一种脱细胞生物真皮材料及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106563173A(43)申请公布日2017.04.19(21)申请号201610890806.1A61L27/36(2006.01)(22)申请日2016.10.12(66)本国优先权数据201510673305.32015.10.13CN(71)申请人温州华贞医疗科技有限公司地址浙江省温州市瓯海区高新技术产业开发区创业服务中心科技企业孵化器研发总部大楼14楼1407室(72)发明人周鹤赵子建孙雪丽史啟潘璐琪(74)专利代理机构南京苏高专利商标事务所(普通合伙)32204代理人肖明芳(51)Int.Cl.A61L27/60(2006.01)权利要求书1页说明书8页附图5页(54)发明名称一种脱细胞生物真皮材料及其制备方法和应用(57)摘要本发明公开了一种脱细胞生物真皮材料的制备方法，(1)将猪皮用加有EDTA的胰蛋白酶溶液处理，冲洗，用除垢剂溶液浸泡并震荡，冲洗；(2)将处理后得到的材料用中性蛋白酶溶液处理，冲洗，用除垢剂溶液浸泡并震荡，冲洗；(3)以上步骤(1)和(2)处理1～3遍后，将处理后得到的材料用α-1,3-半乳糖苷酶溶液处理，冲洗后即得。本发明制备得到的脱细胞生物真皮材料经过一系列理化处理，具有安全无毒、脱细胞、除α-1,3-半乳糖苷、去免疫原性的特点，保留有天然胶原结构，且韧性及强度很好能够作为植入型生物组织材料用于外科、整形、疝修复、腹腔修复、盆腔修复等领域，并可以用于皮肤创伤修复。CN106563173ACN106563173A权利要求书1/1页1.一种脱细胞生物真皮材料的制备方法，其特征在于，它包括如下步骤：(1)将猪皮用加有EDTA的胰蛋白酶溶液处理，冲洗，用除垢剂溶液浸泡并震荡，冲洗；(2)将步骤(1)处理后得到的材料用中性蛋白酶溶液处理，冲洗，用除垢剂溶液浸泡并震荡，冲洗；(3)以上步骤(1)和(2)处理1～3遍后，将处理后得到的材料用α-1,3-半乳糖苷酶溶液处理，冲洗后即得。2.根据权利要求1所述的脱细胞生物真皮材料的制备方法，其特征在于，步骤(1)～(3)中，所述的冲洗用0.5wt％～0.9wt％钠盐且PH在6.0～7.9的Tris-HCl水溶液冲洗。3.根据权利要求1所述的脱细胞生物真皮材料的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的加有EDTA的胰蛋白酶溶液为加有0.02wt％～0.05wt％EDTA和0.15wt％～0.3wt％胰蛋白酶且PH在6.0～7.9的磷酸盐缓冲液。4.根据权利要求1所述的脱细胞生物真皮材料的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，将猪皮用加有EDTA的胰蛋白酶溶液在30℃～37℃浸泡12～24小时。5.根据权利要求1所述的脱细胞生物真皮材料的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的中性蛋白酶溶液为含有500～700U/L中性蛋白酶PH在6.0～7.9含0.5wt％～0.9wt％钠盐的Tris-Hcl水溶液。6.根据权利要求1所述的脱细胞生物真皮材料的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，将步骤(1)处理后得到的材料用中性蛋白酶溶液在30℃～37℃浸泡12～24小时。7.根据权利要求1所述的脱细胞生物真皮材料的制备方法，其特征在于，步骤(1)或(2)中，所述的除垢剂溶液为0.05～0.15wt％离子除垢剂且PH在6.0～7.9的磷酸盐缓冲液，所述的离子除垢剂为十二烷基硫酸钠和TritonX-200d的混合物。8.根据权利要求1所述的脱细胞生物真皮材料的制备方法，其特征在于，步骤(1)和(2)中，所述的用除垢剂溶液浸泡并持续震荡，为室温条件下将酶处理后的材料浸泡在除垢剂中处理18～24小时并持续震荡；所述的震荡可以用搅拌替换。9.根据权利要求1所述的脱细胞生物真皮材料的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述的α-1,3-半乳糖苷酶溶液为含有10～20μg/mLα-1,3-半乳糖苷酶的磷酸盐缓冲液。10.根据权利要求1所述的脱细胞生物真皮材料的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述的将处理后得到的材料用α-1,3-半乳糖苷酶溶液处理，为将处理后得到的材料用α-1,3-半乳糖苷酶溶液在25℃～37℃浸泡2～4小时。11.权利要求1～10中任意一项所述的方法制备得到的脱细胞生物真皮材料。12.权利要求11所述的脱细胞生物真皮材料在植入型生物组织材料中的应用。13.权利要求11所述的脱细胞生物真皮材料在制备修复皮肤创伤材料中的应用。2CN106563173A说明书1/8页一种脱细胞生物真皮材料及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明涉及生物皮肤材料及外科、整形、疝修复、腹腔修复、盆腔修复等领域中的植入型生物材料，具体涉及一种脱细胞的真皮材料及其制备方法和应用。背景技术[0002]生物材料在国