一种环氧海藻酸钠改性脱细胞真皮基质的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109498830A(43)申请公布日2019.03.22(21)申请号201811228679.4A61L15/46(2006.01)(22)申请日2018.10.22(71)申请人江阴奔翔生物科技有限公司地址214400江苏省无锡市江阴市新澄路3号申请人四川大学(72)发明人但年华但卫华黄盛陈一宁丛亮亮刘汝诚(74)专利代理机构江阴市永兴专利事务所(普通合伙)32240代理人陈晓良(51)Int.Cl.A61L15/40(2006.01)A61L15/28(2006.01)A61L15/42(2006.01)权利要求书1页说明书5页(54)发明名称一种环氧海藻酸钠改性脱细胞真皮基质的方法(57)摘要本发明公开了一种环氧海藻酸钠改性脱细胞真皮基质的方法，包含如下工艺：步骤（1）、将脱细胞真皮基质置于碱性缓冲溶液中，然后加入环氧海藻酸盐进行交联；步骤（2）、完成交联后，倒去反应液，并进行清洗，再倒去洗涤液，然后加入乳酸对残留的环氧基进行水解；步骤（3）、水解完成后，倒去处理液，然后加入缓冲溶液进行中和处理；步骤（4）、处理后倒去处理液，加入培养基，利用培养基中的活性物质进一步除去残留的环氧基；步骤（5）、处理后倒去处理液，加入水进行清洗，然后进行干燥。本发明制得的环氧海藻酸钠交联脱细胞真皮基质，具有优良亲水保湿性和耐降解性，可以作为植入材料或体表敷料，用途广泛。CN109498830ACN109498830A权利要求书1/1页1.一种环氧海藻酸钠改性脱细胞真皮基质的方法，其特征在于，包含如下工艺：步骤(1)、将脱细胞真皮基质置于碱性缓冲溶液中，然后加入环氧海藻酸盐进行交联，其中所述的环氧海藻酸盐，为海藻酸盐分子中2，3位上的邻二醇结构脱水形成环氧基后得到的物质；所述环氧海藻酸盐为环氧海藻酸钠；步骤(2)、完成交联后，倒去反应液，并进行清洗，再倒去洗涤液，然后加入乳酸对残留的环氧基进行水解；步骤(3)、水解完成后，倒去处理液，然后加入缓冲溶液进行中和处理；步骤(4)、处理后倒去处理液，加入培养基，利用培养基中的活性物质进一步消除残留的环氧基；步骤(5)、处理后倒去处理液，加入水进行清洗，然后进行干燥，得到环氧海藻酸盐改性脱细胞真皮基质。2.根据权利要求1所述的环氧海藻酸钠改性脱细胞真皮基质的方法，其特征在于，各步骤具体的工艺是：步骤(1)：称取100重量份的脱细胞真皮基质，置于100～300重量份的碱性缓冲溶液中，加入1～20重量份的环氧海藻酸盐，升温到25～35℃，反应2～8小时，然后升温到35～42℃，反应4～8小时，再升温到42～47℃，反应1～4小时；所述环氧海藻酸盐为环氧海藻酸钠；步骤(2)：倒去反应液，用温度为25～35℃的100～200重量份的注射水清洗20～30分钟；倒去洗涤液，加入0.5～5重量份的质量分数为10％的乳酸溶液，在20～25℃下处理30～120分钟；步骤(3)：倒去处理液，加入150～200重量份的磷酸盐缓冲液溶液，在20～25℃下处理1～2小时；步骤(4)：倒去处理液，加入50～100重量份的培养基，在10～25℃下处理1～2小时；步骤(5)：倒去处理液，加入150～300重量份的注射水，在20～25℃下处理30～60分钟，反复6～8次；步骤(6)：取出脱细胞真皮基质，冷冻干燥，得到环氧基海藻酸盐改性脱细胞真皮基质。3.根据权利要求1所述的环氧海藻酸钠改性脱细胞真皮基质的方法，其特征在于，所述步骤(1)中的碱性缓冲溶液包含NaOH-NaHCO3缓冲溶液、硼酸盐缓冲溶液中的一种或两种。4.根据权利要求1所述的环氧海藻酸钠改性脱细胞真皮基质的方法，其特征在于，所述步骤(4)中的培养基包含RPMI-1640培养基、DMEM培养基和MCDB131培养基中的一种或多种。5.根据权利要求1所述的环氧海藻酸钠改性脱细胞真皮基质的方法，其特征在于，所述步骤(1)中的环氧海藻酸钠用环氧海藻酸钙和环氧海藻酸锌中的一种或多种代替。2CN109498830A说明书1/5页一种环氧海藻酸钠改性脱细胞真皮基质的方法技术领域[0001]本发明涉及一种环氧海藻酸钠改性脱细胞真皮基质的方法，应用于生物医学领域。背景技术[0002]脱细胞真皮基质具有真皮模板作用、组织屏蔽作用以及引导组织再生等功能，已广泛应用于烧伤创伤修复、瘢痕治疗、耳鼻喉科治疗、面部整容、神经外科治疗等。[0003]为了降低脱细胞真皮基质的抗原性、提高耐降解性、改善物理机械性能，往往需要进行交联改性。常用的戊二醛交联易产生钙化现象、碳化二亚胺交联亲水性差、京尼平交联颜色较深。常见的环氧化合物，如乙二醇缩水甘油醚、丁二醇缩水甘油醚等，具有较好的化学活泼性，交联的脱细胞真皮基质亲水性增加、