载药普鲁士蓝@锰纤维蛋白复合凝胶及制备方法、应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113827724A(43)申请公布日2021.12.24(21)申请号202111154514.9A61K47/42(2017.01)(22)申请日2021.09.29A61K47/36(2006.01)A61K47/02(2006.01)(71)申请人郑州大学A61P35/00(2006.01)地址450001河南省郑州市科学大道100号A61P17/02(2006.01)郑州大学B82Y5/00(2011.01)(72)发明人胡玉荣周晨阳马紫君赵腾月B82Y30/00(2011.01)李春明宋成治杨烨菲饶志伟B82Y40/00(2011.01)(74)专利代理机构西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙)61223代理人崔瑞迎(51)Int.Cl.A61K41/00(2020.01)A61K33/32(2006.01)A61K33/26(2006.01)A61K9/06(2006.01)权利要求书2页说明书10页附图2页(54)发明名称载药普鲁士蓝@锰纤维蛋白复合凝胶及制备方法、应用(57)摘要本发明属于生物医药领域，提供了载药普鲁士蓝@锰纤维蛋白复合凝胶及制备方法、应用，对介孔普鲁士蓝纳米粒子进行刻蚀形成中空普鲁士蓝纳米粒子，在中空普鲁士蓝纳米粒子上涂覆上锰离子形成中空普鲁士蓝@锰纳米粒子，对中空普鲁士蓝@锰纳米粒子进行靶向修饰、孔穴负载声敏剂和包覆寡聚透明质酸，最后在凝血酶的刺激下与纤维蛋白原溶液混合形成复合凝胶。本发明将新型声敏剂负载于中空普鲁士蓝纳米粒子的孔穴中，寡聚透明质酸修饰于外表面，既可以起到靶向作用，还可调节肿瘤的免疫抑制性微环境；复合凝胶既可以实现对术后残留肿瘤组织增强的声动力‑免疫协同治疗作用，还可以加速术后创口的修复与愈合。CN113827724ACN113827724A权利要求书1/2页1.载药普鲁士蓝@锰纤维蛋白复合凝胶，其特征在于，对介孔普鲁士蓝纳米粒子进行刻蚀形成中空普鲁士蓝，在所述中空普鲁士蓝纳米粒子的外表面和内部介孔通道上涂覆上锰离子形成中空普鲁士蓝@锰纳米粒子，对所述中空普鲁士蓝@锰纳米粒子进行靶向修饰、孔穴负载声敏剂二氢卟吩和包覆寡聚透明质酸，得到包覆寡聚透明质酸的中空普鲁士蓝@锰纳米粒子，在凝血酶的刺激下与含有所述包覆寡聚透明质酸的中空普鲁士蓝@锰纳米粒子的纤维蛋白原溶液混合形成复合凝胶，所述纳米粒子的粒径为60～300nm。2.权利要求1所述载药普鲁士蓝@锰纤维蛋白复合凝胶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、合成介孔普鲁士蓝纳米粒子：称取聚乙烯吡咯烷酮‑K30和铁氰化钾，溶于HCl溶液中，室温搅拌至黄色澄清溶液；在60～90℃下反应18～24h后离心洗涤、干燥得到介孔普鲁士蓝纳米粒子；步骤2、制备中空普鲁士蓝纳米粒子：取步骤1中合成的介孔普鲁士蓝纳米粒子，聚乙烯吡咯烷酮‑K30依次加入HCl溶液中，室温进行搅拌2～3h转移到反应釜中，在120～160℃下反应2～4h后离心洗涤、干燥得到中空普鲁士蓝纳米粒子；步骤3、制备中空普鲁士蓝@锰纳米粒子：将二价锰盐、柠檬酸钠、聚乙烯吡咯烷酮或PEG加入到中空普鲁士蓝纳米粒子溶液中搅拌2～3h，搅拌加入铁氰化钾后继续搅拌2～3h，室温下老化12～36h，离心洗涤、干燥得到中空普鲁士蓝@锰纳米粒子；步骤4、靶向修饰：取中空普鲁士蓝@锰纳米粒子、氨基化组分置于超纯水中搅拌20～30h，为混合溶液A；取(3‑丙羧基)三苯基溴化膦、(1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐、N‑羟基丁二酰亚胺，加入二甲基亚砜中充分混匀、溶解，室温避光搅拌1～3h，为混合溶液B；将溶液B加入溶液A中，反应20～28h后避光透析22～26h除去游离的聚醚酰亚胺与(3‑丙羧基)三苯基溴化膦，洗涤离心得到靶向修饰的中空普鲁士蓝@锰纳米粒子；步骤5、负载声敏剂：将合成的靶向修饰的中空普鲁士蓝纳米粒子分散于无水乙醇或DMSO中，避光向溶液中加入声敏剂二氢卟吩，室温避光搅拌过夜，离心洗涤得到负载声敏剂的中空普鲁士蓝@锰纳米粒子；步骤6、包覆寡聚透明质酸：取负载声敏剂的中空普鲁士蓝纳米粒子加入至寡聚透明质酸溶液中，室温避光搅拌20～28h，透析10～24h除去游离的寡聚透明质酸，干燥得到包覆寡聚透明质酸的中空普鲁士蓝@锰纳米粒子；步骤7、取冻干纤维蛋白原置于37℃生理盐水溶液中，配置浓度为10mg/mL的纤维蛋白原溶液；取冻干凝血酶置于氯化钙溶液中，配置成终浓度为50U/mL的凝血酶溶液；将包覆寡聚透明质酸的中空普鲁士蓝@锰纳米粒子分散于纤维蛋白原溶液中，混合均匀；然后将凝血酶溶液与之混合，孵育10～15min得到普鲁士蓝@锰纤维蛋白复合凝胶。3.根据权利要求2所述载药普鲁士蓝@锰纤维蛋白复