一种炔螨特半抗原及其合成方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110156651A(43)申请公布日2019.08.23(21)申请号201910310447.1C07C43/205(2006.01)(22)申请日2019.04.17G01N33/68(2006.01)(71)申请人深圳市易瑞生物技术股份有限公司地址518101广东省深圳市宝安区新安街道留仙一路2-1号(72)发明人叶雅真田宏杨星星魏雄军黎维杨中杨林林(74)专利代理机构广州专理知识产权代理事务所(普通合伙)44493代理人谭昉(51)Int.Cl.C07C323/64(2006.01)C07C319/16(2006.01)C07C301/00(2006.01)C07C41/03(2006.01)权利要求书2页说明书5页(54)发明名称一种炔螨特半抗原及其合成方法和应用(57)摘要本发明的目的在于提供一种炔螨特半抗原及其合成方法和应用，通过结合炔螨特的结构特点设计出一种炔螨特半抗原的合成方法，并将其应用于合成炔螨特人工抗原，从而诱导免疫动物产生抗日，建立炔螨特各种免疫分析方法。本发明炔螨特半抗原的合成方法如下：（1）4-叔丁基苯酚和1,2-环氧-4-乙烯基环己烷反应制备中间产物I；（2）中间产物I与氯化亚砜反应制备中间产物II；（3）中间产物II与丙炔醇的反应制备中间产物III；（4）中间产物III与3-巯基丙酸反应制备半抗原IV。合成的炔螨特半抗原既最大程度保留了炔螨特的特征结构，使得炔螨特半抗原的免疫原性明显增强，又具有可以与载体发生偶联的羧基，为后续建立炔螨特的各种免疫分析方法提供基础。CN110156651ACN110156651A权利要求书1/2页1.一种炔螨特半抗原，其特征在于，其结构如下所示：2.权利要求1所述的炔螨特半抗原的合成方法，其特征在于，包括如下步骤：1)取4-叔丁基苯酚和1,2-环氧-4-乙烯基环己烷混合，搅拌之后加入碱和溶剂反应，得到中间产物I；2)取甲苯和氯化亚砜混合，降温至0℃开始搅拌，加入中间产物I，冰浴条件下反应，得中间产物II，冷藏；3)取甲苯、三乙胺和丙炔醇混合，通氮气，冰浴条件下搅拌，滴加步骤2)制得的中间产物II，先冰浴反应，后室温反应，之后加入乙酸乙酯和纯水反复萃取有机层，得中间产物III；4)取步骤3)制得的中间产物III、3-巯基丙酸、安息香双甲醚和二氯甲烷混合，搅拌，紫外光照，反应之后得半抗原IV；以上所有反应的合成路线如下：3.由权利要求2所述的炔螨特半抗原的合成方法，其特征在于，步骤1)中所述4-叔丁基苯酚与1，2-环氧-4-乙烯基环己烷的用量摩尔比为1.0：(1.0-1.2)；所述碱包括氢氧化钠或者氢氧化钾；所述溶剂包括甲苯或者纯化水。4.由权利要求2所述的炔螨特半抗原的合成方法，其特征在于，步骤2)中所述中间产物I与氯化亚砜的用量摩尔比为1.0：(1.0-1.5)；中间产物I与甲苯的质量体积比为1.0g：(1.0ml-5.0ml)。5.由权利要求2或3或4所述的炔螨特半抗原的合成方法，其特征在于，步骤3)中所述中间产物I、丙炔醇和三乙胺的用量摩尔比为1.0：(1.5-2.0)：(1.5-2.0)。2CN110156651A权利要求书2/2页6.由权利要求5所述的炔螨特半抗原的合成方法，其特征在于，步骤3)中所述滴加中间产物II时控制温度在0～5℃，室温反应时间为2～3h。7.由权利要求2或3或4所述的炔螨特半抗原的合成方法，其特征在于，步骤4)中所述中间产物III、3-巯基丙酸和安息香单甲醚的用量摩尔比为1.0：(1.5-3.0)：0.1；所述紫外波长为254～365nm。8.权利要求1所述的炔螨特半抗原的应用，其特征在于，所述炔螨特半抗原用于制备炔螨特人工免疫抗原。9.权利要求1所述的炔螨特半抗原的应用，其特征在于，所述炔螨特半抗原用于食品中炔螨特残留检测的免疫分析。3CN110156651A说明书1/5页一种炔螨特半抗原及其合成方法和应用技术领域[0001]本发明属于食品安全检测的技术领域，具体涉及一种炔螨特半抗原及其合成方法和应用。背景技术[0002]炔螨特又名克螨特，它是一种高效、低毒、广谱、持效期长的有机硫杀螨剂,可以有效防治螨类危害，对成螨和若螨有特效，可用于防治棉花、蔬菜、苹果、柑桔、茶、花卉等作物各种害螨。具有防治效果好、成本低、不易产生抗药性等优点。其对人畜毒性低，对天敌和经济昆虫如瓢虫、草蛉、蜜蜂和家蚕均安全。由于其药效显著，不易产生抗药性而深受欢迎。少量的农药残留不会导致急性中毒，但长期食用炔螨特残留超标的蔬果，可能对人体健康产生一定的不良影响，存在安全隐患。[0003]现有的炔螨特的检测方法主要有高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、液相-质谱联用(L