一种固体微球及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112266487A(43)申请公布日2021.01.26(21)申请号202011141932.X(22)申请日2020.10.22(71)申请人苏州新丝原生物科技有限公司地址215000江苏省苏州市自由贸易试验区苏州片区苏州工业园区新平街388号23幢2层01单元(72)发明人孙振华黄珂丁升祥左丽娜(74)专利代理机构北京林达刘知识产权代理事务所(普通合伙)11277代理人刘新宇李茂家(51)Int.Cl.C08J3/12(2006.01)C08L5/08(2006.01)C08L89/00(2006.01)C12N5/00(2006.01)权利要求书1页说明书11页附图10页(54)发明名称一种固体微球及其制备方法和应用(57)摘要本发明属于生物医用材料技术领域，涉及一种固体微球及其制备方法和应用。固体微球的制备方法，包括如下步骤：将壳聚糖与任选存在的明胶类物质溶解于酸溶液中，得到微球前体溶液，所述微球前体溶液经喷雾冷冻处理，一次冻干后得到微球前体；将所述微球前体在洗涤剂中洗涤，过滤，所得截留物即为固体微球。本发明的制备方法在未引入交联剂的情况下，以壳聚糖为骨架得到了固体微球，具有高的结构稳定性，其表面粘附细胞，可作为细胞培养的微载体。由于未使用交联剂，固体微球具有高的生物相容性并能实现快速降解，适合细胞的体内及体外培养，负载细胞的微球在膝关节病症、肌腱损伤等领域有极大的应用前景。CN112266487ACN112266487A权利要求书1/1页1.一种固体微球的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将壳聚糖与任选存在的明胶类物质溶解于酸溶液中，得到微球前体溶液，所述微球前体溶液经喷雾冷冻处理，一次冻干后得到微球前体；将所述微球前体在洗涤剂中洗涤，过滤，所得截留物即为固体微球。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述微球前体溶液中，所述壳聚糖的质量浓度为0.5～4wt％，粘度为30～300mPa.s，脱乙酰度为70～99％。3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述明胶类物质选自明胶和明胶衍生物；可选地，所述明胶衍生物选自琥珀酰明胶和聚明胶肽中。4.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法，其特征在于，所述微球前体溶液中，所述明胶类物质的质量浓度为0.5～5wt％。5.根据权利要求1-4任一项所述的制备方法，其特征在于，所述酸选自乙酸、氯化氢、甲酸、乳酸、苹果酸和抗坏血酸；可选地，所述酸溶液中，酸与溶剂的质量比为0.3:99.7～4:96；可选地，所述酸溶液为所述酸的水溶液。6.根据权利要求1-5任一项所述的制备方法，其特征在于，所述洗涤剂为溶剂或基于所述溶剂的碱溶液；可选地，所述碱选自氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸氢钠、碳酸钠、氢氧化钙和氨；所述溶剂选自甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、丙酮、乙腈和水。7.根据权利要求1-6任一项所述的制备方法，其特征在于，所述喷雾冷冻处理的温度为-20℃～-196℃。8.根据权利要求1-7任一项所述的制备方法，其特征在于，还包括如下步骤：在保护剂存在下，对所述截留物进行二次冻干处理，得到所述固体微球。9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述二次冻干处理的温度为-20℃～-196℃。10.根据权利要求8或9所述的制备方法，其特征在于，所述保护剂为赋形剂溶液或水；可选地，所述赋形剂选自乳糖、葡聚糖、明胶、甘露醇、海藻糖、蔗糖、麦芽糖、甘油、聚乙二醇、乙二醇、葡萄糖、山梨醇、肌醇、牛血清蛋白、谷氨酸钠、赖氨酸和明胶。11.一种固体微球，其特征在于，所述固体微球通过根据权利要求1-10任一项所述的方法制备得到。12.根据权利要求11所述的固体微球，其特征在于，所述固体微球的粒径为50～500μm；可选地，所述固体微球具有联通外表孔隙，所述孔隙的孔径为1-30μm。13.根据权利要求11或12所述的固体微球作为生物医用材料的应用。14.根据权利要求13所述应用，其特征在于，所述生物医用材料为细胞培养的微载体；可选地，所述细胞选自293细胞、HEK293细胞、HEK-293T细胞、293T细胞、293TN细胞、293FT细胞、AAV-293细胞、HUVEC细胞、ECV-304细胞、L929细胞、WB-F344细胞、L-02细胞、THP-1细胞、D407细胞、Vero细胞、CHO细胞、间充质干细胞、胚胎干细胞、脂肪干细胞或IPS细胞。2CN112266487A说明书1/11页一种固体微球及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明属于生物医用材料技术领域，涉及一种固体微球的制备方法，通过该制备方法制得的微球，以及利用该微球作为细胞培养微载体的应用。背景技术[0002]目前，微载体作为细胞培养载体、药物递送载体