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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110200916A(43)申请公布日2019.09.06(21)申请号201910378947.9A61P35/00(2006.01)(22)申请日2019.05.08A61P35/04(2006.01)(71)申请人北京大学地址100191北京市海淀区颐和园路5号申请人中国科学院生物物理研究所(72)发明人王凡史继云翟洛萍(74)专利代理机构北京国林贸知识产权代理有限公司11001代理人李瑾李连生(51)Int.Cl.A61K9/127(2006.01)A61K47/42(2017.01)A61K47/24(2006.01)A61K47/28(2006.01)A61K31/704(2006.01)权利要求书2页说明书8页附图6页(54)发明名称一种双重酸敏性脂质体、以其为载体的药物及其制备方法(57)摘要本发明公开了一种双重酸敏性脂质体、以其为载体的药物及其制备方法。该双重酸敏性脂质体,以pH敏感性磷脂和含有羧基的脂质形成磷脂双分子层骨架,表面修饰酸敏性线性多肽DVar7,多肽DVar7的氨基酸序列为ACEEQNPWARYLEWLFPTETLLLEL。以该双重酸敏性脂质体为载体可制备抗癌药物。本发明的双重酸敏性脂质体将酸性pH敏感多肽和pH敏感磷脂联合起来,提高了肿瘤对药物的摄取,延长了药物在肿瘤中的滞留时间,增加了药物的控释和递送效率,与单纯化药、普通脂质体载药、单响应脂质体载药的治疗效果相比,获得了更好的肿瘤抑制效果。CN110200916ACN110200916A权利要求书1/2页1.一种双重酸敏性脂质体,其特征在于:以pH敏感性磷脂和含有羧基的脂质形成磷脂双分子层骨架,表面修饰酸敏性线性多肽DVar7,所述多肽DVar7为全D型多肽,氨基酸序列为ACEEQNPWARYLEWLFPTETLLLEL。2.根据权利要求1所述的双重酸敏性脂质体,其特征在于:所述pH性敏感磷脂为DOPE,所述含有羧基的脂质为CHEMS。3.根据权利要求1所述的双重酸敏性脂质体,其特征在于:所述多肽DVar7通过DSPE-PEGn连接至磷脂双分子层骨架表面,n为1000~3000。4.根据权利要求3所述的双重酸敏性脂质体,其特征在于:n为2000。5.一种以权利要求1~4中任意一项所述的双重酸敏性脂质体为载体形成的药物。6.根据权利要求5所述药物,其特征在于:所述双重酸敏性脂质体内部的亲水核心包载有阿霉素。7.一种双重酸敏性脂质体的制备方法,所述双重酸敏性脂质体,以pH敏感性磷脂和含有羧基的脂质形成磷脂双分子层骨架,表面修饰酸敏性线性多肽DVar7,所述多肽DVar7的氨基酸序列为ACEEQNOWARYLEWLFPTETLLLEL;所述pH敏感性磷脂为DOPE,所述含有羧酸的脂质为CHEMS;所述多肽DVar7通过DSPE-PEG2000连接至磷脂双分子层骨架表面,其特征在于:包括以下制备步骤:1)合成DSPE-PEG2000-DVar7:由线性多肽DVar7与DSPE-PEG2000-MAL偶联合成DSPE-PEG2000-DVar7;2)制备单酸敏脂质体:将制备单酸敏脂质体的各种材料:包括DOPE、CHEMS、DSPE-PEG2000,在反应器中用氯仿溶解,37℃水浴条件下,抽真空旋蒸去除溶剂获得脂膜;加入中性缓冲液,37℃水浴,涡旋使脂膜脱落,超声,形成均一稳定的脂质体溶液;将脂质体溶液过SephadexG-50凝胶柱,用缓冲液洗脱,获得单酸敏脂质体;3)DSPE-PEG2000-DVar7插入至单酸敏脂质体:将步骤2)制备得到的单酸敏脂质体与步骤1)制备的DSPE-PEG2000-DVar7混合,于50~60℃水浴中反应0.5~2h,至脂质体溶液恢复澄清即插入完成,得到双重酸敏性脂质体。8.根据权利要求7所述的双重酸敏性脂质体的制备方法,其特征在于:DOPE、CHEMS、DSPE-PEG2000、DSPE-PEG2000-DVar7的质量比为:60:40:4:2。9.一种包载阿霉素的双重酸敏性脂质体的制备方法,所述双重酸敏性脂质体,以pH敏感性磷脂和含有羧酸的脂质形成磷脂双分子层骨架,表面修饰酸敏性线性多肽DVar7,所述多肽DVar7的氨基酸序列为ACEEQNOWARYLEWLFPTETLLLEL;所述pH敏感磷脂为DOPE,所述含有羧酸的脂质为CHEMS;所述多肽DVar7通过DSPE-PEG2000连接至磷脂双分子层骨架表面,其特征在于:包括以下制备步骤:1)合成DSPE-PEG2000-DVar7:由线性多肽DVar7与DSPE-PEG2000-MAL偶联合成DSPE-PEG2000-DVar7;2)制备单酸敏脂质体:将制备单酸敏脂质体的各种材料:包