一种靶向BCMA的嵌合抗原受体及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110041433A(43)申请公布日2019.07.23(21)申请号201910345716.8A61P35/00(2006.01)(22)申请日2019.04.26A61P35/02(2006.01)(71)申请人上海科棋药业科技有限公司地址200120上海市浦东新区紫萍路908弄5号5层5B室(72)发明人郝瑞栋李彦涛刘根桃张大挺易桥勇红丽吴国祥(74)专利代理机构上海申新律师事务所31272代理人车超平(51)Int.Cl.C07K19/00(2006.01)C12N15/62(2006.01)C12N5/10(2006.01)C12N15/867(2006.01)A61K35/17(2015.01)权利要求书1页说明书11页序列表9页附图6页(54)发明名称一种靶向BCMA的嵌合抗原受体及其应用(57)摘要本发明涉及一种靶向BCMA的嵌合抗原受体，包括胞外识别区、铰链区、跨膜区和胞内信号区，所述胞外识别区为抗-BCMA纳米抗体序列，所述抗-BCMA纳米抗体序列为结合BCMA的来源于羊驼的重链可变区序列。更具体地，所述抗-BCMA纳米抗体序列为BCMA单克隆抗体B1或B65，所述B1的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示，所述B65的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。本发明采用羊驼来源的纳米抗体，相比传统的鼠源或人源化的SCFV具有较小分子量及免疫原性，以此为基础制备的CAR-T细胞在体内产生HAMA效应的可能性更小，其在体内存留时间可能更长，其通过靶向肿瘤细胞表面的BCMA蛋白并激活T细胞下游的信号通路，赋予T细胞杀伤带有BCMA靶点肿瘤细胞的能力，可高效特异的治疗BCMA阳性血液肿瘤。CN110041433ACN110041433A权利要求书1/1页1.一种靶向BCMA的嵌合抗原受体，包括包括胞外识别区、铰链区、跨膜区和胞内信号区，其特征在于，所述胞外识别区为抗-BCMA纳米抗体序列，所述抗-BCMA纳米抗体序列为结合BCMA的来源于羊驼的重链可变区序列。2.根据权利要求1所述的一种靶向BCMA的嵌合抗原受体，其特征在于，所述抗-BCMA纳米抗体序列为BCMA单克隆抗体B1或B65，所述B1的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示，所述B65的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。3.根据权利要求1所述的一种靶向BCMA的嵌合抗原受体，其特征在于，所述铰链区为CD8hinge区域，其氨基酸序列如SEQIDNO.3所示。4.根据权利要求1所述的一种靶向BCMA的嵌合抗原受体，其特征在于，所述所述跨膜区选自CD8跨膜区、CD28跨膜区、ICOS跨膜区中的任一个。5.根据权利要求4所述的一种靶向BCMA的嵌合抗原受体，其特征在于，所述CD8跨膜区的氨基酸序列如SEQIDNO.4所示，所述CD28跨膜区的氨基酸序列如SEQIDNO.5所示，所述ICOS跨膜区的氨基酸序列如SEQIDNO.6所示。6.根据权利要求1所述的一种靶向BCMA的嵌合抗原受体，其特征在于，所述胞内信号区包含CD28、4-1BB、ICOS、CD3ζ中的至少一个。7.根据权利要求6所述的一种靶向BCMA的嵌合抗原受体，其特征在于，所述CD28的氨基酸序列如SEQIDNO.7所示，所述4-1BB的氨基酸序列如SEQIDNO.8所示，所述ICOS的氨基酸序列如SEQIDNO.9所示，所述CD3ζ的氨基酸序列如SEQIDNO.10所示。8.根据权利要求1所述的一种靶向BCMA的嵌合抗原受体，其特征在于，所述BCMA嵌合抗原受体为B1-BBZ，则其胞外识别区为B1，铰链区为CD8hinge区域，跨膜区为CD8，胞内信号区为4-1BB-CD3ζ，所述B1-BBZ的氨基酸序列如SEQIDNO.11所示。9.根据权利要求1所述的一种靶向BCMA的嵌合抗原受体，其特征在于，所述BCMA嵌合抗原受体为B65-BBZ，则其胞外识别区为B65，铰链区为CD8hinge区域，跨膜区为CD8，胞内信号区为4-1BB-CD3ζ；所述B65-BBZ的氨基酸序列如SEQIDNO.12所示。10.一种编码如权利要求1～9中任一项所述的BCMA特异性嵌合抗原受体的核酸。11.根据权利要求10所述的核酸，其特征在于，所述核酸包括SEQIDNO.13～SEQIDNO.14所示的核苷酸序列中的至少一个。12.一种含有如权利要求10～11中任一项所述的核酸的重组表达载体。13.一种含有如权利要求12所述的重组表达载体的宿主细胞。14.一种如权利要求13所述的宿主细胞的构建方法，其特征在于，包括重组表达载体的构建步骤、重组表达载体的包装步骤以及将重组表达载体转导至宿主细胞的步骤。15.权利要求1-9中任一项所述的BCMA特异性