一种诱导性多能干细胞、制备方法及应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115322959A(43)申请公布日2022.11.11(21)申请号202211000158.XA61P25/00(2006.01)(22)申请日2022.08.19(83)生物保藏信息CCTCCNO：C20212482021.09.08CCTCCNO：C20212492021.09.08(71)申请人首都儿科研究所地址100020北京市朝阳区雅宝路2号(72)发明人陈晓丽梁晨刘芳(74)专利代理机构北京领科知识产权代理事务所(特殊普通合伙)11690专利代理师李春龙张丹(51)Int.Cl.C12N5/074(2010.01)C12Q1/02(2006.01)A61K35/545(2015.01)权利要求书1页说明书11页附图5页(54)发明名称一种诱导性多能干细胞、制备方法及应用(57)摘要本发明公开了一种诱导性多能干细胞、制备方法及应用。该iPSCs包括两个细胞株，分别为保藏编号为CCTCCNO：C2021248的遗传性非孤独症的iPS细胞株16p11.2‑681M(Homosapiens)，和保藏编号为CCTCCNO：C2021249的遗传性孤独症的iPS细胞株16p11.2‑681(Homosapiens)。本发明中的iPSCs保留了患者原本全套基因组结构，能早期、客观地评价患者特有的神经细胞的特点及神经元的形态和功能。该iPSCs的建立解决了患者体外神经细胞获得难且体外原代培养生存时间短的问题，为探索神经发育异常疾病的发病机制、药物筛选等提供了良好的细胞模型。CN115322959ACN115322959A权利要求书1/1页1.一种诱导性多能干细胞，其特征在于：所述的诱导性多能干细胞为遗传性非孤独症的iPS细胞株16p11.2‑681M(Homosapiens)，保藏编号为CCTCCNO：C2021248，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉，武汉大学，保藏日期为2021年9月8日。2.一种诱导性多能干细胞，其特征在于：所述的诱导性多能干细胞为遗传性孤独症的iPS细胞株16p11.2‑681(Homosapiens)，保藏编号为CCTCCNO：C2021249，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉，武汉大学，保藏日期为2021年9月8日。3.权利要求1或权利要求2所述的诱导性多能干细胞的制备方法，其特征在于：所述制备方法包括：供体细胞株的获取；诱导性多能干细胞的构建和鉴定；以及诱导性多能干细胞的培养。4.一种组合物，其特征在于：所述组合物包括：权利要求1所述的诱导性多能干细胞或由其诱导分化获得的细胞；和/或权利要求2所述的诱导性多能干细胞或由其诱导分化获得的细胞。5.根据权利要求4所述的组合物，其特征在于：所述组合物还包括健康人群细胞，所述的健康人群细胞用做鉴定16p11.2微缺失综合征的阴性对照。6.权利要求1或权利要求2所述的诱导性多能干细胞的应用，其特征在于：所述的应用选自：16p11.2微缺失综合征疾病模型构建；16p11.2微缺失综合征致病机理的研究；16p11.2微缺失综合征治疗药物的筛选。7.权利要求1或权利要求2所述的诱导性多能干细胞在制备治疗16p11.2微缺失综合征相关的疾病的药物中的应用。8.权利要求1或权利要求2所述的诱导性多能干细胞在细胞移植、器官再生中的应用。2CN115322959A说明书1/11页一种诱导性多能干细胞、制备方法及应用技术领域[0001]本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种诱导性多能干细胞、制备方法及应用。背景技术[0002]孤独症谱系障碍(AutismSpectrumDisorders，ASD)是一组在儿童早期发病，以交互性的社交交流和社交互动的持续受损害，受限的、重复的行为、兴趣或活动模式为主要临床特征，并限制或损害了日常功能的严重神经发育障碍性疾病。ASD的临床表现个体差异性非常明显，甚至在同一家系中也存在很明显的表型异质性。由于病人来源的体外神经细胞获得有限且体外原代培养生存时间短，目前多采用动物模型重现患者表型并进行致病机理研究，但转基因动物模型很难完整模拟每一种ASD疾病的发生。例如，16p11.2微缺失综合征，一种再发性、致儿童精神发育异常的基因组微失衡，目前多采用16p11.2微缺失动物模型重现患者表型并进行致病机理研究，但动物模型无法复制16p11.2微缺失患者的16p11.2区域内另外一条链的遗传物质或区域外的遗传物质，故很难通过动物模型研究其表型异质性的遗传基础以及致病机理。[0003]自1998年ThomsrrJS等建立了第一株人胚胎干细胞(humanEmbryonicStemCell,hESC)以来，hESC就受到科学家们的青睐，成为了干细胞研究热点。ESC