一种脱细胞角膜及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111686302A(43)申请公布日2020.09.22(21)申请号201910183376.3(22)申请日2019.03.11(71)申请人广东博与再生医学有限公司地址523808广东省东莞市松山湖高新技术产业开发区台湾高科技园桃园路1号莞台生物技术合作中心1栋1楼05室(72)发明人田智泉樊杏利张立娟任珂星王二浩张勇杰(51)Int.Cl.A61L27/36(2006.01)A61L27/50(2006.01)权利要求书1页说明书6页附图2页(54)发明名称一种脱细胞角膜及其制备方法(57)摘要本发明公开了一种脱细胞角膜的制备方法，包括：一、对摘取的动物眼球进行清洗和消毒处理；二、剪取角膜，用生理盐水清洗干净；三、将角膜置于去离子水中，震荡破碎角膜中的细胞；四、将角膜置于高渗溶液中震荡处理，然后置于低渗溶液中震荡处理；五、角膜重复处理2~4次；六、脱水处理；七、削切，灭菌后保存。采用本发明的方法制备脱细胞角膜，能耗小，周期短，能在短时间内彻底脱除细胞的同时保护角膜的胶原的组成、机械完整性和生物活性，同时没有任何有毒有害的试剂残留，使角膜能更好的发挥其功能以及移植的有效性，制备的脱细胞角膜透明度好，免疫原性低，能够直接用于角膜移植。CN111686302ACN111686302A权利要求书1/1页1.一种脱细胞角膜的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、对摘取的动物眼球进行清洗和消毒处理；步骤二、从步骤一中经清洗和消毒处理后的动物眼球上剪取角膜，角膜上保留有2mm~4mm宽的巩膜，然后将剪取的角膜用生理盐水清洗干净；步骤三、将步骤二中清洗干净的角膜置于去离子水中，于摇床中震荡破碎角膜中的细胞；步骤四、将步骤三中震荡后的角膜置于高渗溶液中，于摇床中震荡处理3h~6h，然后置于低渗溶液中，于摇床中震荡处理3h~6h；所述高渗溶液为浓度为1M~3M的氯化钠溶液，所述低渗溶液为去离子水；步骤五、按照步骤四的方法对角膜重复处理2~4次；步骤六、将滤纸放置于干燥的氯化钠上，然后将微孔滤膜放置于滤纸上，形成脱水元件，将步骤五中重复处理后的角膜置于两个所述脱水元件之间进行脱水处理，所述角膜的上下表面均与微孔滤膜接触；所述微孔滤膜的层数为1~4层，滤纸的层数为3~10层；步骤七、对步骤六中脱水处理后的角膜进行削切，然后将削切后的角膜灭菌后保存。2.根据权利要求1所述的一种脱细胞角膜的制备方法，其特征在于，步骤一中所述消毒处理采用次氯酸钠溶液浸泡消毒，处理时间为30min~60min。3.根据权利要求2所述的一种脱细胞角膜的制备方法，其特征在于，所述次氯酸钠溶液的质量浓度为0.09%~0.2%。4.根据权利要求3所述的一种脱细胞角膜的制备方法，其特征在于，步骤一中所述清洗和消毒处理的具体过程为：将摘取的动物眼球用生理盐水清洗，然后用次氯酸钠溶液浸泡消毒，最后用生理盐水清洗去除次氯酸钠。5.根据权利要求1所述的一种脱细胞角膜的制备方法，其特征在于，步骤三中所述震荡的时间为5h~10h，摇床的转速为100rpm~200rpm，所用去离子水的温度为18℃~30℃。6.根据权利要求1所述的一种脱细胞角膜的制备方法，其特征在于，步骤四中所述高渗溶液的温度为18℃~30℃，低渗溶液的温度为18℃~30℃，摇床的转速均为100rpm~200rpm；步骤四中在低渗溶液中震荡处理的过程中，每隔0.5h~1h换液一次。7.根据权利要求1所述的一种脱细胞角膜的制备方法，其特征在于，步骤六中脱水处理的时间为0.5h~3h。8.根据权利要求1所述的一种脱细胞角膜的制备方法，其特征在于，步骤七中削切后的角膜厚度为0.15mm~0.55mm。9.根据权利要求1所述的一种脱细胞角膜的制备方法，其特征在于，步骤七中采用钴-60γ射线进行辐照灭菌，辐照剂量为5kGy~10kGy。10.一种利用如权利要求1至9中任一权利要求所述的方法制备得到的脱细胞角膜。2CN111686302A说明书1/6页一种脱细胞角膜及其制备方法技术领域[0001]本发明属于医疗器械技术领域，具体涉及一种脱细胞角膜及其制备方法。背景技术[0002]角膜(Cornea)是眼睛最前面的透明部分，覆盖虹膜、瞳孔及前房，因复杂交错的胶原结构，使其能够保持良好的透明度和屈光度，同时丰富密集的神经分布，也使人们能够更好的感知周围的世界。然而角膜的病变会对其透明度等产生一定的影响，据统计，全球因角膜疾病致盲的眼病位列第二盲眼病，而且还在不断增加。面对庞大的患者群体，尤其是亚洲国家，捐献角膜的人数相对较少，所以仅靠角膜捐献来进行移植的希望非常小。[0003]在寻找角膜移植替代品的过程中，由于某些动物角膜的结构、理化特性和光学特性非常相