一种海参活性肽及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113861272A(43)申请公布日2021.12.31(21)申请号202111315874.2C07K1/16(2006.01)(22)申请日2021.11.08C12P21/06(2006.01)(71)申请人时代生物科技（深圳）有限公司地址518000广东省深圳市龙岗区横岗街道大康社区山子下路2号东海科技工业园3号、4号厂房(72)发明人刘会平蒋泽根乐国伟施用晖(74)专利代理机构深圳市精英专利事务所44242代理人曹祥波(51)Int.Cl.C07K7/06(2006.01)C07K1/36(2006.01)C07K1/34(2006.01)C07K1/20(2006.01)权利要求书1页说明书6页附图3页(54)发明名称一种海参活性肽及其制备方法(57)摘要本发明的实施例提供了一种海参活性肽及其制备方法，方法包括：将海参泡发，并进行均质前处理得到原料蛋白；将原料蛋白进行酶解得到海参肽酶解产物；将海参肽酶解产物进行超滤膜过滤，截留所需分子量的截留液；将截留液进行大孔树脂201分离，并进行梯度洗脱，收集洗脱峰，得到洗脱液；测定洗脱液的DPPH，并选择高DPPH的组分；采用RP‑HPLC反相高效液相色谱将高DPPH的组分进行分离、纯化。该海参活性肽在抗疲劳过程中，除了在保证细胞线粒体充足数量和维持线粒体功能，维持组织糖脂能量代谢，保持ATP酶活力，维持运动稳态具有重要作用。同时具有良好的抗氧化活性、降低自由基产生。CN113861272ACN113861272A权利要求书1/1页1.一种海参活性肽，其特征在于，包括以下序列：序列1(G(Hyp)LQADY，甘氨酸‑羟脯氨酸‑亮氨酸‑谷氨酸‑丙氨酸‑天冬氨酸‑酪氨酸)，序列2(FD(Hyp)GA，苯丙氨酸‑天冬氨酸‑羟脯氨酸‑甘氨酸‑丙氨酸)，序列3(LPGSDDF，亮氨酸‑脯氨酸‑甘氨酸‑丝氨酸‑天冬氨酸‑天冬氨酸‑苯丙氨酸)，序列4(APGLTY，丙氨酸‑脯氨酸‑甘氨酸‑亮氨酸‑苏氨酸‑酪氨酸)，序列5(GNFGGLP，甘氨酸‑天冬酰胺‑苯丙氨酸‑甘氨酸‑甘氨酸‑亮氨酸‑脯氨酸)，序列6(APLGF，丙氨酸‑脯氨酸‑亮氨酸‑甘氨酸‑苯丙氨酸)。2.一种制备如权利要求1所述的海参活性肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将海参泡发，并进行均质前处理得到原料蛋白；将原料蛋白进行酶解得到海参肽酶解产物；将海参肽酶解产物进行超滤膜过滤，截留所需分子量的截留液；将截留液进行大孔树脂201分离，并进行梯度洗脱，收集洗脱峰，得到洗脱液；测定洗脱液的DPPH，并选择高DPPH的组分；采用RP‑HPLC反相高效液相色谱将高DPPH的组分进行分离、纯化；将分离、纯化的洗脱液进行减压浓缩、冻干得到海参活性肽。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述将原料蛋白进行酶解得到海参肽酶解产物步骤中，采用复合蛋白酶酶解，所述复合蛋白酶包括：碱性蛋白酶，胰蛋白酶和中性蛋白酶。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述碱性蛋白酶，胰蛋白酶和中性蛋白酶的质量比例为(0.5‑1)：(1‑2)：(1‑2)。5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述碱性蛋白酶的酶活为50,000‑500,000U/g，所述胰蛋白酶的酶活为100,000‑1,000,000U/g，所述中性蛋白酶的酶活为100,000‑650,000U/g。6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述将原料蛋白进行酶解得到海参肽酶解产物步骤中，复合蛋白酶与原料蛋白的用量质量比为0.4‑0.9％，料液质量比为5‑15％。7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述将原料蛋白进行酶解得到海参肽酶解产物步骤中，酶解温度为37‑50℃，酶解时间为3‑7小时。8.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述复合蛋白酶与原料蛋白的用量质量比为0.1‑0.2％，所述复合蛋白酶的酶活为80,000‑250,000U/g，酶解温度为50‑60℃，酶解时间0.5‑1h。9.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述将海参肽酶解产物进行超滤膜过滤，截留所需分子量的截留液步骤中，超滤膜采用孔径为3000道尔顿超滤膜，收集的截留液为分子量大于3000的截留液。10.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述将截留液进行大孔树脂201分离，并进行梯度洗脱，收集洗脱峰，得到洗脱液步骤中，分级梯度洗脱液为浓度为60％、70％，75％，80％，85％，90％乙醇，洗脱峰为280nm。2CN113861272A说明书1/6页一种海参活性肽及其制备方法技术领域[0001]本发明涉及海参活性肽制备技术领域，尤其涉及一种海参活性肽及其制备方法。背景技术[0002