一种长眼表停留和高角膜渗透载药纳米胶束制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110693831A(43)申请公布日2020.01.17(21)申请号201910881630.7(22)申请日2019.09.18(71)申请人温州医科大学地址325000浙江省温州市瓯海区东方南路38号温州市国家大学科技园孵化器(72)发明人林森南开辉葛超翔王冬梅郑钦象陈蔚(74)专利代理机构温州金瓯专利事务所(普通合伙)33237代理人林益建(51)Int.Cl.A61K9/107(2006.01)A61K47/62(2017.01)A61K47/22(2006.01)A61P27/02(2006.01)权利要求书1页说明书4页附图4页(54)发明名称一种长眼表停留和高角膜渗透载药纳米胶束制备方法(57)摘要一种长眼表停留和高角膜渗透载药纳米胶束制备方法，利用眼表具有带负黏蛋白层的性质，通过在纳米胶束表面嫁接多肽，由于多肽具有两性解离的性质，通过多肽设计，使其在泪液环境中呈现带正电的性质，从而增加纳米粒子与眼表组织的相互作用，增加药物的眼表停留及角膜穿透，该药物载体能够包载不同疏水性药物后，用于不用眼表和眼内疾病的治疗。CN110693831ACN110693831A权利要求书1/1页1.一种长眼表停留和高角膜渗透载药纳米胶束制备方法,其特征在于，通过以下步骤制备：（1）PEG-PBA两亲共聚物制备：称取600mgγ-苄基-L-谷氨酸-N-羧酸内酸酐溶于10mL无水N,N-二甲基甲酰胺（DMF）中，并置于圆底烧瓶内，室温下磁力搅拌，并通氮气;将500mg两端分别为羧基和氨基的聚乙二醇（HOOC-PEG-NH2）溶于5mL氯仿中，通氮气10min后，加入上述圆底烧瓶内,磁力搅拌下37℃反应24h，乙醚沉淀，并过滤后，将沉淀用DMF复溶，用透析袋透析48h去除小分子反应副产物，并冷冻干燥得固体产物HOOC-PEG-PBG；（2）PEG-PBA功能化修饰：取HOOC-PEG-PBG与多肽（HKHKHK）在烧杯中溶于26mLDMF中，加入催化剂NHS与EDC开始反应，室温下磁力搅拌24h，产物中加入2mL哌啶，室温下继续搅拌1h，加入1.8mL冰醋酸终止反应，乙醚洗涤沉淀并过滤后，产物溶于10mLDMF,使用透析袋透析所得混合物，冷冻干燥即可得固体PEP-PEG-PBG；（3）共自组装纳米粒子制备：将PEP-PEG-PBG与HOOC-PEG-PBG以1mg/mL浓度分别溶于DMF，混匀后在超纯水中透析后得到所述的长眼表停留和高角膜渗透载药纳米胶束。2.根据权利要求1所述的一种长眼表停留和高角膜渗透载药纳米胶束制备方法，其特征在于，所述的γ-苄基-L-谷氨酸-N-羧酸内酸酐的用量为600mg。3.根据权利要求1所述的一种长眼表停留和高角膜渗透载药纳米胶束制备方法，其特征在于，所述的聚乙二醇用量为500mg。4.根据权利要求1所述的一种长眼表停留和高角膜渗透载药纳米胶束制备方法，其特征在于，所述的步骤（1）和步骤（2）中的透析袋的截留分子量（MWCO）均为3500Da。5.根据权利要求1所述的一种长眼表停留和高角膜渗透载药纳米胶束制备方法，其特征在于，所述的步骤（3）中PEP-PEG-PBG与HOOC-PEG-PBG的质量比x:y为0<x<10:0<y<10。6.根据权利要求1所述的一种长眼表停留和高角膜渗透载药纳米胶束制备方法，其特征在于，所述的步骤（3）中HOOC-PEG-PBG的用量为700mg，多肽（HKHKHK）的用量为135mg。7.根据权利要求1所述的一种长眼表停留和高角膜渗透载药纳米胶束制备方法，其特征在于，所述的步骤（3）中催化剂NHS与EDC的用量分别为12mg和15mg。2CN110693831A说明书1/4页一种长眼表停留和高角膜渗透载药纳米胶束制备方法技术领域[0001]本发明具体涉及眼用药物技术领域，具体涉及一种长眼表停留和高角膜渗透载药纳米胶束制备方法。背景技术[0002]生物利用度低是临床上眼表用药普遍存在的关键问题。眼球是相对独立组织，有着明显区别于其它部位结构和微环境特性，和较特殊的药物传递和代谢途径，因而给眼部用药带来区别与其他部位的独特挑战：1）存在血眼屏障，难以用全身给药达到治疗浓度；2）眼球免疫豁免特性，创伤性局部给药容易产生眼内感染；3）存在眼表结构屏障（相对封闭的多层膜结构）和生理屏障（如眨眼等生理性活动），非创伤性眼表给药方式生物利用度低。眼部疾病如干眼、葡萄膜炎、眼内肿瘤、青光眼、糖尿病视网膜病变、老年性黄斑病变等，往往需要长期、多次反复给药，造成眼部用药患者依存性差，给患者工作和生活带来较大的困扰。因此，设计基于眼部结构和生理特性的药物递送策略，提高药物的生物利用度和靶向性，在眼表和眼内疾病的治疗中显