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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109970674A(43)申请公布日2019.07.05(21)申请号201910233073.8(22)申请日2019.03.26(71)申请人深圳市易瑞生物技术股份有限公司地址518102广东省深圳市宝安区新安街道留仙一路2-1号易瑞生物园(72)发明人付辉杨星星李细清王伟维杨林林曾文涛王西丽金虹张鑫曾楚怡(74)专利代理机构广州粤高专利商标代理有限公司44102代理人许青华廖苑滨(51)Int.Cl.C07D263/14(2006.01)G01N33/53(2006.01)权利要求书2页说明书8页附图1页(54)发明名称一种乙螨唑半抗原及其合成方法和应用(57)摘要本发明公开了一种乙螨唑半抗原及其合成方法和应用,以2,6-二氟苯甲酰胺、2-氯乙醛缩二甲醇为起始原料合成中间体1;3-叔丁基苯酚与化合物1在碱性条件下反应生成中间体2;中间体1和中间体2发生反应生成中间体3;中间体3在强碱的作用下发生分子内部缩合反应生成中间体4;中间体4通过氧化生成最终目标物。本发明中,在乙螨唑的苯醚结构上衍生连接臂,衍生的连接臂带有羧基,合成的乙螨唑半抗原既最大程度保留了乙螨唑的特征结构,使得乙螨唑半抗原的免疫原性明显增强,又具有可以与载体发生偶联的羧基;乙螨唑半抗原与载体偶联后得到的乙螨唑人工抗原去免疫动物,更有利于刺激动物免疫应答产生特异性更强、灵敏度更高的抗体。CN109970674ACN109970674A权利要求书1/2页1.一种乙螨唑半抗原,其特征在于,其结构式如式(Ⅰ)所示:其中,n为-CH2基团数目,n为1-5的整数。2.如权利要求1所述的乙螨唑半抗原的合成方法,其特征在于,其包括如下步骤:S1,提供中间体1,所述中间体1具有结构式;S2,提供中间体2,所述中间体2具有结构式;S3,将所述中间体1和中间体2进行反应,得到中间体3,所述中间体3具有结构式;S4,将所述中间体3进行缩合反应,得到中间体4,所述中间体4具有结构式;S5,将所述中间体4进行氧化反应,得到所述乙螨唑半抗原。3.如权利要求2所述的乙螨唑半抗原的合成方法,其特征在于,所述步骤S1中,所述中2CN109970674A权利要求书2/2页间体1的制备方法为:在反应容器中加入2,6-二氟苯甲酰胺和2-氯乙醛缩二甲醇,在冰水浴条件下搅拌,随后将浓硫酸缓慢滴加入其中,滴加完毕后室温下反应,反应完毕后,进行分离纯化,得到所述中间体1;其中,所述2,6-二氟苯甲酰胺、2-氯乙醛缩二甲醇和浓硫酸的物质的量之比为1:(1.2-2):(10-20)。4.如权利要求2所述的乙螨唑半抗原的合成方法,其特征在于,所述步骤S2中,所述中间体2的制备方法为:提供化合物1,所述化合物1具有结构式,其中X为卤素;向反应容器中加入3-叔丁基苯酚、碳酸钾和DMF,搅拌均匀后加入化合物1,油浴反应,油浴反应完毕后,反应混合物冷却至室温,将反应混合物浓缩、纯化,即得所述中间体2;其中,所述3-叔丁基苯酚、化合物1和碳酸钾的物质的量之比为1:(1.2-5):(2-10);油浴反应的温度为50-110℃。5.如权利要求2所述的乙螨唑半抗原的合成方法,其特征在于,所述步骤S3包括如下步骤:将无水三氯化铝和二氯甲烷加入反应器中,并在冰水浴下搅拌溶解;将中间体1和中间体2溶于二氯甲烷后,缓慢滴加到所述反应器中,滴加时间0.5-1h,滴加完毕后加热回流反应,反应结束后,将反应液冷却至室温;将反应液缓慢倒入冰水中,充分搅拌,然后用二氯甲烷萃取,收集有机相,有机相经洗涤、干燥、浓缩得到中间体3。6.如权利要求5所述的乙螨唑半抗原的合成方法,其特征在于,所述中间体1、中间体2和无水三氯化铝的物质的量之比为1:(1.2-2):(1-3)。7.如权利要求2所述的乙螨唑半抗原的合成方法,其特征在于,所述步骤S4包括如下步骤:向反应容器中加入中间体3、浓碱溶液和甲醇,油浴反应,反应完毕后,蒸干甲醇,加水后用乙酸乙酯萃取,经水洗、干燥、浓缩、过柱纯化后得中间体4;其中,油浴反应的温度为40-80℃;所述浓碱溶液选自饱和氢氧化钠溶液、饱和氢氧化钾溶液、饱和氢氧化锂溶液中的一种或多种。8.如权利要求2所述的乙螨唑半抗原的合成方法,其特征在于,所述步骤S5包括如下步骤:向反应容器中加入中间体4、高碘酸盐、三氯化钌和混合溶剂,油浴反应,反应结束后将反应液冷却后浓缩,加水稀释,用乙酸乙酯萃取,收集有机相,有机相经干燥、浓缩、过柱纯化得到所述乙螨唑半抗原。9.如权利要求8所述的乙螨唑半抗原的合成方法,其特征在于,所述中间体4、高碘酸盐、三氯化钌的物质的量之比为1:(3-8):(0.05-0.2);所述高碘酸盐为高碘酸钾或高碘酸钠;所述混合溶剂由四氯化碳、乙腈和