一种RNA反应型荧光探针及其制备方法和应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115505031A(43)申请公布日2022.12.23(21)申请号202211166134.1(22)申请日2022.09.23(71)申请人苏州大学地址215137江苏省苏州市相城区济学路8号(72)发明人史海斌方晶(74)专利代理机构苏州创元专利商标事务所有限公司32103专利代理师孙周强陶海锋(51)Int.Cl.C07K7/64(2006.01)C07K1/02(2006.01)C09K11/06(2006.01)A61K49/00(2006.01)权利要求书2页说明书11页附图9页(54)发明名称一种RNA反应型荧光探针及其制备方法和应用(57)摘要本发明公开了一种RNA反应型荧光探针及其制备方法和在肿瘤成像和治疗中的应用，探针被ALP酶响应后其荧光增强，685处的光声也随之增强；同时，探针酶响应后在红光照射下可以与细胞质RNA发生反应，延长探针在肿瘤细胞中的滞留时间，实现长窗口期肿瘤成像；更重要的是，这种交联反应引起线粒体的损伤，导致严重的肿瘤细胞凋亡，从而抑制肿瘤生长。本发明探针不仅可以对肿瘤进行长窗口期近红外和光声双模态成像，更主要的是，该探针可以抑制肿瘤生长，实现肿瘤诊疗一体化。CN115505031ACN115505031A权利要求书1/2页1.一种RNA反应型荧光探针，其结构式如下：。2.权利要求1所述RNA反应型荧光探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将化合物5与化合物8反应，得到RNA反应型探针；所述化合物5和化合物8为如下化学结构：。3.根据权利要求2所述RNA反应型荧光探针的制备方法，其特征在于，将化合物5与化合物8在有机溶剂、无机铜化合物、还原剂存在下室温反应5～10小时，得到RNA反应型探针。4.根据权利要求2所述RNA反应型荧光探针的制备方法，其特征在于，将化合物4与三氯氧磷（POCl3）反应，得到化合物5；所述化合物4为如下化学结构：。5.根据权利要求2所述RNA反应型荧光探针的制备方法，其特征在于，将化合物7在有机溶剂中活化，然后与RGD‑NH2室温反应4～12小时，得到化合物8；所述化合物7为如下化学结构：2CN115505031A权利要求书2/2页。6.权利要求1所述RNA反应型荧光探针在制备长窗口期荧光成像试剂或者光声成像试剂中的应用。7.权利要求1所述RNA反应型荧光探针在制备与细胞质RNA发生反应的试剂和/或引起线粒体损伤的试剂中的应用。8.权利要求1所述RNA反应型荧光探针在制备肿瘤成像及治疗试剂中的应用。9.利用权利要求1所述RNA反应型荧光探针进行成像的方法，其特征在于，光照所述RNA反应型荧光探针，实现成像。10.权利要求2所述化合物5与化合物8在制备权利要求1所述RNA反应型荧光探针中的应用。3CN115505031A说明书1/11页一种RNA反应型荧光探针及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明属于检测技术和成像领域，具体涉及一种酶‑光双控的RNA反应型荧光探针及其制备方法，以及该探针在肿瘤成像及治疗上的应用。背景技术[0002]癌症，又称恶性肿瘤，是严重威胁人类生命健康的重大疾病之一。根据国家癌症中心2021年9月的数据显示，伴随着老龄化加剧、生态环境持续恶化、不健康生活方式及食品安全问题凸现，我国癌症发病率和死亡率呈现出明显上升趋势，这已成为一个必须高度重视的公共卫生问题乃至社会问题。分子探针作为分子影像技术核心要素之一，在癌症的精准诊疗中扮演着重要的角色。尽管目前已有大量分子成像探针被开发用于癌症成像和治疗，但由于肿瘤特异性差，存在损伤正常组织的可能性，往往达不到精确诊疗的目的。基于肿瘤微环境（TME）的特征，科学家们开发多种可激活分子探针，可由内源性物质（如过表达酶、酸性pH、高还原性谷胱甘肽和乏氧等）触发，并能够对癌细胞进行特异性破坏，从而降低传统化学治疗或放射治疗等对正常组织的毒副作用。然而，大多数可激活诊疗策略仅属于单一因素触发，通常不足以有效避开正常细胞而精确消融癌症细胞，导致潜在的假阳性或假阴性诊疗结果。发明内容[0003]为克服现有技术的缺点与不足，本发明提供了一种酶‑光双控的RNA反应型荧光探针及其制备方法和应用，不仅延长探针在肿瘤细胞中的滞留时间，更主要的是，探针交联于RNA后会引起线粒体的损伤，导致严重的肿瘤细胞凋亡，从而抑制肿瘤生长。而且在众多的触发模式中，光已被证明是一种具有时空可控制性的精确激活治疗的有吸引力工具，而不需要物理接触。[0004]为了实现上述目的，本发明的技术方案为：一种RNA反应型荧光探针，其结构式如下：上述RNA反应型荧光探针的制备方法，包括以下步骤：（1）将化合物1与5‑氯戊炔反应，得到化合物2；4CN115505031A说明书2/11