一种靶向BCMA的嵌合抗原受体（CAR）及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112457416A(43)申请公布日2021.03.09(21)申请号202011481343.6(22)申请日2020.12.15(71)申请人北京广未生物科技有限公司地址100081北京市海淀区广源闸5号1幢7层701-286(72)发明人刘欢杨洋(51)Int.Cl.C07K19/00(2006.01)C12N15/62(2006.01)C12N15/867(2006.01)C12N5/10(2006.01)A61K39/00(2006.01)A61P35/00(2006.01)权利要求书1页说明书9页序列表7页附图4页(54)发明名称一种靶向BCMA的嵌合抗原受体（CAR）及其应用(57)摘要本发明属于生物制药技术领域，具体涉及一种靶向BCMA的嵌合抗原受体(CAR)及其应用，该嵌合抗原受体以靶向BCMA的单域抗体为抗原结合域，对CD3ζ结构域进行改造，缺失了部分ITAM1和ITAM3，保留原始ITAM2，并优化了ITAM2中部分氨基酸序列，可以提高CAR‑T内体存活时间，降低炎症因子表达水平，具有较好的临床应用前景。CN112457416ACN112457416A权利要求书1/1页1.一种靶向BCMA的嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体包括信号肽、靶向BCMA的单域抗体、铰链区、跨膜区、共刺激因子和胞内信号域，所述靶向BCMA的单域抗体的互补决定区(CDR区)氨基酸序列依次为：SEQIDNO:1所示CDR1，SEQIDNO:2所示CDR2和SEQIDNO:3所示CDR3，胞内信号域为修饰后的CD3ζ胞内信号域，其氨基酸序列如SEQIDNO:5所示。2.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述单域抗体的氨基酸序列如SEQIDNO:4所示。3.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述跨膜区为CD28跨膜区，其氨基酸序列如SEQIDNO:6所示；所述铰链区其氨基酸序列如SEQIDNO:7所示；所述共刺激因子选自CD28，其氨基酸序列如SEQIDNO:8所示，所述信号肽氨基酸序列如SEQIDNO:9所示。4.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，其氨基酸序列如SEQIDNO:10所示。5.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，其核苷酸序列如SEQIDNO:11所示。6.一种嵌合抗原受体T细胞，其特征在于，所述嵌合抗原受体T细胞表达权利要求1-5所述的嵌合抗原受体。7.权利要求6中所述的嵌合抗原受体T细胞在制备抗肿瘤药物中的应用。8.根据权利要求7所述的应用，所述的肿瘤为多发性骨髓瘤。2CN112457416A说明书1/9页一种靶向BCMA的嵌合抗原受体(CAR)及其应用技术领域[0001]本发明属于生物制药领域，具体涉及一种靶向BCMA的嵌合抗原受体(CAR)及其应用，尤其是涉及一种CD3ζ信号域经改造的嵌合抗原受体及其应用。背景技术[0002]嵌合抗原受体T细胞(CAR-T细胞)是指被高亲和性的嵌合抗原受体修饰的具有杀伤作用的T细胞，被基因修饰后的T细胞能够特异性地识别肿瘤抗原，识别后可激活T细胞使其大量增殖并通过免疫反应杀伤肿瘤细胞。CAR-T细胞技术的发展经历了一定的曲折和探索，第一代CAR-T细胞内只有单一信号分子，能够特异性识别靶抗原，但是缺乏协同刺激分子不能持续有效杀伤肿瘤细胞，所以无法充分激活是第一代CAR-T细胞的最主要缺陷，正因如此，第一代CAR-T细胞多用于理论研究，由于效果不佳这种新型细胞免疫疗法长期没有受到人们的关注。第二代CAR-T细胞借鉴了T细胞的双激活理论，在第一代的基础上增加了一个协同刺激分子，提高了第二代CAR-T细胞的增值分泌能力和持久性，从而增强了其抗癌效应。受到第二代CAR-T细胞成功的启发，研究人员尝试在第二代的基础上整合两个及以上的协同刺激分子，从而构建了第三代CAR-T细胞，提高了CART细胞的存活时间，进一步增强CAR-T细胞的抗癌效应。由于人体内存在多种抗肿瘤信号通路，研究人员试图将CAR-T细胞技术与其他肿瘤免疫疗法结合，故在第三代的基础上形成嵌合其他抗肿瘤信号通路的新型免疫治疗细胞，从而构成了第四代CAR-T细胞，在所选择的其他肿瘤信号通路中常用的包括IL-2、IL-12、TNF-α等抗肿瘤因子，以及PD-1、PD-L1和CTLA4等肿瘤免疫检查点。[0003]多发性骨髓瘤(multiplemyeloma，MM)是一种浆细胞肿瘤性疾病，主要特征是单克隆浆细胞的恶性增殖，它是一种常见的血液恶性肿瘤，在血液系统恶性肿瘤中占比约13％，MM的生存期很短，如果不进行任何治疗，进展期MM患者的中位生存期为6个月，即使接受一般抗肿瘤治疗，中位生存期也仅为3-5年