粉唑醇半抗原、抗原、抗体、检测装置及其制备和应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114685387A(43)申请公布日2022.07.01(21)申请号202210605909.4C07K14/77(2006.01)(22)申请日2022.05.31C07K16/44(2006.01)G01N33/577(2006.01)(71)申请人深圳市易瑞生物技术股份有限公司G01N33/558(2006.01)地址518000广东省深圳市宝安区新安街G01N33/58(2006.01)道兴东社区留仙一路易瑞生物大厦G01N33/53(2006.01)101(72)发明人王炳志杨星星付辉严义勇邓启福杨中程令张鑫王水树肖昭理(74)专利代理机构广州文智专利代理事务所(特殊普通合伙)44469专利代理师梁媛(51)Int.Cl.C07D249/10(2006.01)C07K14/765(2006.01)权利要求书2页说明书8页附图4页(54)发明名称粉唑醇半抗原、抗原、抗体、检测装置及其制备和应用(57)摘要本发明公开了粉唑醇半抗原、抗原、抗体、检测装置及其制备和应用，涉及粉唑醇半抗原、粉唑醇抗原、粉唑醇抗体和粉唑醇胶体金层析检测装置及其制备和检测粉唑醇的应用。本发明应用免疫学检测方法，对样品中残留的粉唑醇进行专属检测，具有特异性好、灵敏度高、操作简便、可实现现场快速检测等优点，能更好的满足监管部门、检测机构现场监督执法的需要，为相关执法部门快速检测蔬菜、水果中是否残留粉唑醇提供技术支持。CN114685387ACN114685387A权利要求书1/2页1.粉唑醇半抗原，其特征在于，其结构如式（Ⅰ）所示：（Ⅰ）。2.制备权利要求1所述的粉唑醇半抗原的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.二甲硫醚、浓硫酸、甲醇反应后，得到第一反应液；S2.向所述第一反应液中加入2，4‑二氟苯酮、叔丁醇、氢氧化钾颗粒，反应，得到第二反应液，对所述第二反应液进行萃取，洗涤，干燥，过滤后将滤液减压浓缩，得到第一中间体，所述第一中间体的结构式如式（Ⅱ）所示：（Ⅱ）；S3.用DMF溶解三氮唑甲酸甲酯，加入60%钠氢，滴入所述第一中间体的DMF溶液，反应后，浓缩蒸干，加入纯化水萃取，洗涤，浓缩，过柱纯化，得到第二中间体，所述第二中间体的结构式如式（Ⅲ）所示：（Ⅲ）；S4.加入所述第二中间体、氢氧化钠、甲醇水溶液，反应后蒸干甲醇，保留水层，调节pH到4~5，萃取，合并有机相，洗涤，干燥，过滤、减压蒸干，得到粉唑醇半抗原，其结构如式（Ⅰ）所示，所述甲醇水溶液中甲醇与水的体积比为2:1。3.根据权利要求2所述的制备权利要求1所述的粉唑醇半抗原的方法，其特征在于，所述步骤S1中二甲硫醚与浓硫酸、甲醇的摩尔比为1:（0.5‑1.5）:（0.2‑1），所述步骤S2中2，4‑二氟苯酮与氢氧化钾的摩尔比为1:（5‑10）。4.根据权利要求2所述的制备权利要求1所述的粉唑醇半抗原的方法，其特征在于，所述步骤S3中第一中间体与三氮唑甲酸甲酯、60%钠氢的摩尔比为1:（1‑3）：（1‑3），所述步骤2CN114685387A权利要求书2/2页S4中第二中间体与氢氧化钠的摩尔比为1:（1‑3）。5.粉唑醇抗原，其特征在于，所述粉唑醇抗原包含权利要求1所述的粉唑醇半抗原以及与所述粉唑醇半抗原偶联的载体蛋白，所述载体蛋白为牛血清白蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白、甲状腺蛋白或人血清白蛋白中的一种。6.粉唑醇抗体，其特征在于，所述粉唑醇抗体是由权利要求5所述的粉唑醇抗原经动物免疫制备得到，所述粉唑醇抗体为粉唑醇单克隆抗体。7.权利要求1所述的粉唑醇半抗原、权利要求5所述的粉唑醇抗原或权利要求6所述的粉唑醇抗体在粉唑醇的免疫学检测中的应用。8.粉唑醇胶体金层析检测装置，所述检测装置包括试纸条和微孔反应杯，所述试纸条包括反应膜、样品吸收垫、吸水垫和底板，所述反应膜设有检测线和质控线，所述检测线包被有权利要求5所述的粉唑醇抗原，所述质控线包被有羊抗鼠抗体，所述微孔反应杯中含有胶体金标记的权利要求6所述的粉唑醇抗体。9.一种检测样品中粉唑醇残留的方法，其特征在于，所述方法为使用权利要求8所述的粉唑醇胶体金层析检测装置对样品中的粉唑醇进行检测，所述方法包括以下步骤：1）样品前处理；2）用权利要求8所述的粉唑醇胶体金层析检测装置进行检测；3）分析检测结果。10.根据权利要求9所述的一种检测样品中粉唑醇残留的方法，所述样品为蔬菜或水果。3CN114685387A说明书1/8页粉唑醇半抗原、抗原、抗体、检测装置及其制备和应用技术领域[0001]本发明涉及食品安全的免疫学检测技术领域，更具体地，本发明涉及粉唑醇半抗原、抗原、抗体、检测装置及其制备和应用，其检测装置特别适用于蔬菜、水果中粉唑醇残留的快速检测。背景技术[0002]作为一种低毒、