一种银芩胶囊HPLC指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109917059A(43)申请公布日2019.06.21(21)申请号201910159605.8(22)申请日2019.03.04(71)申请人昆药集团股份有限公司地址650106云南省昆明市高新技术产业开发区科医路166号(72)发明人朱常成张晓蕾杨兆祥(74)专利代理机构北京元中知识产权代理有限责任公司11223代理人王明霞另婧(51)Int.Cl.G01N30/86(2006.01)权利要求书2页说明书8页附图3页(54)发明名称一种银芩胶囊HPLC指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱(57)摘要本发明属于药物分子技术领域，具体地说，涉及一种银芩胶囊HPLC指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱。所述标准指纹图谱中有8个共有峰，编号依次为1～8，8个共有峰的相对保留时间分别为：1号峰0.53，2号峰0.58，3号峰0.91，4号峰1.00，5号峰1.15，6号峰1.22，7号峰1.42，8号峰1.69；共有峰的归属为：4号峰为黄芩苷。本发明具有方法简便、高效、重现性好等特点，所建立的标准指纹图谱满足方法学验证的相关要求，适用性强，能够全面的反映银芩胶囊产品质量状况，为质量控制及制定标准提供了重要依据。CN109917059ACN109917059A权利要求书1/2页1.一种银芩胶囊HPLC标准指纹图谱，其特征在于，所述标准指纹图谱中有8个共有峰，编号依次为1～8，8个共有峰的相对保留时间分别为：1号峰0.53，2号峰0.58，3号峰0.91，4号峰1.00，5号峰1.15，6号峰1.22，7号峰1.42，8号峰1.69；共有峰的归属为：4号峰为黄芩苷。2.如权利要求1所述的银芩胶囊HPLC标准指纹图谱在含有金银花、黄芩、三七叶和鱼腥草的药物制剂的检测中的应用。3.一种银芩胶囊HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：1)配制银芩胶囊供试品溶液：提供不同批次的银芩胶囊供试品，分别取一定重量银芩胶囊供试品置于容器中，向容器中加入甲醇并进行超声处理，离心，过滤，取滤液即得供试品溶液；2)配制黄芩苷对照品溶液：精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇溶解制成溶液，即得对照品溶液；3)测得色谱图：分别精密吸取供试品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图；4)生成对照指纹图谱：将多批银芩胶囊的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰，以与黄芩苷对照品峰保留时间相同的色谱峰为参照峰；5)评价相似度：将步骤3)分析所得的溶剂融合指纹图谱导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统进行评价。4.根据权利要求3所述的银芩胶囊HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤3)中高效液相色谱的色谱条件为：色谱柱固定相以十八烷基硅烷键合硅胶为填料；以浓度为0.1～0.5％的甲酸水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B进行梯度洗脱，流速为0.8～1.2mL/min，柱温为20～30℃，进样量为5～15μL，检测波长为203～327nm。5.根据权利要求4所述的银芩胶囊HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤3)中所述梯度洗脱按如下程序进行：0分钟，99％～90％流动相A，1％～10％流动相B；1～2分钟，99％～90％流动相A，1％～10％流动相B；3～8分钟，90％～75％流动相A，10％～25％流动相B；8～12分钟，90％～70％流动相A，10％～30％流动相B；15～25分钟，90％～70％流动相A，10％～30％流动相B；25～45分钟，80％～60％流动相A，20％～40％流动相B；55～75分钟，55％～35％流动相A，45％～65％流动相B。6.根据权利要求4所述的银芩胶囊HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤3)中高效液相色谱的色谱条件为：色谱柱固定相以十八烷基硅烷键合硅胶为填料；以浓度为0.1％的甲酸水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B进行梯度洗脱，流速为1.0mL/min，柱温为25℃，进样量为10μL，检测波长为280nm。7.根据权利要求6所述的银芩胶囊HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述梯度洗脱按如下程序进行：0分钟，95％流动相A，5％流动相B；2分钟，95％流动相A，5％流动相B；5分钟，90流动相A，10％流动相B；2CN109917059A权利要求书2/2页10分钟，80％流动相A，20％流动相B；20分钟，80％流动相A，20％流动相B；30分钟，70％流动相A，30％流动相B；60分钟，45％流动相A，55％流动相B；65分钟，45％流动相A，55％流动相B。8.根据权利要求3-7任意一项所述的银芩胶囊HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤1)的具体过程为：称取银芩胶囊内容物0.3～0.8g，置于具塞锥形瓶中，加入50％～100％甲醇5～