SAA检测试剂盒及SAA定量检测的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111289759A(43)申请公布日2020.06.16(21)申请号202010162233.7(22)申请日2020.03.10(71)申请人苏州翊讯生物科技有限公司地址215121江苏省苏州市苏州工业园区唯亭双马街2号星华产业园11号楼(72)发明人蒋金鹏(74)专利代理机构无锡市汇诚永信专利代理事务所(普通合伙)32260代理人许云峰(51)Int.Cl.G01N33/68(2006.01)G01N33/543(2006.01)G01N21/76(2006.01)权利要求书2页说明书5页附图2页(54)发明名称SAA检测试剂盒及SAA定量检测的方法(57)摘要本发明公开了一种SAA检测试剂盒及SAA定量检测的方法。在SAA检测试剂盒试剂盒内部设置多根单人份的试剂条，本实施的试剂条设置有样本孔、标记抗体试剂孔、抗体试剂孔、清洗液孔、抗体试剂孔、磁微粒试剂孔、发光检测孔、样本稀释液孔、底物液孔和预留空孔。SAA检测试剂盒还包括分别预存于相应的孔位中的标记抗体试剂、包被抗体试剂、磁微粒试剂和发光底物，标记抗体试剂为标记酶与SAA抗体的结合物，包被抗体试剂为FITC包被的SAA抗体的结合物，磁微粒试剂为包被有抗FITC抗体的磁微粒的复合物。本发明的试剂盒与市场上的SAA磁微粒化学发光法测定试剂盒相比，灵敏度更高，且有效避免了人血清中的生物素干扰。CN111289759ACN111289759A权利要求书1/2页1.一种SAA检测试剂盒，其特征在于，包括至少一根试剂条，每根所述试剂条上设置有至少一个孔位，所述SAA检测试剂盒还包括分别预存于不同的孔位中的标记抗体试剂、包被抗体试剂、磁微粒试剂和发光底物，所述标记抗体试剂包含标记酶与SAA抗体的结合物，所述包被抗体试剂包含包被有FITC的SAA抗体，所述磁微粒试剂包含包被有抗FITC抗体的磁微粒。2.根据权利要求1所述的SAA检测试剂盒，其特征在于，所述标记抗体试剂由所述标记酶与所述SAA抗体结合后溶解于试剂缓冲液中制备得到，所述标记酶与所述SAA抗体的质量比为1:0.5-5。3.根据权利要求1所述的SAA检测试剂盒，其特征在于，所述包被抗体试剂是通过将SAA抗体与FITC的溶液混匀，制备得到FITC-抗体的结合物溶液，再将其溶解于试剂缓冲液中制备得到。4.根据权利要求3所述的SAA检测试剂盒，其特征在于，制备所述FITC-抗体的结合物溶液的所述SAA抗体与FITC溶液的质量比为1:1.3-1:1.8，所述包被抗体试剂中的FITC-抗体的结合物的质量浓度为0.1-10μg/ml。5.根据权利要求2-4中任一项所述的SAA检测试剂盒，其特征在于，所述试剂缓冲液为Tris-HCl缓冲液，所述试剂缓冲液中还包含BSA和Proclin300。6.根据权利要求1所述的SAA检测试剂盒，其特征在于，所述磁微粒的粒径为0.5μm-20μm，所述磁微粒的表面经羧基、氨基或巯基中的至少一种基团修饰。7.根据权利要求6所述的SAA检测试剂盒，其特征在于，所述磁微粒与所述抗FITC抗体按质量比1:0.01-0.1制备得到磁微粒试剂半成品，所述磁微粒试剂是通过将所述磁微粒试剂半成品分散于磁珠缓冲液中制备得到，所述磁珠缓冲液为Tris-HCl缓冲液，所述磁珠缓冲液中还包含Casein、和Proclin300。8.根据权利要求1所述的SAA检测试剂盒，其特征在于，所述SAA检测试剂盒还包括单独存放于一个孔位中的样本稀释液，所述样本稀释液中包含有牛血清白蛋白、酪蛋白和蔗糖，所述样本稀释液为PBS或Tris-HCl缓冲液。9.根据权利要求1所述的SAA检测试剂盒，其特征在于，所述SAA检测试剂盒还包括单独存放于一个孔位中的清洗液。10.一种SAA定量检测的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)制备标记抗体试剂将标记酶与SAA抗体按质量比为1:0.5-5结合后溶解于试剂缓冲液中，即制备得到标记抗体试剂，所述试剂缓冲液为Tris-HCl缓冲液。(2)制备包被抗体试剂将SAA抗体与FITC溶液按质量比为1:1.3-1:1.8混匀后，制备得到FITC-抗体的结合物溶液，再将其溶解于试剂缓冲液中，即制备得到包被抗体试剂。(3)制备磁微粒试剂将磁微粒与抗FITC抗体按质量比1:0.01-0.1混合，制备得到磁微粒试剂半成品，再将所述磁微粒试剂半成品分散于磁珠缓冲液中，即制备得到磁微粒试剂，所述磁珠缓冲液为Tris-HCl缓冲液，所述磁珠缓冲液中还包含Casein和Proclin300。2CN111289759A权利要求书2/2页(4)标准曲线的绘制：将SAA标准品采用胎牛血清缓冲液分别配制为不同浓度的SAA标准溶液，将步骤(1)制备得到的标记抗体