一种引导种植体周围骨组织再生的生物羊膜及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110101910A(43)申请公布日2019.08.09(21)申请号201910400441.3(22)申请日2019.05.15(71)申请人南京医科大学附属口腔医院地址210029江苏省南京市汉中路140号(72)发明人王羽立杜一飞卞一峰严子欣郝舒姝刘柯玥李轩徐帆(74)专利代理机构北京汇捷知识产权代理事务所(普通合伙)11531代理人邢文月(51)Int.Cl.A61L27/36(2006.01)A61L27/50(2006.01)权利要求书1页说明书4页(54)发明名称一种引导种植体周围骨组织再生的生物羊膜及其制备方法(57)摘要本发明公开了一种引导种植体周围骨组织再生的生物羊膜及其制备方法。本发明通过将羊膜在4℃的溶液1中浸泡10～12h，清洗，将羊膜加入到室温的溶液2中，摇匀后浸泡22～24h，清洗；将羊膜加入到37℃的溶液3中，轻柔搅拌羊膜组织3～4h，清洗；最好将经羊膜进行裁切、灭菌、干燥以及冷藏。本发明制备的生物羊膜，在确保生物羊膜的生物安全性的同时，能有效保留及发挥羊膜的天然活性功能；该羊膜膜片刚度的增加增强了支架的稳定性，防止了导致不间断愈合的移位，使得支架具有足够的弹性来维持周围组织的剪切应力，该羊膜膜片应用于种植体周围引导骨组织再生时可同时引导角化龈生长，能抑制瘢痕形成，可有效形成长期物理屏障保护创面，具有极好的临床应用前景。CN110101910ACN110101910A权利要求书1/1页1.一种引导种植体周围骨组织再生的生物羊膜的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)将羊膜在4℃的溶液1中浸泡10～12h，清洗；所述溶液1为包含0.1～0.5％(w/v)乙二胺四乙酸以及10KIU/mL蛋白酶抑制剂的10mM三羟甲基氨基甲烷缓冲液；(2)将经步骤(1)处理后的羊膜加入到室温的溶液2中，摇匀后浸泡22～24h，清洗；其中，所述溶液2为包含0.03～0.05％(w/v)十二烷基硫酸钠和0.1～0.5％(w/v)乙二胺四乙酸的三羟甲基氨基甲烷缓冲液；(3)将经步骤(2)处理后的羊膜加入到37℃的溶液3中，轻柔搅拌羊膜组织3～4h，清洗；其中，所述溶液3为包含50～55U/mLDNA酶、1～2U/mLRNA酶、10～12mM氯化镁的三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液；(4)将经步骤(3)处理后的羊膜进行裁切、灭菌、干燥以及冷藏。2.如权利要求1所述的引导种植体周围骨组织再生的生物羊膜的制备方法，其特征在于，所述清洗为用三羟甲基氨基甲烷缓冲液清洗。3.如权利要求1所述的引导种植体周围骨组织再生的生物羊膜的制备方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述溶液1、溶液2、溶液3的pH均为8.0；所述溶液1中乙二胺四乙酸浓度为0.1％(w/v)；所述羊膜在溶液1中的浸泡的时间为10h。4.如权利要求1所述的引导种植体周围骨组织再生的生物羊膜的制备方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述溶液2中十二烷基硫酸钠浓度为0.03％(w/v)、乙二胺四乙酸浓度为0.1％(w/v)；所述羊膜在溶液2中的浸泡的时间为22h。5.如权利要求1所述的引导种植体周围骨组织再生的生物羊膜的制备方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述溶液3中DNA酶浓度为50U/mL、RNA酶浓度为1U/mL、氯化镁浓度为10mM；所述搅拌的时间为3h。6.如权利要求1所述的引导种植体周围骨组织再生的生物羊膜的制备方法，其特征在于，在步骤(4)中，所述羊膜裁切为长度为10～70mm、宽度为10～70mm的矩形或正方形膜片。7.如权利要求1所述的引导种植体周围骨组织再生的生物羊膜的制备方法，其特征在于，在步骤(4)中，所述灭菌为电离辐射灭菌，该电离辐射是伽马射线辐照或是高能电子束辐照，剂量为15～25kGy。8.权利要求1～7任一项所述方法制备得到的生物羊膜。2CN110101910A说明书1/4页一种引导种植体周围骨组织再生的生物羊膜及其制备方法技术领域[0001]本发明属于医用材料领域，尤其涉及一种引导种植体周围骨组织再生的生物羊膜及其制备方法。背景技术[0002]人类羊膜是胎盘的最里面的一层膜，它是一种薄的半透明膜，通常厚度为20～500微米，质地坚硬，没有血管、淋巴管和神经。人羊膜沿羊膜腔排列，它的顶面沐浴在羊水中，而基面位于绒毛膜上。羊膜由单层外胚层衍生的柱状上皮细胞附着于基底膜上，基底膜主要由胶原I、胶原III、胶原IV、层粘连蛋白和纤维连接蛋白组成，而纤维连接蛋白又附着于结缔组织的下层。结缔组织有3个组成部分：由网状纤维组成的脱细胞致密层、成纤维细胞层(是一个松散的网状结构，含有零星的成纤维细胞)以及海绵状层(它与下面的脉络膜接触，由由黏液包围的精细纤维组成的复杂网络构