茵栀黄颗粒HPLC指纹图谱的建立方法及其标准图谱.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107655989A(43)申请公布日2018.02.02(21)申请号201710844235.2(22)申请日2017.09.18(71)申请人鲁南制药集团股份有限公司地址276005山东省临沂市红旗路209号(72)发明人张贵民苏瑞强刘武占范建伟(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)权利要求书1页说明书11页附图2页(54)发明名称茵栀黄颗粒HPLC指纹图谱的建立方法及其标准图谱(57)摘要本发明公开了一种茵栀黄颗粒HPLC指纹图谱的建立方法，该方法包括供试品溶液的制备、HPLC色谱条件的确定及HPLC标准指纹图谱的制作。本发明同时公开了由该方法得到的茵栀黄颗粒HPLC标准指纹图谱，该指纹图谱有29个共有峰，其相对保留时间tR依次分别为0.079，0.087，0.113，0.341，0.436，0.563，0.648，0.8660.891，0.905，0.919，1.000，1.089，1.129，1.161，1.197，1.395，1.453，1.496，1.597，1.776，1.808，1.979，2.071，2.136，2.168，2.353，2.396，2.440。本发明方法操作简便、稳定性高、重现性好，所得图谱特征峰多，通过标准指纹图谱共有峰的比较，可对茵栀黄颗粒的质量进行全面评价，有利于稳定产品质量，确保临床用药的安全性、有效性。CN107655989ACN107655989A权利要求书1/1页1.一种茵栀黄颗粒HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：1)供试品溶液的制备：取茵栀黄颗粒，加入40％-70％甲醇，超声处理20min-50min，放冷，滤过，取续滤液，得供试品溶液；2)HPLC色谱条件的确定：KromasilC18柱，乙腈为流动相A，0.05％-0.2％磷酸溶液为流动相B，采用梯度洗脱：时间(分钟)流动相A(％)流动相B(％)0-155％→6％95％→94％15-236％→10％94％→90％23-4210％→20％90％→80％42-6020％→25％80％→75％60-9025％→40％75％→60％检测波长：230-240nm，流速：0.8-1.2ml/min，柱温：25-45℃；3)指纹图谱的制作：按步骤2)色谱条件对茵栀黄颗粒供试品溶液进行分析比较，得到由样品共有特征峰构成的茵栀黄颗粒HPLC标准指纹图谱。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)所述的供试品溶液，按如下步骤制备：精密称取茵栀黄颗粒，精密加入50％甲醇，超声处理40min，放冷，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)所述流动相B为0.1％磷酸溶液。4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，所述样品的数量为20批次。5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)所述的检测波长：238nm，所述的流速：1.0ml/min，所述的柱温：30℃。6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述茵栀黄颗粒HPLC标准指纹图谱，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004版》软件进行相似度评价。7.如权利要求1-6所述方法建立的标准指纹图谱，其特征在于，所述标准指纹图谱有29个共有峰。8.如权利要求7所述的标准指纹图谱，其特征在于，所述峰的相对保留时间tR依次分别为：0.079，0.087，0.113，0.341，0.436，0.563，0.648，0.866，0.891，0.905，0.919，1.000，1.089，1.129，1.161，1.197，1.395，1.453，1.496，1.597，1.776，1.807，1.979，2.071，2.136，2.168，2.353，2.396，2.440。2CN107655989A说明书1/11页茵栀黄颗粒HPLC指纹图谱的建立方法及其标准图谱技术领域[0001]本发明涉及一种茵栀黄颗粒HPLC指纹图谱的建立方法及其HPLC标准指纹图谱，属于中药制剂分析领域。背景技术[0002]茵栀黄颗粒收载于《中国药典》2015年版一部中，由茵陈(绵茵陈)提取物、栀子提取物、黄芩提取物、金银花提取物制备而成，具有清热解毒，利湿退黄的功能，用于肝胆湿热所致的黄疸，症见面目悉黄、胸胁胀痛、恶心呕吐、小便黄赤；急、慢性肝炎见上述证侯者，具有确切的临床疗效，已收载入《国家基本药物目录(2012年版)》。[0003]现行《中国药典》中茵栀黄颗粒质量控制方法主要包括鉴别和含量测定，其中鉴别项采用薄层色谱法，分别鉴定处方中的茵陈提取物、栀子提取物、黄芩提取物，采用特征图谱鉴别茵陈提取物、金银花提取物中的6个有机酸成分，含量测定项使用高