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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113391015A(43)申请公布日2021.09.14(21)申请号202110656658.8(51)Int.Cl.(22)申请日2021.06.11G01N30/88(2006.01)(71)申请人河北省地质实验测试中心(国土资源部保定矿产资源监督检测中心、河北省金银宝玉饰品质量监督检验站)地址071000河北省保定市向阳北大街900号地质实验测试中心(72)发明人秦冲安彩秀王立平崔建军刘安刘淑红李然赫彦涛陈阳冉卓(74)专利代理机构广东有知猫知识产权代理有限公司44681代理人崔新芬权利要求书3页说明书9页附图1页(54)发明名称一种土壤中14种酚类化合物的检测方法(57)摘要本发明公开了一种土壤中14种酚类化合物的检测方法,包括以下方法:将土壤样品用二氯甲烷与正己烷混和溶剂进行微波萃取;萃取后的萃取液经酸碱分配净化,酚类化合物进入水相后,将水相调节至酸性,用二氯甲烷与乙酸乙酯混合溶剂萃取水相;萃取液转移至氮吹管中浓缩;萃取液经五氟苄基溴衍生化后摇匀待测;用气相色谱‑质谱联用法(GC‑MS)分离检测,S3、以色谱保留时间和质谱特征离子定性,内标法定量。本发明有以下优点:微波萃取具有萃取速度快、溶剂用量少、选择性高等优点;衍生化后可有效提高检测的稳定性,改善色谱峰形,提高灵敏度;气相色谱/质谱联用法提高了酚类的定性定量能力,很好的解决的HJ703‑2014中存在的一些问题。CN113391015ACN113391015A权利要求书1/3页1.一种土壤中14种酚类化合物的检测方法,其特征在于,包括以下方法:S1、试样提取:将土壤样品用二氯甲烷与正己烷混和溶剂进行微波萃取;萃取后的萃取液经酸碱分配净化,酚类化合物进入水相后,将水相调节至酸性,用二氯甲烷与乙酸乙酯混合溶剂萃取水相;萃取液转移至氮吹管中浓缩;萃取液经五氟苄基溴衍生化后摇匀待测;S2、分析样品:用气相色谱‑质谱联用法分离检测,S3、结果计算与表示:以色谱保留时间和质谱特征离子定性,内标法定量。2.根据权利要求1所述的一种土壤中14种酚类化合物的检测方法,其特征在于:所述步骤S1还包括试样采集与保存:样品采集后密闭储存于棕色玻璃瓶中,应尽快分析;若不能及时分析,应冷藏避光保存,保存期为10d;注意避免有机物干扰;萃取液在4℃下避光保存,于20d内完成分析;样品准备:去除样品中的异物,准确称取10g鲜样,倒入玛瑙研钵,加入适量无水硫酸钠研磨成流沙状,倒入微波萃取罐。3.根据权利要求1所述的一种土壤中14种酚类化合物的检测方法,其特征在于:所述步骤S1中,(1)微波萃取具体方法如下:在萃取罐中分别加入20mL二氯甲烷和10mL正己烷;将萃取罐按顺序放入微波转子中,上机进行微波萃取,微波萃取条件为:1800W,5min升温至75℃,保持20min,样品降至40℃下再开启萃取罐;将萃取液全部转移至500mL分液漏斗中,用5mL二氯甲烷清洗萃取罐两次,清洗液全部转移至分液漏斗,待净化;(2)净化具体方法如下:在分液漏斗中加入100mL含2%Na2SO4水溶液,并加入1mL5mol/LNaOH溶液,调节至pH>12,摇匀放气后,置于振荡器上振荡10min;静置10min后,弃去下层有机相,保留水相部分;将得到的水相部分加入3mL3mol/LHCl溶液,调节pH<2,加入40mL二氯甲烷与10mL乙酸乙酯混合溶剂,摇匀放气后,置于振荡器上振荡10min;静置10min后,将下层有机相转移至锥形瓶中,加入适量无水硫酸钠干燥;(3)浓缩具体方法如下:萃取液转移至氮吹管中;采用自动氮吹仪浓缩萃取液并更换溶剂;氮吹浓缩仪设置温度30℃,压力设为1,小流量氮气将提取液浓缩至约0.5mL,加入5mL丙酮溶剂洗涤浓缩器管壁,振摇氮吹管使溶液充分混匀,氮气浓缩至约0.5mL,用丙酮定容至1.0mL,后转移至棕色小瓶中,待衍生;(4)衍生化反应具体方法如下:在上述浓缩液的棕色小瓶中依次加入5μL五氟苄基溴和0.01g碳酸钾;拧紧瓶盖,轻轻振摇、混匀;置于60℃烘箱中衍生60min后,冷却至室温;准确加入内标,摇匀待测;(5)还包括空白试样的制备称取10.0g石英砂,按照试样制备相同的操作步骤,制备空白试样。4.根据权利要求1所述的一种土壤中14种酚类化合物的检测方法,其特征在于:所述步骤S2中,2CN113391015A权利要求书2/3页(1)仪器条件a气相色谱条件进样量:1.0μL;进样口温度:270℃,不分流进样;柱流量:1.0mL/min(恒流);柱箱温度:50℃,以8℃/min升温至250℃并保持10min,传输线温度:280℃;b质谱参考条件四极杆温度:150℃;离子源温度:230℃;扫描模式:选择离子扫描(