草铵膦半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法与检测装置.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109942624A(43)申请公布日2019.06.28(21)申请号201910194038.XC07K14/795(2006.01)(22)申请日2019.03.14C07K14/79(2006.01)C07K16/44(2006.01)(71)申请人深圳市易瑞生物技术股份有限公司G01N33/558(2006.01)地址518102广东省深圳市宝安区新安街道留仙一路2-1号易瑞生物园(72)发明人杨星星李细清付辉程令严义勇王西丽金虹马红圳马涛石锡莲(74)专利代理机构广州粤高专利商标代理有限公司44102代理人许青华廖苑滨(51)Int.Cl.C07F9/30(2006.01)C07K14/765(2006.01)C07K14/77(2006.01)权利要求书2页说明书10页附图2页(54)发明名称草铵膦半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法与检测装置(57)摘要本发明公开了本发明提供草铵膦半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法与检测装置，大大提高草铵膦抗体的效价和灵敏度，具有降低的与其它类似化合物的交叉反应，能更加快速、灵敏、简便、准确地检测草铵膦残留，满足了快速检测的需要。CN109942624ACN109942624A权利要求书1/2页1.一种草铵膦半抗原，其特征在于，其具有如下结构式：.。2.如权利要求1所述的草铵膦半抗原的制备方法，其特征在于，其是由草铵膦与2,4-二硝基氟苯反应得到。3.如权利要求2所述的草铵膦半抗原的制备方法，其特征在于，该制备方法为：向反应容器中加入草铵膦、弱碱和水，加热搅拌，待固体完全溶解后，加入用甲醇溶解的2,4-二硝基氟苯，在55-70℃下持续反应20-40min，反应完毕后，进行萃取、分离纯化后获得草铵膦半抗原；其中，所述草铵膦、弱碱和2,4-二硝基氟苯的摩尔质量比为1:5-12:3-6；所述弱碱为碳酸钠、碳酸钾、碳酸钙、碳酸氢钠、碳酸氢钾、碳酸氢钙、磷酸钠、磷酸钾、磷酸钙、磷酸氢二钠、磷酸氢二钾或磷酸氢钙中的任意一种。4.如权利要求2所述的草铵膦半抗原的制备方法，其特征在于，该制备方法的具体步骤如下：向反应容器中加入草铵膦1.0g、碳酸钠4.8g、蒸馏水30ml，于60℃条件下加热搅拌，待固体完全溶解后，加入4.0g2,4-二硝基氟苯，其中所述2,4-二硝基氟苯用5ml甲醇溶解；60℃下持续反应30min后，反应完毕后降至室温，用二氯甲烷萃取未反应的2,4-二硝基氟苯，用6NHCl将溶液pH调为1-2，用乙酸乙酯萃取三次，乙酸乙酯相再用蒸馏水洗涤一遍，然后将乙酸乙酯相蒸干、过柱提纯得到草铵膦半抗原。5.一种草铵膦人工抗原，其特征在于，其是载体和权利要求1所述的草铵膦半抗原偶联得到的偶联物。6.如权利要求5所述的草铵膦人工抗原，其特征在于，所述载体为蛋白质或非抗原性的多聚赖氨酸，其中，所述蛋白质为牛血清白蛋白、卵清蛋白、人血清白蛋白、牛乳铁蛋白或血蓝蛋白。7.如权利要求5所述的草铵膦人工抗原的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将所述草铵膦半抗原溶于有机溶剂中，接着搅拌下加入二环已基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺，0-4℃下搅拌6-12h，接着离心并保留上清液，所述上清液即为A液，其中，所述草铵膦半抗原半抗原、所述二环已基碳二亚胺和所述N-羟基琥珀酰亚胺的摩尔比为1:1-3:1-3；将载体溶解在pH值为7.4-9.6的PBS缓冲液中，得到B液；以及在0-4℃搅拌下将所述A液滴加到所述B液中，4℃下反应6-24h，纯化后得到所述草铵膦人工抗原。8.一种草铵膦抗体，其特征在于，它是由权利要求5所述的草铵膦人工抗原经动物免疫得到，其能与草铵膦发生特异性免疫反应。9.一种用于检测草铵膦的快速免疫检测装置，其特征在于，包括草铵膦人工抗原和/或草铵膦抗体，其中，所述草铵膦人工抗原为权利要求5所述的草铵膦人工抗原，所述草铵膦抗体为权利要求8所述的草铵膦抗体。10.如权利要求9所述的用于检测草铵膦的快速免疫检测装置，其特征在于，所述快速免疫检测装置包括反应杯和试纸条，包含试纸条和反应杯，所述试纸条包含样品垫和层析2CN109942624A权利要求书2/2页膜，所述层析膜包含检测线和质控线，所述检测线由上述草铵膦人工抗原制备获得；所述反应杯包括标记有标记指示物的草铵膦抗体。3CN109942624A说明书1/10页草铵膦半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法与检测装置技术领域[0001]本发明涉及属于食品安全检测领域。更具体地，本发明涉及草铵膦半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法与检测装置。背景技术[0002]草铵膦（Glufosinateammonium，GA）是一类属广谱触杀型除草剂，因其高效、广谱、低毒等特性使其被广泛应用于农业、