靶向BCMA的纳米抗体、嵌合抗原受体及其应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115947853A(43)申请公布日2023.04.11(21)申请号202211679187.3C12N5/10(2006.01)(22)申请日2022.12.26A61K39/00(2006.01)A61K47/68(2017.01)(71)申请人河北森朗生物科技有限公司A61P35/00(2006.01)地址050000河北省石家庄市高新区黄河A61P35/02(2006.01)大道136号1号楼512、513室G01N33/68(2006.01)(72)发明人李建强王琳赵娜G01N33/574(2006.01)(74)专利代理机构北京预立生科知识产权代理有限公司11736专利代理师朱萍(51)Int.Cl.C07K16/28(2006.01)C12N15/13(2006.01)C07K19/00(2006.01)C12N15/62(2006.01)C12N15/867(2006.01)权利要求书7页说明书22页序列表（电子公布）附图8页(54)发明名称靶向BCMA的纳米抗体、嵌合抗原受体及其应用(57)摘要本发明公开了靶向BCMA的纳米抗体、嵌合抗原受体及其应用，所述纳米抗体包括VHH01和VHH02，其对BCMA均具有较强的特异性和较高的亲和力，均能够与BCMA阳性细胞系以高亲和力发生特异性地结合，基于所述纳米抗体构建得到的CAR‑T细胞对BCMA阳性细胞系具有较高的特异性杀伤效率，本发明为基于BCMA靶点的免疫治疗药物的开发提供了研发基础。CN115947853ACN115947853A权利要求书1/7页1.靶向BCMA的纳米抗体，其特征在于，所述纳米抗体包括VHH01、VHH02；优选地，所述VHH01的CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列分别如SEQIDNO:3、SEQIDNO:5、SEQIDNO:7所示；更优选地，所述VHH01的CDR1、CDR2、CDR3的核苷酸序列分别如SEQIDNO:4、SEQIDNO:6、SEQIDNO:8所示；最优选地，所述VHH01的氨基酸序列如SEQIDNO:1所示；最优选地，所述VHH01的核苷酸序列如SEQIDNO:2所示；优选地，所述VHH02的CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列分别如SEQIDNO:11、SEQIDNO:13、SEQIDNO:15所示；更优选地，所述VHH02的CDR1、CDR2、CDR3的核苷酸序列分别如SEQIDNO:12、SEQIDNO:14、SEQIDNO:16所示；最优选地，所述VHH02的氨基酸序列如SEQIDNO:9所示；更优选地，所述VHH02的核苷酸序列如SEQIDNO:10所示。2.基于单纳米抗体的靶向BCMA的嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体包含权利要求1所述的纳米抗体中的任意一种；优选地，所述嵌合抗原受体还包含跨膜结构域；优选地，所述嵌合抗原受体还包含胞内信号传导结构域；优选地，所述嵌合抗原受体还包含铰链区；优选地，所述嵌合抗原受体还包含信号肽；优选地，所述嵌合抗原受体还包含共刺激信号结构域；优选地，所述嵌合抗原受体还包含启动子；优选地，所述嵌合抗原受体还包含自断裂肽；优选地，所述嵌合抗原受体还包含检测标签/辅助功能元件；优选地，所述嵌合抗原受体还包含tEGFR信号肽；更优选地，所述跨膜结构域包括下列分子的跨膜结构域：CD8α、CD28、4‑1BB、CD34、CD3ε、PD‑1、IgG1、IgG4、OX40、IL‑2受体、IL‑7受体、IL‑11受体；更优选地，所述胞内信号传导结构域包括下列分子的胞内信号传导结构域：CD3ζ、CD3γ、CD3δ、CD3ε、FcRγ、FcRβ、TCRζ、CD4、CD5、CD8、CD21、CD22、CD79a、CD79b、CD278、FcεRI、DAP10、DAP12、CD66d；更优选地，所述铰链区包括下列分子的铰链区：CD8α、CD28、CD34、4‑1BB、OX40、CD3ε、IgG1、IgG4、PD‑1、IL‑2受体、IL‑7受体、IL‑11受体；更优选地，所述信号肽包括下列分子的信号肽：T细胞受体的α链及β链、CD3ζ、CD3ε、CD16、CD22、CD33、CD4、CD5、CD8、CD9、CD28、CD37、CD45、CD64、CD80、CD86、CD134、CD137、CD154、GITR、GM‑CSF；更优选地，所述共刺激信号结构域包括下列分子的共刺激信号结构域：4‑1BB(CD137)、CD19、CD4、CD27、CD28、ICOS(CD278)、CD8α、CD8β、BAFFR、HVEM、LIGHT、KIRDS2、SLAMF7、NKp30、NKp46、CD40、CDS、ICAM‑1、B7‑H3、OX