一种快速测定中药复方中总苷含量的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112067564A(43)申请公布日2020.12.11(21)申请号202010959851.4(22)申请日2020.09.14(71)申请人湖南中医药大学地址410208湖南省长沙市岳麓区学士路300号湖南中医药大学含浦校区(72)发明人谢果珍唐圆肖嫩群谭周进(74)专利代理机构长沙智路知识产权代理事务所(普通合伙)43244代理人曲超(51)Int.Cl.G01N21/31(2006.01)G01N21/78(2006.01)G01N1/28(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图1页(54)发明名称一种快速测定中药复方中总苷含量的方法(57)摘要本发明提供一种快速测定中药复方中总苷含量的方法，包括以下步骤：S1提取：取中药复方组合物，提取，得提取液，该提取液为中药复方提取物；S2分离提纯：对所述中药复方提取物进行分离提纯，得到中药复方总苷；S3总苷含量测定：先用DNS法测定所述中药复方总苷中还原糖的含量，然后将所述中药复方总苷进行酸解，得到总糖，再用DNS法测定所述总糖含量，将所述总糖含量减去所述还原糖含量所得结果表征中药复方总苷含量。本发明所提供的方法，无需购买苷类化合物的标准品，无需结合苷类化合物的类型考虑测定仪器及条件，而且DNS法测定还原糖与总糖的方法成熟、简便、快捷，无需贵重仪器，易于操作，适用于中药复方中总苷提取工艺优化。CN112067564ACN112067564A权利要求书1/1页1.一种快速测定中药复方中总苷含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、提取：取中药复方组合物，提取，得提取液，所述提取液为中药复方提取物；S2、分离提纯：对所述中药复方提取物进行分离提纯，得到中药复方总苷；S3、总苷含量测定：先用DNS法测定所述中药复方总苷中还原糖含量，然后将所述中药复方总苷进行酸解，再用DNS法测定所述总糖含量，将所述总糖含量减去所述还原糖含量所得结果表征中药复方总苷含量。2.根据权利要求1所述的快速测定中药复方中总苷含量的方法，其特征在于，所述步骤S3中测定所述中药复方总苷中还原糖和总糖含量的方法包括以下步骤：(1)将所述中药复方总苷溶解于蒸馏水中，得总苷溶液；(2)取适量步骤(1)中的所述总苷溶液，加入第一DNS试剂，于540nm下测定总苷中还原糖的含量；(3)取适量步骤(1)中的所述总苷溶液，加入硫酸，水浴水解，然后取出并加入第二DNS试剂，水浴下显色，于540nm下测定总苷中总糖的含量；(4)将步骤(3)中所测得的总糖含量减去步骤(2)中所测得的还原糖含量，即为所述总苷溶液的总苷含量。3.根据权利要求2所述的快速测定中药复方中总苷含量的方法，其特征在于，所述第一DNS试剂和第二DNS试剂由以下方法制备：取45.5000g的酒石酸钠溶解于250mL的水中，依次加入1.6250g的3,5-二硝基水杨酸和10.0000的NaOH，加热搅拌至完全溶解，再加入1.2500g的苯酚和1.2500g的无水Na2SO4搅拌溶解，冷却后用容量瓶定容至500mL，摇匀后储存在棕色瓶中，避光放置7天。4.根据权利要求2所述的快速测定中药复方中总苷含量的方法，其特征在于，所述步骤(3)中所述硫酸的浓度为3mol/L。5.根据权利要求2所述的快速测定中药复方中总苷含量的方法，其特征在于，所述步骤(3)中水浴水解时间为80min。6.根据权利要求2所述的快速测定中药复方中总苷含量的方法，其特征在于，所述步骤(3)中水浴水解温度为90℃。7.根据权利要求2所述的快速测定中药复方中总苷含量的方法，其特征在于，所述步骤(3)中，所述总苷溶液与所述硫酸体积比为1：2。8.根据权利要求1所述的快速测定中药复方中总苷含量的方法，其特征在于，所述步骤S1中，对所述中药复方组合物的提取包括以下步骤：将所述中药复方组合物打粉，按处方比例称取后加10倍量水煎煮2次，每次1h，得水煎液；合并两次水煎液，浓缩，加入无水乙醇使乙醇最终浓度为75％，在4℃环境下静置，沉淀多糖，得醇提液。9.根据权利要求8所述的快速测定中药复方中总苷含量的方法，其特征在于，所述步骤S2中，所述分离提纯方法为：所述醇提液浓缩后用石油醚脱脂3次，水层用乙酸乙酯萃取3次，乙酸乙酯萃取后所得水层再用正丁醇萃取3次，合并乙酸乙酯层和正丁醇层溶液，蒸干乙酸乙酯和正丁醇溶剂，得中药复方总苷。10.根据权利要求1所述的快速测定中药复方中总苷含量的方法，其特征在于，所述中药复方组合物为中药饮片或由中药原料直接粉碎得到的散剂。2CN112067564A说明书1/5页一种快速测定中药复方中总苷含量的方法技术领域[0001]本发明涉及中药复方质检技术领域，更具体地，涉及一种快速测定中药复方中总苷含量的方