长水产品的保鲜期。此外,该保鲜剂的制备过程中,硫酸软骨素寡糖和抗氧化肽均以水产品加工副产物为原料,可降低生产成本,提升水产品加工的产值,改善环境,具有显著的社会效益。CN105851200ACN105851200A权利要求书1/2页1.一种水产品天然生物保鲜剂,其特征在于,按重量份数计由以下成分组成:硫酸软骨素寡糖16~24份,抗氧化肽35~40份,姜黄提取物41~45份,除菌水300~450份。2.如权利要求1所述的水产品天然生物保鲜剂,其特征在于,所述硫酸软骨素寡糖以水产品加工中产生的骨质副产物为原料制得。3.一种如权利要求1所述的水产品天然生物保鲜剂的制备方法,其特征在于包括以下步骤:分别制备上述硫酸软骨素寡糖、抗氧化肽以及姜黄提取物,按上述质量份数将硫酸软骨素寡糖、抗氧化肽以及姜黄提取物混合,加入除菌水,搅拌均匀得所需的水产品天然生物保鲜剂。4.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述硫酸软骨素寡糖通过以下步骤制得:(1)以金枪鱼骨、鱿鱼喉骨为原料,煮沸后剔除残留的肌肉、脂肪和其他结缔组织,捣碎匀浆后得匀浆液;(2)按照体积比1:1~2在上述匀浆液中加入丙酮,搅拌脱脂2~3h,静置,弃去丙酮层,得脱脂固形物;(3)按固液比1:1~3g/mL向上述脱脂固形物中加入0.5mol/L磷酸盐缓冲液,调节pH为5.0~7.0,搅拌均匀,得混合物;(4)将上述混合物升温至50~60℃,加入菠萝蛋白酶,加酶量为1000~2000U/g,酶解时间为6~10h,升温至75℃处理10分钟灭酶,得第一次酶解液;(5)调节上述第一次酶解液的pH为8.0~9.0,加入碱性蛋白酶,加酶量为1500~3000U/g,酶解温度为50~55℃,搅拌酶解3~6h,升温至75℃处理10分钟灭酶,得第二次酶解液;(6)将上述第二次酶解液4000~5000rpm离心10min,取上清液;(7)在上述上清液中加入体积分数60~90%的乙醇,pH6.0~8.5条件下,沉淀获得硫酸软骨素;(8)按料液比1:20~25g/mL向上述硫酸软骨素中加入上0.4mol/L盐酸溶液,65~80℃水浴搅拌酸解18~24h;冷却至室温,加入氢氧化钠中和,冷冻干燥,得硫酸软骨素寡糖。5.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述抗氧化肽通过以下步骤制得:(1)取洗净后的金枪鱼、鱿鱼加工副产物,组织捣碎匀浆后的匀浆液,备用;(2)按照料液比1:6~9g/mL向上述匀浆液中加入异丙醇,于35~40℃下搅拌脱脂24~48h,然后5000~8000rpm离心15min,弃去上清,收集脱脂固形物沉淀;(3)按固液比1:3~5g/mL向上述脱脂固形物中加入0.5mol/L磷酸盐缓冲液,调节pH为5.0~7.0,搅拌均匀,得混合物。(4)上述混合物搅拌升温至50~60℃,加入风味蛋白酶,加酶量为1000~2000U/g,50~60℃酶解3~6h,得到酶解产物;将上述酶解产物升温至75℃以上,并保持10~15min,灭酶,冷却至室温,于5000rpm离心10min,得到酶解液,冻干得酶解物干粉;(5)将上述酶解物干粉溶于pH6.5~7.5的磷酸盐缓冲液,配成20~25mg/mL的溶液,于0.1~0.15MPa的工作压力和20~25℃的温度下,分别采用截留分子量7kDa、5kDa、3kDa和1kDa的超滤膜对所得酶解产物进行超滤处理,收集各组分,通过测定各组分对DPPH自由基的清除能力,确定各