交联重组胶原蛋白凝胶的制备方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115300673A(43)申请公布日2022.11.08(21)申请号202210934221.0C08L89/00(2006.01)(22)申请日2022.08.04(71)申请人圣言私密生命科技(上海)有限公司地址200000上海市浦东新区自由贸易试验区临港新片区环湖西二路888号C楼(72)发明人杜晨波(74)专利代理机构南京金宁专利代理事务所(普通合伙)32479专利代理师王林聪(51)Int.Cl.A61L27/24(2006.01)A61L27/22(2006.01)A61L27/50(2006.01)A61L27/52(2006.01)C08J3/24(2006.01)权利要求书1页说明书2页(54)发明名称交联重组胶原蛋白凝胶的制备方法(57)摘要本发明公开了交联重组胶原蛋白凝胶的制备方法，包括如下步骤：S1：将重组胶原蛋白放入生理盐水中进行溶解，将溶解后的溶液pH值调制碱性；S2：在溶液中加入交联剂，温度在55‑65℃，时间为9‑18h，形成凝胶；S3：将形成的凝胶切块；S4：在切块以后进行酸洗、缓冲溶液清洗；S5：在清洗到一定值以后，加入肽，然后利用搅拌器进行搅拌，搅拌至均匀状态，从而得到重组后凝胶。该发明通过交联从组胶原蛋白反应后，采用酸洗凝胶的方式，一方面能够胶原蛋白自身降解快的问题，另一方面能够很好的降低交联剂的残留。CN115300673ACN115300673A权利要求书1/1页1.交联重组胶原蛋白凝胶的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：S1：将重组胶原蛋白放入生理盐水中进行溶解，将溶解后的溶液pH值调制碱性；S2：在溶液中加入交联剂，温度在55‑65℃，时间为9‑18h，形成凝胶；S3：将形成的凝胶切块；S4：在切块以后进行酸洗、缓冲溶液清洗；S5：在清洗到一定值以后，加入肽，然后利用搅拌器进行搅拌，搅拌至均匀状态，从而得到重组后凝胶。2.如权利要求1所述的交联重组胶原蛋白凝胶的制备方法，其特征在于：所述步骤S1中重组胶原蛋白质量为生理盐水质量的10wt％～20wt％，使用0.5mol/L～1.5mol/L的氢氧化钠溶液调节pH至10±0.1。3.如权利要求1所述的交联重组胶原蛋白凝胶的制备方法，其特征在于：所述步骤S3中凝胶切块的体积为1‑3cm3，最理想为1cm3。4.如权利要求1所述的交联重组胶原蛋白凝胶的制备方法，其特征在于：所述步骤S4中缓冲溶液为磷酸盐缓冲溶液。5.如权利要求1所述的交联重组胶原蛋白凝胶的制备方法，其特征在于：所述步骤S4中的清洗总时长为12‑24h，酸洗时间为2.5h以上，缓冲溶液清洗的时间为8.5h以上。6.如权利要求1所述的交联重组胶原蛋白凝胶的制备方法，其特征在于：所述步骤S5中的肽为蓝铜肽，且蓝铜肽的含量为0.1wt％～0.5wt％。7.一种重组胶原蛋白双相凝胶，其特征在于，采用权利要求1‑7任一项所述的制备方法制备而成。2CN115300673A说明书1/2页交联重组胶原蛋白凝胶的制备方法技术领域[0001]本发明属于交联重组胶原蛋白凝胶技术领域，尤其涉及交联重组胶原蛋白凝胶的制备方法。背景技术[0002]胶原蛋白，是主要结构蛋白在胞外基质中的各种结缔组织在体内，作为结缔组织的主要成分，它是哺乳动物中含量最高的蛋白质，占全身蛋白质含量的25％至35％，胶原蛋白由结合在一起的氨基酸组成，形成三重螺旋状的原纤维，称为胶原螺旋，主要在结缔组织中发现例如软骨、骨头、肌腱、韧带和皮肤。[0003]胶原蛋白是具有很好的相容性和降解性的，在整形外科领域经常用到，经常用于填充和去除皱纹，但是没有经过交联和物理交联的胶原蛋白凝胶强度低，使用效果差，因此提出本申请来解决上述问题。发明内容[0004]针对现有技术存在的问题，本发明提供了交联重组胶原蛋白凝胶的制备方法，解决了现有强度低和使用效果差的问题。[0005]本发明是这样实现的，交联重组胶原蛋白凝胶的制备方法，包括如下步骤：[0006]S1：将重组胶原蛋白放入生理盐水中进行溶解，将溶解后的溶液pH值调制碱性；[0007]S2：在溶液中加入交联剂，温度在55‑65℃，时间为9‑18h，形成凝胶；[0008]S3：将形成的凝胶切块；[0009]S4：在切块以后进行酸洗、缓冲溶液清洗；[0010]S5：在清洗到一定值以后，加入肽，然后利用搅拌器进行搅拌，搅拌至均匀状态，从而得到重组后凝胶。[0011]作为本发明优选的，所述步骤S1中重组胶原蛋白质量为生理盐水质量的10wt％～20wt％，使用0.5mol/L～1.5mol/L的氢氧化钠溶液调节pH至10±0.1。[0012]作为本发明优选的，所述步骤S3中凝胶切块的体积为1‑3cm3，最理想为1cm3。[0013