一种复方中药特征图谱构建及含量测定方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111103369A(43)申请公布日2020.05.05(21)申请号201911410029.6(22)申请日2019.12.31(71)申请人内蒙古康恩贝药业有限公司地址017000内蒙古自治区鄂尔多斯市杭锦旗锡尼镇109国道北侧伊泰药业院内1幢,2幢(72)发明人吴华铃平夏婷来灿林杨千千毕真真金辉辉宋永标麻懿文刘玮峰叶剑锋(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/86(2006.01)权利要求书2页说明书17页附图14页(54)发明名称一种复方中药特征图谱构建及含量测定方法(57)摘要本发明提供一种复方中药特征图谱构建及含量测定方法，包括以下步骤：取麝香通心滴丸破薄膜衣，加甲醇超声处理，取续滤液作为供试品溶液；取丹酚酸B对照品，加甲醇制成对照品溶液；将供试品溶液进行高效液相色谱分析，并根据与对照品的相对保留时间确定共有峰，采用标准品对照指证特征峰的化学成分，建立麝香通心滴丸的高效液相色谱特征图谱；根据标准品，计算待测成分的含量。本发明提供了一种能同时检测麝香通心滴丸中10个药效成分的特征图谱构建方法，并能对主要药效成分进行定量检测，稳定可靠、重现性好、精密度高，满足“一测多评”需求，弥补了麝香通心滴丸现有质量控制方法的不足。CN111103369ACN111103369A权利要求书1/2页1.一种复方中药特征图谱构建方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)供试品的制备：取麝香通心滴丸10～50丸压破薄膜衣，置具塞锥形瓶中，加入3～15mL甲醇，称重，超声处理，放冷后再次称重，用甲醇补足，摇匀，滤过，取续滤液，即得；(2)对照品的制备：取丹酚酸B对照品适量，加甲醇制成对照品溶液；(3)将供试品溶液进行高效液相色谱分析，得到高效液相色谱特征图谱，根据与对照品的相对保留时间确定共有峰，利用标准品对照确定特征峰，建立麝香通心滴丸的高效液相色谱特征图谱；所述高效液相色谱分析的条件为：色谱柱为SynergiTMHydro-RP(4.6×250mm，4μm)；流动相为0.005～0.05％磷酸乙腈(A)与0.005～0.05％磷酸水(B)；梯度洗脱：按照体积分数计，如表1所示：表1流动相洗脱梯度柱温为29～31℃；检测波长为198～206nm；流速为1.28～1.32mL/min。2.根据权利要求1所述的一种复方中药特征图谱构建方法，其特征在于，还可以在步骤(3)后增加步骤(4)根据标准品，计算供试品溶液中各成分的含量。3.根据权利要求1所述的一种复方中药特征图谱构建方法，其特征在于，步骤(1)中供试品制备为取滴丸40丸压破薄膜衣，置具塞锥形瓶中，加入10mL甲醇，称重，超声处理30min，放冷后再次称重，用甲醇补足，摇匀，滤过，取续滤液，即得。4.根据权利要求1所述的一种复方中药特征图谱构建方法，其特征在于，步骤(3)中流动相为0.02％磷酸乙腈(A)-0.02％磷酸水(B)。5.根据权利要求1所述的一种复方中药特征图谱构建方法，其特征在于，步骤(3)中梯度洗脱按照体积分数计为0～5min，5％A；5～13min，5→20％A；13～40min，20→22％A；40～60min，22→45％A；60～75min，45→70％A。6.根据权利要求1所述的一种复方中药特征图谱构建方法，其特征在于，步骤(3)中的检测波长为203nm。7.根据权利要求1所述的一种复方中药特征图谱构建方法，其特征在于，步骤(3)中的流速为1.30mL/min。8.根据权利要求1所述的一种复方中药特征图谱构建方法，其特征在于，步骤(3)中的柱温为30℃。9.根据权利要求1所述的一种复方中药特征图谱构建方法，其特征在于：步骤(3)中所述特征峰为10个，其中峰1为丹参素钠，相对保留时间为0.237；峰2为原儿茶醛，相对保留时间为0.366；峰3为丹酚酸D，相对保留时间为0.608；峰4为人参皂苷Rg1，相对保留时间为0.918；峰5为人参皂苷Re，相对保留时间为0.943；峰6为丹酚酸B，相对保留时间为1.000；峰2CN111103369A权利要求书2/2页7为沙蟾毒精，相对保留时间为1.082；峰8为蟾毒灵，相对保留时间为1.723；峰9为华蟾酥毒基，相对保留时间为1.830；峰10为脂蟾毒配基，相对保留时间为1.858。10.利用如权利要求1～9任一项方法构建的复方中药特征图谱进行麝香通心滴丸鉴别的方法，其特征在于，取麝香通心滴丸样品，按权利要求1～8任一项同法操作，得到麝香通心滴丸样品特征图谱，采用中药色谱指纹图谱相似性评价系统软件对所述样品特征图谱和权利要求9所述的复方中药特征图谱进行分析，相似度大于0.9为合格产品。3CN111103369A说明