一种比率型近红外荧光探针分子及其制备方法和应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115925667A(43)申请公布日2023.04.07(21)申请号202211280811.2(22)申请日2022.10.19(71)申请人复旦大学地址200433上海市杨浦区邯郸路220号(72)发明人雷祖海蓝庆春(74)专利代理机构上海正旦专利代理有限公司31200专利代理师陆飞陆尤(51)Int.Cl.C07D311/82(2006.01)C07F5/02(2006.01)C09K11/06(2006.01)C09B23/06(2006.01)G01N21/64(2006.01)A61K49/00(2006.01)权利要求书2页说明书8页附图2页(54)发明名称一种比率型近红外荧光探针分子及其制备方法和应用(57)摘要本发明属于生物材料技术领域，具体为一种比率型近红外荧光探针分子及其制备方法和应用。本发明的荧光探针分子，其结构通式见下面；该结构分子可构建选择性被特定底物激活的比率型近红外第二窗口荧光探针，用于生物体深组织成像、生物传感分析。CN115925667ACN115925667A权利要求书1/2页1.一种比率型近红外荧光探针分子，记为Rap，其特征在于，其化合物结构通式如下：其中，X选自O或S；Y选自ClO4、PF6、BF4、Cl、Br、I、CF3COO、CF3SO3、CH3COO或CH3SO3；R1选自H、OH、OCH3或N[(CH2)nCH3]2；R2和R3为H、邻羧基苯基或苯基或邻甲基苯基，R4为取代苄氧基，可选自4‑硝基苄氧基、4磷酸基苄氧基、4‑谷氨酰转肽基苄氧基、4‑β‑半乳糖基苄氧基、叠氮基苄氧基、2，4‑二硝基苄氧基、4‑硼酸苄氧基或4‑硼酸酯苄氧基，n为0～6的整数。2.一种如权利要求1所述的比率型近红外荧光探针分子的制备方法，其特征在于，其合成路线如下：其中，X选自O或S；Y选自ClO4、PF6、BF4、Cl、Br、I、CF3COO、CF3SO3、CH3COO或CH3SO3；R1选自H、OH、OCH3或N[(CH2)nCH3]2；R2和R3为H、邻羧基苯基或苯基或邻甲基苯基，，R4为取代苄氧基，可选自4‑硝基苄氧基、4磷酸基苄氧基、4‑谷氨酰转肽基苄氧基、4‑β‑半乳糖基苄氧基、叠氮基苄氧基、2，4‑二硝基苄氧基、4‑硼酸苄氧基或4‑硼酸酯苄氧基，n为0～6的整数；化合物1为取代罗丹明6G，化合物2为取代苯酰，化合物3为取代酰氯；制备的具体步骤如下：(1)中间体1的合成：将化合物1取代罗丹明6G溶于氢氧化钠和乙醇混合溶液中，在150～170℃下反应36～48小时；冷却后用盐酸溶液调节pH至3～4，析出固体过滤，得到中间产物1；(2)中间体2的合成：将中间体1、环己酮溶于浓硫酸中，于80～100℃下反应1～3小时，冷却至室温后加入冰水，加入质子酸，析出固体过滤，得到中间体2；中间产物1和环己酮的投料摩尔比为1:(1～3)；2CN115925667A权利要求书2/2页(3)中间体3的合成：将化合物2取代苯酰溶于浓硫酸中，于80～100℃下反应1～3小时，冷却至室温后加入冰水，加入质子酸，析出固体过滤得到中间体3；中间产物2和环己酮的投料摩尔比为1:(1～3)；(4)中间体4的合成：将中间体3、丙二醛二缩苯胺盐酸盐溶于醋酸和醋酸酐混合溶剂中，在氮气保护下，于90～110℃下反应1～3小时；冷却至室温后，有机相浓缩并用柱色谱分离，得到中间体4；(5)中间体5的合成：在氮气保护下，将中间体2、中间体4加入到甲苯和正丁醇混合溶剂中，于80～120℃下反应3～6小时；冷却至室温后，有机相浓缩，并用柱色谱分离，得到中间体5；中间体2和中间产物4的投料摩尔比为1:(1～3)；(6)比率型近红外荧光探针分子(产物1)的合成：将中间体5和化合物3取代酰氯溶于二氯甲烷，加入有机碱，室温反应12～48h；淬灭反应后，有机相浓缩，并用柱色谱分离，得到产物1；中间体5和取代酰氯的投料摩尔比为1:(2～3)。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)、步骤(3)中所述质子酸选自HClO4、HPF6、HBF4、HCl、HBr、HI、CF3COOH、CF3SO3H和CH3SO3H中的一种。4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(6)中所述有机碱选自三乙胺、N，N‑二异丙基乙胺、吡啶中的一种。5.如权利要求1所述的比率型近红外荧光探针分子在制备用于生物体深组织成像、生物传感分析试剂或胶束溶液中的应用。3CN115925667A说明书1/8页一种比率型近红外荧光探针分子及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明属于生物材料技术领域，具体涉及一种比率型近红外荧光探针分子及其制备方法和其应用。背景技术[0002]近年来，近红外第二窗口(1