去氢表雄酮粗品的纯化方法及去氢表雄酮的定量检测方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112480198A(43)申请公布日2021.03.12(21)申请号202011264200.XG01N30/36(2006.01)(22)申请日2020.11.12G01N30/60(2006.01)G01N30/74(2006.01)(71)申请人湖南新合新生物医药有限公司地址415400湖南省常德市津市市嘉山工业新区(72)发明人张跃曾春玲靳志忠刘喜荣王诗盛杨梅辉(74)专利代理机构广州华进联合专利商标代理有限公司44224代理人戴志攀(51)Int.Cl.C07J1/00(2006.01)G01N30/02(2006.01)G01N30/06(2006.01)G01N30/34(2006.01)权利要求书1页说明书7页附图2页(54)发明名称去氢表雄酮粗品的纯化方法及去氢表雄酮的定量检测方法(57)摘要本发明涉及一种去氢表雄酮粗品的纯化方法及去氢表雄酮的定量检测方法；在该纯化方法中，将去氢表雄酮粗品与有机溶剂混合，制得样品溶液，然后采用液相色谱法对样品溶液进行分离，得到纯化的去氢表雄酮；其中，液相色谱法采用的色谱柱为烷基柱，所采用的流动相为体积比为(20～60):(40～80)的磷酸铵盐水溶液和乙腈。去氢表雄酮粗品中的杂质与去氢表雄酮在特定的流动相环境中，去氢表雄酮和包括其异构体在内的杂质与流动相的极性相差较大，因此其各自在色谱柱中的保留时长差异较大，能使去氢表雄酮和包括其异构体在内的杂质达到分离，从而提高去氢表雄酮的纯度。CN112480198ACN112480198A权利要求书1/1页1.一种去氢表雄酮粗品的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：将去氢表雄酮粗品与有机溶剂混合，制得样品溶液；采用液相色谱法对样品溶液进行分离，得到纯化的去氢表雄酮；其中，所述液相色谱法采用的色谱柱为烷基柱，所采用的流动相为体积比为(20～60):(40～80)的磷酸铵盐水溶液和乙腈。2.如权利要求1所述的去氢表雄酮粗品的纯化方法，其特征在于，所述流动相由体积含量20％～60％的磷酸铵盐水溶液和体积含量40％～80％乙腈组成。3.如权利要求1所述的去氢表雄酮粗品的纯化方法，其特征在于，所述液相色谱法采用的洗脱程序如下：在0～10min，所述流动相中磷酸铵盐水溶液的体积含量为60％，乙腈的体积含量为40％；在10～35min，所述流动相中磷酸铵盐水溶液的体积含量从60％降至20％，乙腈的体积含量从40％提高至80％；在35～43min，所述流动相中磷酸铵盐水溶液的体积含量为20％，乙腈的体积含量为80％；在43～44min，所述流动相中磷酸铵盐水溶液的体积含量从20％提高至60％，乙腈的体积含量从80％降至40％；在44～50min，所述流动相中磷酸铵盐水溶液的体积含量为60％，乙腈的体积含量为40％。4.如权利要求1所述的去氢表雄酮粗品的纯化方法，其特征在于，所述去氢表雄酮粗品为采用雄烯二酮经酯化、缩酮、还原和水解制得的。5.如权利要求1所述的去氢表雄酮粗品的纯化方法，其特征在于，所述磷酸铵盐水溶液的pH值为2.5～3.5，所述磷酸铵盐水溶液中的磷酸铵盐选自磷酸一铵、磷酸二铵和磷酸三铵中的至少一种。6.如权利要求1所述的去氢表雄酮粗品的纯化方法，其特征在于，所述色谱柱的柱温为20℃～35℃。7.如权利要求1～5任一项所述的去氢表雄酮粗品的纯化方法，其特征在于，所述流动相的流速为1mL/min～1.2mL/min。8.如权利要求1～5任一项所述的去氢表雄酮粗品的纯化方法，其特征在于，所述有机溶剂为乙腈。9.一种去氢表雄酮的定量检测方法，其特征在于，包括如下步骤：采用如权利要求1～8任一项所述的去氢表雄酮粗品的纯化方法将去氢表雄酮和杂质分离；紫外检测以测定含量。10.如权利要求9所述的去氢表雄酮的定量检测方法，其特征在于，所述紫外检测的检测波长为190nm～220nm。2CN112480198A说明书1/7页去氢表雄酮粗品的纯化方法及去氢表雄酮的定量检测方法技术领域[0001]本发明涉及药物合成制备技术领域，特别涉及一种去氢表雄酮粗品的纯化方法及去氢表雄酮的定量检测方法。背景技术[0002]去氢表雄酮，英文名称：Dehydroepiandrosterone，化学名：3β‑羟基‑5‑雄烯‑17‑酮，分子式为C19H28O2。去氢表雄酮是用于制造甾体药物的重要中间体和原料，同时具有延缓衰老、保持青春活力、增强体能，改善情绪和睡眠、提高记忆力、调节免疫系统功能以及提高肌体免疫力等功效。在制备药物时，对去氢表雄酮的纯度及纯度的准确度要求很高。去氢表雄酮的主要制备方法为利用植物甾醇发酵产物雄烯二酮(4‑AD)为原料再经过酯化、缩酮、还原、水解来合成去氢表雄酮，该制备方法产