一种细胞核靶向纳米药物载体及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110652593A(43)申请公布日2020.01.07(21)申请号201910808571.0A61P35/00(2006.01)(22)申请日2019.08.29C08G73/02(2006.01)(71)申请人中山大学地址510275广东省广州市海珠区新港西路135号(72)发明人韩世松帅心涛万文清(74)专利代理机构广州粤高专利商标代理有限公司44102代理人孙凤侠(51)Int.Cl.A61K47/62(2017.01)A61K47/54(2017.01)A61K47/60(2017.01)A61K47/69(2017.01)A61K31/704(2006.01)权利要求书1页说明书6页附图5页(54)发明名称一种细胞核靶向纳米药物载体及其制备方法和应用(57)摘要本发明公开了一种细胞核靶向纳米药物载体及其制备方法和应用。所述细胞核靶向纳米药物载体由PAMAM表面接枝细胞核靶向肽NLS得到PAMAM-NLS；其中所述PAMAM外围的部分氨基各自连接一个细胞核靶向肽NLS，PAMAM外围的氨基与细胞核靶向肽NLS的摩尔比为128:20～128:60。本发明以小粒径的树形高分子PAMAM为基础，在其表面修饰一定量的核定位信号肽NLS后，控制其尺寸在25nm之内，利用核定位信号肽NLS与核膜上核孔复合体的识别作用，同时由于其尺寸较小，能够高效且顺利的穿过细胞核，促进纳米载体转运到细胞核内，即可负载靶点在细胞核内的化学药物或者基因药物进入细胞核内，提高药效、减少药物的使用量和副作用；同时，纳米载体在体内能够降解，不会导致体内残留的问题。CN110652593ACN110652593A权利要求书1/1页1.一种细胞核靶向纳米药物载体，其特征在于，由PAMAM表面的氨基连接多个细胞核靶向肽NLS得到PAMAM-NLS。2.根据权利要求1所述细胞核靶向纳米药物载体，其特征在于，所述PAMAM外围的氨基与细胞核靶向肽NLS的摩尔比为128:20～60。3.根据权利要求1所述细胞核靶向纳米药物载体，其特征在于，所述PAMAM为第5代聚酰胺-胺型树枝大分子，其单个分子有128个氨基；所述细胞核靶向肽NLS源自于SV40，其功能序列为PKKKRKV，且在其氮端连接马来酰亚胺丙酸基团。4.根据权利要求1所述细胞核靶向纳米药物载体，其特征在于，所述细胞核靶向纳米药物载体中，PAMAM还可以接枝FA或者PEG中的一种或两种。5.权利要求1～3任一所述细胞核靶向纳米药物载体的制备方法，其特征在于，先将PAMAM外围的氨基与Traut’s试剂反应转化为巯基；然后将巯基化的PAMAM和NLS混溶于水中，加入三(2-羧乙基)膦和三乙胺反应，待反应结束后透析、冻干得到所述细胞核靶向纳米药物载体PAMAM-NLS。6.根据权利要求5所述细胞核靶向纳米药物载体的制备方法，其特征在于，巯基化PAMAM的制备过程如下：先将PAMAM溶于极性溶剂，加入Traut’s试剂、三乙胺和三(2-羧乙基)膦，混匀后在惰性气体氛围下反应，即可得到巯基化的PAMAM。7.根据权利要求6所述细胞核靶向纳米药物载体的制备方法，其特征在于，所述极性溶剂为甲醇、乙醇或水；巯基化PAMAM制备过程中，PAMAM、Traut’s试剂、三乙胺和三(2-羧乙基)膦的反应摩尔比为：1:60:120:120；反应温度为室温，反应时间12～24h；巯基化的PAMAM和NLS反应过程中，巯基化的PAMAM、NLS、三乙胺和三(2-羧乙基)膦的反应摩尔比为：1:20～60:120:120；反应温度为室温，反应时间24～48h。8.权利要求4所述细胞核靶向纳米药物载体的制备方法，其特征在于，先将PAMAM和活化后的PEG和/或FA混匀反应，即可在得到接枝PEG和/或FA的PAMAM；然后再将其与Traut’s试剂反应，将PAMAM表面剩余的氨基转化为巯基；最后再与NLS混溶于水中，加入三(2-羧乙基)膦和三乙胺反应，待反应结束后透析、冻干就可得到述接枝FA和/或PEG的细胞核靶向纳米药物载体PAMAM-NLS。9.权利要求1～4任一所述细胞核靶向纳米药物载体的应用，其特征在于，所述细胞核靶向纳米药物载体可负载化学药物或者基因药物。10.根据权利要求9所述细胞核靶向纳米药物载体的应用，其特征在于，所述化学药物或者基因药物的靶点均在细胞核内。2CN110652593A说明书1/6页一种细胞核靶向纳米药物载体及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明涉及纳米药物技术领域，更具体地，涉及一种细胞核靶向纳米药物载体及其制备方法和应用。背景技术[0002]生物体内拥有十分复杂的生理环境，治疗疾病的药物从人类摄取到发挥作用需要经过多重障