一种猪脱细胞真皮基质支架的制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114377207A(43)申请公布日2022.04.22(21)申请号202210062190.4A61L15/42(2006.01)(22)申请日2022.01.19A61L15/64(2006.01)(71)申请人南方医科大学南方医院地址510515广东省广州市白云区广州大道北1838号(72)发明人杨磊陈良龙马军(74)专利代理机构广州三环专利商标代理有限公司44202代理人刘宇峰(51)Int.Cl.A61L27/36(2006.01)A61L27/50(2006.01)A61L27/56(2006.01)A61L27/58(2006.01)A61L15/40(2006.01)权利要求书1页说明书9页附图9页(54)发明名称一种猪脱细胞真皮基质支架的制备方法和应用(57)摘要本发明涉及医用创面材料修复领域，具体涉及一种猪皮脱细胞真皮基质支架的制备方法和应用。该方法包括：对猪皮用取皮鼓反取皮得到真皮基质层；对真皮基质层分别进行高渗盐脱表皮细胞、碱溶液进行脱真皮细胞、交联、匀浆研磨、醋酸凝胶化、化学交联、冷冻干燥定型。本发明的方法制备简单、脱细胞彻底最大程度地减少免疫原性物质、主要保留了胶原蛋白、弹性蛋白等有益细胞外基质成分，制备成的复合支架孔隙均匀规则、亲水性强、可快速血管化、具有良好的力学性能、良好的生物相容性与组织诱导能力。该材料可应用于内外科全层缺损及慢性创面的修复，作为外层敷料和内植入材料具有广阔的应用前景。CN114377207ACN114377207A权利要求书1/1页1.一种猪脱细胞真皮基质支架的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：A.获取猪真皮基质：将新鲜猪处死，用聚维酮碘浸泡进行初步消毒，剔除猪毛，用生理盐水进行清洗，去除猪皮表皮砂砾杂质，用取皮鼓反向取猪皮，然后依次用洗必泰、生理盐水反复清洗，密封深低温冰箱冷冻备用；B.猪脱细胞真皮基质的制备：全层皮肤在含有过氧化物的高渗盐溶液中慢速搅拌24至72小时，用去离子水反复清洗去除表皮层，然后转移到碱溶液中慢速搅拌24小时，去除所有细胞，获得真皮基质层，然后将所述真皮基质依次在磷酸盐缓冲液、去离子水溶液中超声反复清洗，最终获得瓷白色脱细胞真皮基质；C.猪脱细胞真皮基质胶或者猪脱细胞真皮基质凝胶的制备：将所述脱细胞真皮基质放入研磨机中，加入去离子水，34000rpm/min进行间歇研磨，每次30秒，循环多次，用纱布过滤获得脱细胞真皮基质胶；或者将所述脱细胞真皮基质放入酸溶液中1500rpm/min浸泡搅拌12至48小时，用纱布过滤获得脱细胞真皮基质凝胶；D.猪脱细胞真皮基质支架的制备：将步骤C获得的猪脱细胞真皮基质胶或者猪脱细胞真皮基质凝胶在交联剂溶液中进行交联处理，置于冷冻干燥机中进行冻干，得到所述的猪脱细胞真皮基质支架。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤A中，所述猪是选自：家猪、巴马猪或藏香猪。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤A中，所述取皮鼓的刻度被调整为1mm至3mm，所取的猪皮的真皮层厚度为1mm至2mm。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤B中，所述盐溶液是选自：氯化钠溶液、氯化钾溶液、氯化钙溶液中的一种或两种以上的组合；所述过氧化物选自过氧乙酸和/或过氧化氢；所述碱是选自：氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠和碳酸氢钾中的一种或两种以上的组合。5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤B中，所述盐溶液的浓度选为1至3mol/L，所述盐溶液中过氧化物的体积比浓度为0.1至3％，所述碱溶液的浓度为0.5至1mol/L。6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤C中，所述酸溶液去离子水与脱细胞真皮基质的质量比为1:6至1:8。7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤C中，所述酸溶液是选自：盐酸溶液、甲酸溶液和乙酸溶液中的一种或两种以上的组合；所述酸溶液的体积比浓度为0.5％～3％。8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤D中，所述交联剂溶液是选自：京尼平溶液、碳化二亚胺溶液或戊二醛溶液；所述交联剂溶液中体积比浓度为0.02至0.1％。9.如权利要求1至8之一所述的制备方法得到的猪皮脱细胞真皮基质海绵支架。10.如权利要求9所述的猪皮脱细胞真皮基质海绵支架在制备脱细胞真皮基质海绵敷料中的应用。2CN114377207A说明书1/9页一种猪脱细胞真皮基质支架的制备方法和应用技术领域[0001]本发明属于医用创面材料修复领域，涉及一种基质支架的制备方法，具体涉及一种猪脱细胞真皮基质支架的制备方法，以及该基质支架的应用。[0002]该方法包括：对猪皮用取皮鼓反取皮得