南瓜多糖的提取与纯化方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106046189A(43)申请公布日2016.10.26(21)申请号201610539587.2(22)申请日2016.07.11(71)申请人河南科技学院地址453000河南省新乡市华兰大道东段(72)发明人范文秀李新峥范连杰朱芳坤郝海玲(74)专利代理机构北京汉昊知识产权代理事务所(普通合伙)11370代理人冯谱(51)Int.Cl.C08B37/00(2006.01)权利要求书1页说明书8页附图2页(54)发明名称南瓜多糖的提取与纯化方法(57)摘要本发明公开了南瓜多糖的提取与纯化方法，提取纯化过程包括，将南瓜洗净，去皮，去瓤后经粉碎机粉碎，搅拌均匀，低温冷冻后采用超声辅助提取南瓜多糖得到南瓜多糖提取液；在南瓜多糖提取液中加入聚乙二醇和硫酸铵进行萃取，充分搅拌使其均匀后，静置待其分相完全，离心分离，溶液形成两相，在上相中加入无水乙醇，沉淀出南瓜多糖。本发明方法优点：超声波用于南瓜多糖的提取具有省时、高效、节能等优点。在水溶液中进行萃取，不会引起生物活性物质是失活或变性。本方法的南瓜多糖的收率可达60.58-62.82％。分相时间短，自然分相时间一般为5min-15min；不存在有机物残留问题，易于工程放大和连续操作。CN106046189ACN106046189A权利要求书1/1页1.南瓜多糖的提取与纯化方法，其特征在于，将南瓜洗净，去皮，去瓤后经粉碎机粉碎，搅拌均匀，低温冷冻后采用超声辅助提取南瓜多糖得到南瓜多糖提取液；在南瓜多糖提取液中加入聚乙二醇和硫酸铵进行萃取，充分搅拌使其均匀后，静置待其分相完全，离心分离，溶液形成两相，南瓜多糖主要富集在上相中，分离出上相，在上相中加入无水乙醇，沉淀出多糖，经过滤、烘干后得到纯化的南瓜多糖。2.根据权利要求1所述的南瓜多糖的提取与纯化方法，其特征在于，所述的低温冷冻是在-18℃环境下冷冻3小时。3.根据权利要求1所述的南瓜多糖的提取与纯化方法，其特征在于，所述超声辅助提取的提取温度60℃，超声功率200W，提取时间30min，料液比1:30。4.根据权利要求1所述的南瓜多糖的提取与纯化方法，其特征在于，在提取液内加入聚乙二醇，使其的浓度为21.33-24.00％；在提取液内加入硫酸铵，使其的浓度为14.00％。5.根据权利要求1所述的南瓜多糖的提取与纯化方法，其特征在于，南瓜样品经冷冻处理后,以水为提取液。6.根据权利要求1所述的南瓜多糖的提取与纯化方法，其特征在于，将南瓜洗净，去皮，去瓤后经粉碎机粉碎，搅拌均匀，在-18℃环境下冷冻3小时后采用超声辅助提取南瓜多糖，提取温度60℃，超声功率200W，提取时间30min，料液比1:30；在南瓜多糖提取液中加入PEG4000和硫酸铵进行萃取，使PEG4000浓度为21.33-24.00％，硫酸铵浓度为14.00％，充分搅拌使其均匀后，静置待其分相完全，以4000r/min的转速离心5min，溶液形成两相，南瓜多糖主要富集在上相中，分离出上相，在上相中加入无水乙醇，使其浓度达到80％，沉淀出多糖，经过滤、烘干后得到纯化的南瓜多糖。7.按照如权利要求1-6任一项方法制得的南瓜多糖。2CN106046189A说明书1/8页南瓜多糖的提取与纯化方法技术领域[0001]本发明涉及生物技术，具体涉及南瓜多糖及其提取与纯化方法。背景技术[0002]南瓜又称番瓜、倭瓜、金瓜等，系葫芦科南瓜属一年生蔓性草本植物，是重要药食两用植物之一。南瓜营养丰富，不仅含有甘露醇，多种氨基酸，维生素C、E及微量元素Fe、Se、Zn、Mn等，还含有大量生物碱、南瓜子碱、果胶等活性成分。[0003]南瓜多糖是一种非特异性免疫增强剂，能提高机体的免疫功能，促进细胞因子生成，通过活化补体等途径对免疫系统发挥多方面的调节功能。南瓜多糖呈棕色粉末，是南瓜活性成分中最重要、最具潜力功能因子之一。不仅具有复杂、多方面生物活性，作为广谱免疫促进剂，且具有免疫调节，抗感染、抗放射、抗凝血、降血糖、降血脂、促进核酸与蛋白质生物合成，控制细胞分裂、分化，调节细胞生长、衰老等作用。因此，对南瓜多糖分离提取，日益引起人们重视。[0004]现有技术中南瓜多糖的提取与纯化方法很多，如水提醇沉法、碱液提取法、超声波提取法、微波辅助提取法、酶提取法等等。提取方法的研究现状：[0005]1水提醇沉法，提醇沉法是通过在天然产物的浓缩的水提取液中加入数倍量高浓度乙醇，利用南瓜多糖溶于水而不溶于高浓度的乙醇的性质，使其生成沉淀而与其他水溶性的杂质分离的方法。水提醇沉法提取南瓜多糖的工艺，工艺流程如下：市购南瓜洗净、去皮切丁并配水榨汁→加热浸提→过滤→提取液→浓缩→乙醇沉淀→南瓜粗多糖。通过四因素三水平正交试验法优选，研究发现南