一种用于肿瘤治疗的外泌体包裹的纳米载药系统及其制备.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108543074A(43)申请公布日2018.09.18(21)申请号201810317543.4A61P35/02(2006.01)(22)申请日2018.04.10A61P35/04(2006.01)(71)申请人华中科技大学地址430074湖北省武汉市洪山区珞喻路1037号(72)发明人甘璐雍土莹杨祥良张晓琼别娜娜(74)专利代理机构华中科技大学专利中心42201代理人许恒恒李智(51)Int.Cl.A61K47/46(2006.01)A61K47/04(2006.01)A61K31/704(2006.01)A61P35/00(2006.01)权利要求书2页说明书13页附图16页(54)发明名称一种用于肿瘤治疗的外泌体包裹的纳米载药系统及其制备(57)摘要本发明公开了一种用于肿瘤治疗的外泌体包裹的纳米载药系统及其制备，该外泌体包裹的纳米载药系统是利用细胞内吞载药纳米材料然后再经该细胞外排后得到的，所述载药纳米材料负载有抗肿瘤药物，包括化疗药物、用于免疫治疗的药物、用于改造肿瘤微环境的药物中的至少一种。本发明通过对关键的包裹纳米载药系统的外部组分生物膜的组成及结构等进行改进，与现有技术相比为基于生物膜的生物加工纳米粒提供了一种新的途径。本发明利用外泌体包裹纳米载药系统，能够大大保留外泌体的组成及结构，所得到的外泌体包裹的纳米载药系统在血液循环过程中具有良好的稳定性以及肿瘤靶向性。CN108543074ACN108543074A权利要求书1/2页1.一种用于肿瘤治疗的外泌体包裹的纳米载药系统，其特征在于，该外泌体包裹的纳米载药系统是利用细胞内吞载药纳米材料再经该细胞外排后得到的，所述载药纳米材料负载有抗肿瘤药物，所述抗肿瘤药物包括化疗药物、免疫治疗药物、重构肿瘤微环境的药物中的至少一种。2.如权利要求1所述用于肿瘤治疗的外泌体包裹的纳米载药系统，其特征在于，所述细胞包括肿瘤细胞、肿瘤干细胞、免疫细胞、肿瘤相关成纤维细胞、间充质干细胞、骨髓来源的抑制细胞以及调节性T细胞中的至少一种；所述肿瘤细胞和所述肿瘤干细胞对应的肿瘤包括急性白血病、淋巴瘤、前列腺癌、甲状腺癌、食道癌、骨癌、胃癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、绒毛膜上皮癌、子宫颈癌、子宫体癌、肝癌、膀胱癌、皮肤癌、结肠癌或直肠癌；所述免疫细胞包括T淋巴细胞、B淋巴细胞、K淋巴细胞、NK淋巴细胞、肥大细胞或单核吞噬细胞系统。3.如权利要求1所述用于肿瘤治疗的外泌体包裹的纳米载药系统，其特征在于，所述载药纳米材料中的纳米材料包括纳米脂质体、碳基纳米材料、硅基纳米材料、金属纳米材料、半导体量子点、上转换材料以及聚合物纳米材料中的至少一种；所述碳基纳米材料优选包括氧化石墨烯、碳纳米管、纳米金刚石中的至少一种；所述硅基纳米材料优选包括多孔硅、介孔硅、硅点中的至少一种；所述金属纳米材料优选包括金纳米粒、银纳米粒、过渡金属纳米粒中的至少一种。4.如权利要求1所述用于肿瘤治疗的外泌体包裹的纳米载药系统，其特征在于，所述载药纳米材料中的纳米材料为纳米颗粒材料，所述纳米颗粒材料的粒径在1-1000nm。5.如权利要求1所述用于肿瘤治疗的外泌体包裹的纳米载药系统，其特征在于，所述载药纳米材料负载的抗肿瘤药物优选包括治疗急性白血病、淋巴瘤、前列腺癌、甲状腺癌、食道癌、骨癌、胃癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、绒毛膜上皮癌、子宫颈癌、子宫体癌、肝癌、膀胱癌、皮肤癌、结肠癌、直肠癌的化疗药物、用于免疫治疗药物或用于改造肿瘤微环境的药物中的一种或多种。6.一种用于肿瘤治疗的外泌体包裹的纳米载药系统的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：将载药纳米材料与细胞共孵育；S2：离心去除该细胞未摄取的载药纳米材料；S3：加入新鲜的不含载药纳米材料的培养基继续孵育；S4：离心收集经该细胞外排的载药纳米材料，即得到用于肿瘤治疗的外泌体包裹的纳米载药系统。7.如权利要求6所述用于肿瘤治疗的外泌体包裹的纳米载药系统的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中，所述共孵育的时间为1-96h。8.如权利要求6所述用于肿瘤治疗的外泌体包裹的纳米载药系统的制备方法，其特征在于，所述步骤S2具体是在0-10℃的低温下，以100-1000g的离心力收集所述细胞，使用预冷的磷酸盐缓冲液清洗该细胞，直至溶液中不存在游离的纳米载药系统；所述步骤S4具体是在0-10℃低温下，以100-1000g的离心力离心去除培养液中的细胞，以3000-5000g离心去除培养液中的细胞碎片，以10000-20000g的离心力离心30-120min得到细胞外排的纳米载药系统；使用预冷的磷酸盐缓冲液清洗后，即得到外泌体包裹的纳米载药系统。2CN108543074A权利要求书2/2页9.如权利要求6所