一种靶向核壳结构载药纳米颗粒及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112370435A(43)申请公布日2021.02.19(21)申请号202011300962.0A61K31/704(2006.01)(22)申请日2020.11.19A61K31/7088(2006.01)A61P35/00(2006.01)(71)申请人临沂大学地址276005山东省临沂市兰山区双岭路中段(72)发明人李琼王奕霖熊雪帆杜海蓉张书圣(74)专利代理机构北京高沃律师事务所11569代理人刘潇(51)Int.Cl.A61K9/51(2006.01)A61K47/42(2017.01)A61K47/26(2006.01)A61K47/02(2006.01)A61K47/34(2017.01)权利要求书2页说明书11页附图7页(54)发明名称一种靶向核壳结构载药纳米颗粒及其制备方法(57)摘要本发明涉及纳米生物医药技术领域，提供了一种靶向核壳结构载药纳米颗粒及其制备方法。本发明提供的靶向核壳结构载药纳米颗粒包括载药内核和包覆在所述载药内核表面的载药壳层，所述载药内核包括发光载药核心、修饰在所述发光载药核心表面的细胞穿膜肽以及吸附在所述细胞穿膜肽表面的基因药物，载药壳层包括磷酸钙层、掺杂在磷酸钙层中的化疗药物和修饰在磷酸钙层表面的核酸适配体。本发明提供的靶向核壳结构载药纳米颗粒能够靶向肿瘤组织，有效提高纳米药物在肿瘤组织的富集与滞留，并能够利用在肿瘤组织弱酸性微环境中的响应性可控释放化疗药物和基因药物，且细胞毒性小，安全性高。本发明提供的制备方法反应温和、操作简单，重复性好。CN112370435ACN112370435A权利要求书1/2页1.一种靶向核壳结构载药纳米颗粒，其特征在于，包括载药内核和包覆在载药内核表面的载药壳层；所述载药内核包括发光载药核心、修饰在所述发光载药核心表面的细胞穿膜肽以及吸附在所述细胞穿膜肽表面的基因药物；所述发光载药核心的组成成分包括化疗药物、发光共轭聚合物和聚苯乙烯-马来酸酐共聚物；所述细胞穿膜肽为阳离子型细胞穿膜肽；所述载药壳层包括磷酸钙层、掺杂在磷酸钙层中的化疗药物和修饰在磷酸钙层表面的核酸适配体。2.根据权利要求1所述的靶向核壳结构载药纳米颗粒，其特征在于，所述发光载药核心中，化疗药物、发光共轭聚合物和聚苯乙烯-马来酸酐共聚物的质量比为(10～40):(25～50):(5～20)。3.根据权利要求1所述的靶向核壳结构载药纳米颗粒，其特征在于，所述发光载药核心的粒径为10～100nm；所述载药内核的粒径为30～200nm；所述靶向核壳结构载药纳米颗粒的粒径为40～300nm。4.根据权利要求1所述的靶向核壳结构载药纳米颗粒，其特征在于，所述化疗药物包括阿霉素、紫杉醇和喜树碱中的一种或几种；所述基因药物包括siRNA、ASO和miRNA中的一种或几种；所述发光共轭聚合物为聚(5-(2-乙基己氧基)-2-甲氧基-氰基对苯二亚甲基)。5.权利要求1～4任意一项所述靶向核壳结构载药纳米颗粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将化疗药物、发光共轭聚合物和聚苯乙烯-马来酸酐共聚物溶解于有机溶剂中，在超声作用下，将所得混合溶液和水混合，之后将有机溶剂蒸除并将剩余溶液过滤，得到发光载药核心纳米颗粒溶液；(2)将细胞穿膜肽、发光载药核心纳米颗粒溶液和缓冲溶液混合，得到细胞穿膜肽修饰的发光载药核心纳米颗粒溶液；(3)将基因药物和所述细胞穿膜肽修饰的发光载药核心纳米颗粒溶液混合，得到载药内核纳米颗粒溶液；(4)将氯化钙、核酸适配体、化疗药物和载药内核纳米颗粒溶液混合，得到靶向核壳结构载药纳米颗粒原液；(5)将所述载药纳米颗粒原液进行透析处理，得到所述靶向核壳结构载药纳米颗粒。6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中的有机溶剂包括四氢呋喃、二甲基亚砜和丙酮中的一种或几种；所述混合溶液中化疗药物的浓度为10～40μg/mL，发光共轭聚合物的浓度为25～50μg/mL，聚苯乙烯-马来酸酐共聚物的浓度为5～20μg/mL；所述步骤(1)中将有机溶剂蒸除的方式为加热蒸除，所述加热蒸除的温度为50～200℃，所述加热蒸除在惰性气氛保护下进行。7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中混合的过程具体为：将细胞穿膜肽溶解于缓冲溶液中，得到细胞穿膜肽溶液，将发光载药核心纳米颗粒溶液和缓冲溶液混合，得到发光载药核心纳米颗粒分散液，然后将所述细胞穿膜肽溶液和所述发光载药核心纳米颗粒分散液混合后避光搅拌；所述细胞穿膜肽溶液中细胞穿膜肽的浓度为5～20mg/mL；所述发光载药核心纳米颗粒分散液中发光载药核心纳米颗粒的浓度为0.01～2CN112370435A权利要求书2/2页0.1mg/mL；所述细胞