固相微萃取头及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113588822A(43)申请公布日2021.11.02(21)申请号202110864133.3(22)申请日2021.07.29(71)申请人潍坊海关综合技术服务中心地址261041山东省潍坊市奎文区四平路39号(72)发明人宫小明(74)专利代理机构青岛清泰联信知识产权代理有限公司37256代理人张洁(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/06(2006.01)G01N30/86(2006.01)权利要求书2页说明书7页附图4页(54)发明名称固相微萃取头及其制备方法和应用(57)摘要本发明提出了一种固相微萃取头、其制备方法及应用，属于检测技术领域。本发明提出了一种新的固相微萃取的理念，并且基于该理念研制出了牙签固相微萃取头，其是对动物源性食品中硝基呋喃类代谢物残留量检测过程中前处理技术的改进和优化，具有无需溶剂、萃取速度快、重现性好、样品消耗量小、操作简便、可进行现场分析等特点。本发明提出的固相微萃取头对硝基呋喃类代谢物具有高效的吸附和解吸能力，以及杂质的优异去除能力，可有效提高硝基呋喃类代谢物的定量限，且效果明显优于国标的检测结果。CN113588822ACN113588822A权利要求书1/2页1.固相微萃取头的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将聚丙烯腈PAN粉末溶解于二甲基甲酰胺中，室温下搅拌溶解，得到饱和溶液；将HLB颗粒研磨至预定粒径后，加入PAN溶液中混合均匀，得到PAN‑HLB浆料；将所得浆料以1800‑2000转/分钟的转速充分震荡，使颗粒混合物均匀分布后，将其均匀涂布于牙签头上；将涂布有PAN‑HLB浆料的牙签于溶剂溶液中以1500‑1800转/分钟的转速充分震荡清洗，以去除残留；将牙签固相微萃取头浸泡于体积比为1：1的甲醇/水混合物中进行预处理，激活牙签上的HLB，干燥，得到固相微萃取头。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述HLB颗粒的粒径为25‑30μm。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述PAN‑HLB浆料中HLB颗粒的含量为0.025g‑0.075g。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述溶剂溶液为甲醇、异丙醇和乙腈的混合溶液，其体积比为50:25:25。5.根据权利要求1‑4任一项所述的制备方法制备得到的固相微萃取头。6.根据权利要求5所述的固相微萃取头在快速检测动物源性食品中硝基呋喃类代谢物残留量中的应用。7.利用权利要求5所述的固相微萃取头快速检测动物源性食品中硝基呋喃类代谢物残留量的方法，其特征在于，包括以下步骤：将制备好的固相微萃取头放入调节好pH的含动物源性食品的硝基呋喃代谢物衍生液中，置于36‑37℃的恒温振荡器中以1500‑1800转/分钟的转速震荡萃取30‑40min；取出固相微萃取头放入装有水的离心管中，置于36‑37℃恒温振荡器中以1500‑1800转/分钟的转速震荡清洗；清洗完毕后，取出固相微萃取头放入装有乙酸乙酯的离心管中，并置于36‑37℃恒温振荡器中以1500‑1800转/分钟的转速震荡解吸30‑40min；随后于45‑50℃下用氮气吹干，用流动相定容至0.5mL，通过0.2μm滤膜过滤至样品瓶中，采用液相色谱质谱测定硝基呋喃类代谢物残留量。8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，液相色谱质谱测定的色谱测定条件为：色谱柱：ZORBAXEclipsePlusC18(1.8μm，2.1ⅹ50mm)；柱温：40℃，流速：0.3ml/min，进样量：10μL；流动相：A：10mM乙酸铵+0.1％甲酸水，B：甲醇，梯度洗脱程序：0→3.0min，由10％B→90％B；3.0→5.0min，90％B；5.0→6.5min，由90％B→10％B，平衡1min。9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，液相色谱质谱测定的质谱条件为：电离方式：ESI+；扫描方式：多反应监测(MRM)；电喷雾电压：5500V；雾化气压力(GS1)：55psi；气帘气压力(CUR)：35psi；辅助气压力(GS2)：50psi。10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，含动物源性食品的硝基呋喃代谢物衍生液的制备方法为：将含动物源性食品的均质试样加入50mL聚丙烯离心管中，加入0.1μg/mL的内标工作溶液30μL，然后分别加入17mL0.125mol/L盐酸溶液和1.0mL衍生剂，均质1min，置于36‑37℃恒温振荡器中保持16‑17h；2CN113588822A权利要求书2/2页以10000r/min离心10min，取上清10mL，加入1mL磷酸氢二钾溶液，用1mol/L氢氧化钠溶液和0.1mol/L的盐酸水溶液调节pH至7.0；然后加入5