一种中药复方降糖药中格列本脲含量测定方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110346477A(43)申请公布日2019.10.18(21)申请号201910689887.2(22)申请日2019.07.29(71)申请人湖南正清制药集团股份有限公司地址418005湖南省怀化市怀化高新技术产业开发区财富路7号(72)发明人朱永波仇萍李苏翠彭祖仁彭海鹏周勇勇周欣曾颖吴飞驰向卫国滕健(74)专利代理机构北京动力号知识产权代理有限公司11775代理人王铁军(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/06(2006.01)权利要求书1页说明书7页附图2页(54)发明名称一种中药复方降糖药中格列本脲含量测定方法(57)摘要本发明公开了一种中药复方降糖药中格列本脲含量测定方法，包括以下步骤：采用液相色谱法，分别取对照品溶液、供试品溶液10μL进行测量，对照品溶液与供试品溶液中含格列本脲的浓度为40～60μg/mL的甲醇溶液；其中，使用C185μm250mm×4.6mm色谱柱；采用体积比为3:6-7的磷酸二氢铵溶液-甲醇为流动相，其中磷酸二氢铵溶液浓度为0.05mol/L，用磷酸调节pH至3.5±0.05；检测波长为300nm；测量并记录色谱图，按外标法以峰面积计算。本发明的优点为克服中药复杂成分对主峰的干扰，提高分析方法的准确性，保障色谱适用性的基础上将主峰保留时间提前，提高了检验效率。CN110346477ACN110346477A权利要求书1/1页1.一种中药复方降糖药中格列本脲含量测定方法，其特征在于包括以下步骤：采用液相色谱法，分别取对照品溶液、供试品溶液10μL进行测量；其中，使用C185μm250mm×4.6mm色谱柱；采用体积比为3:6-7的磷酸二氢铵溶液-甲醇为流动相，其中磷酸二氢铵溶液浓度为0.05mol/L，用磷酸调节pH至3.5±0.05；检测波长为300nm；流速为1.0mL/min；理论塔板数按格列本脲计不低于2000；测量并记录色谱图，按外标法以峰面积计算，得到所述中药复方降糖药中格列本脲的含量。2.根据权利要求1所述的中药复方降糖药中格列本脲含量测定方法，其特征在于：所述对照品溶液为格列本脲对照品甲醇溶液，其浓度为40-60μg/mL；所述供试品溶液为中药复方降糖药甲醇溶液，其中的格列本脲的浓度为40-60μg/mL。3.根据权利要求2所述的中药复方降糖药中格列本脲含量测定方法，其特征在于：所述供试品溶液的配制方法为取中药复方降糖药置于容器中，加入甲醇，进行超声处理30min，取出，冷却后称重，用甲醇补足减轻的重量，摇匀、过滤，其中的格列本脲的浓度为40-60μg/mL。4.根据权利要求1或2所述的中药复方降糖药中格列本脲含量测定方法，其特征在于：所述测定方法还包括取10μL阴性对照液，采用液相色谱法进行测量，记录色谱图，所述阴性对照液的配制方法为按所述中药复方降糖药配方取除格列本脲的其它成分0.64-0.96g混合均匀，加甲醇25mL，超声处理30min，摇匀，滤过，制得所述阴性对照液。5.根据权利要求4所述的中药复方降糖药中格列本脲含量测定方法，其特征在于：所述中药复方降糖药由重量比为120-140:13.5:13.5:12.0:14.1:13.5:0.6:58的中药复方降糖药干浸膏、人参粉、黄连粉、羧甲淀粉钠、滑石粉、微粉硅胶、硬脂酸镁、95％乙醇制备而成。6.根据权利要求5所述的中药复方降糖药中格列本脲含量测定方法，其特征在于：所述中药复方降糖药干浸膏由重量比为220.5:40.5:220.5:81.0:60.75:81.0:81.0:60.75:27.0的天花粉、杜仲、黄芪、丹参、枸杞子、沙苑子、白芍、知母、五味子制备而成。7.根据权利要求1或2所述的中药复方降糖药中格列本脲含量测定方法，其特征在于：所述测定方法还包括取10μL格列本脲对照品溶液，采用液相色谱法进行测量，记录色谱图，所述格列本脲对照品溶液的配制方法为取格列本脲对照品12.5mg，精密称定，置50mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制得所述格列本脲对照品溶液。8.根据权利要求1或2所述的中药复方降糖药中格列本脲含量测定方法，其特征在于：所述测定方法还包括取10μL混合杂质对照品溶液，采用液相色谱法进行测量，记录色谱图，所述混合杂质对照品溶液的配制方法为取格列本脲杂质I与格列本脲杂质II，置于同一容器中，加甲醇溶解并稀释至刻度，混合均匀，所述混合杂质对照品溶液的浓度为40-60μg/mL，所述格列本脲杂质I为4-[2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基]苯磺酸胺，所述格列本脲杂质II为N-[4-[2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰氨基)乙基]苯磺酰基]氨基甲酸乙酯。9.根据权利要求8所述的中药复方降糖