蕨麻多糖及其提取纯化方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108659138A(43)申请公布日2018.10.16(21)申请号201710207395.6(22)申请日2017.03.31(71)申请人河北凯盛医药科技有限公司地址050000河北省石家庄市高新区黄河大道136号2号楼8层9号(72)发明人赵凯杨文张敬霞(51)Int.Cl.C08B37/00(2006.01)权利要求书1页说明书10页附图3页(54)发明名称蕨麻多糖及其提取纯化方法(57)摘要本发明提供了一种蕨麻多糖的提取纯化方法，该方法包括步骤；1）将蕨麻粉碎过筛；2)索氏提取器回流脱脂；3）采用碱水或酸水提取，离心得到提取液；4）采用淀粉酶脱淀粉；5）向所得脱淀粉的提取液加无水乙醇，析出沉淀物，得到粗多糖；5）粗多糖溶于水中，sevag法脱蛋白；6）所得脱蛋白溶液经脱色后，离心得到上清液；7）上清液浓缩后加入无水乙醇析出沉淀物，得到中间体多糖；8）中间体多糖溶于水中，过sephdex柱洗脱得到洗脱液；9）洗脱液超滤除去小分子物质，截留液冷冻干燥得到精制蕨麻多糖。该方法得到的蕨麻多糖具有很好的抗氧化活性。CN108659138ACN108659138A权利要求书1/1页1.一种蕨麻多糖的提取纯化方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：（1）将蕨麻洗净、烘干、粉碎、过筛，得到蕨麻粉；（2）脱脂：取步骤（1）中的蕨麻粉包于滤纸桶中，放入索氏提取器中，加入石油醚第一次回流；将滤纸包晾干后，向索氏提取器中加入乙醇第二次回流，挥干溶媒；（3）提取：将步骤（2）所得到的蕨麻粉放入碱水或酸水中进行浸提，离心得到提取液；（4）脱淀粉：将步骤（3）所得到的提取液加入α淀粉酶，加热下搅拌酶解，灭活，得到脱淀粉的提取液；（5）醇沉：将步骤（4）所得到的提取液浓缩后加入无水乙醇进行沉淀，得到粗多糖；（6）脱蛋白：将步骤（5）所得到的粗多糖加入水中溶解，离心，弃去不溶物；用氯仿与正丁醇混合液萃取上清液，收集水层溶液；（7）脱色：将步骤（6）所得到的水层溶液加入H2O2，调节pH，搅拌脱色，至溶液颜色为淡黄色，离心，弃去不溶物，得到上清液；（8）将步骤（7）所得到的上清液浓缩，加入无水乙醇进行沉淀，得到中间体多糖；（9）将步骤（8）所得到的中间体多糖加入到水中溶解，上Sephdex柱收集洗脱液；（10）将洗脱液进行超滤，超滤膜截留分子量为3000~50000；截留液冷冻干燥得到精制蕨麻多糖。2.如权利要求1所述的提取纯化方法，其特征在于，步骤（3）中的碱水为氢氧化钠水溶液，优选浓度为0.3~0.7mol/L。3.如权利要求1所述的提取纯化方法，其特征在于，步骤（3）中酸水为盐酸水溶液，优选浓度为0.2~0.6mol/L。4.如权利要求1所述的提取纯化方法，其特征在于，步骤（3）中蕨麻粉与溶液的比例为1:10~1:30。5.如权利要求1所述的提取纯化方法，其特征在于，步骤（3）所述的浸提是在40~80℃条件下搅拌2~4h，然后调pH为中性。6.如权利要求1所述的提取纯化方法，其特征在于，步骤（3）所述的离心转速为7000~10000转/分，时间为2~5分钟。7.如权利要求1所述的提取纯化方法，其特征在于，步骤（2））中的第一次回流时间为2~4h，第二次回流时间为2~4h。8.如权利要求1所述的提取纯化方法，其特征在于，步骤（4）中α淀粉酶为蕨麻粉重量的0.05~0.1%。9.如权利要求1所述的提取纯化方法，其特征在于，步骤6）中上清液与萃取液的体积比为3~5:1。10.如权利要求1所述的提取纯化方法，其特征在于，步骤（10）中超滤时间为10~20小时，超滤膜截留分子量为3000~50000。11.一种如权利要求1所述的提取纯化方法得到的蕨麻多糖。2CN108659138A说明书1/10页蕨麻多糖及其提取纯化方法技术领域[0001]本发明属于蕨麻多糖的提取纯化领域，具体涉及一种抗氧化的蕨麻多糖提取纯化方法。背景技术[0002]蕨麻(PotentillaanserineL.)为蔷薇科委陵菜属植物鹅绒委陵菜的根，又名人参果、延寿果和仙人果等。广泛分布于我国吉林、青海、辽宁、西藏、宁夏等省区。具有健脾益肾、生津止渴、益气补血等功效。蕨麻作为藏药使用历史悠久，现代药理研究表明，蕨麻多糖具有明显的降血糖血脂减肥、提高机体免疫力、抗疲劳、耐缺氧和止泻抑菌等作用，是一种极具发展前途的生物调节剂，人们已经开始致力于对蕨麻保健功能的研究，比如对蕨麻多糖的研究引起了越来越多的关注。因此如何得到高纯的蕨麻多糖成为了蕨麻的开发应用中的一个关键因素。[0003]专利CN1872883A公开了一种抗辐射的蕨麻多糖的制备方法，得到了能增强动物抗辐射能力的多糖，纯化后多糖得率为6.32%；专利CN