一种用于检测水产品中甲霜灵对映体和甲霜灵酸对映体残留的方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN116008437A(43)申请公布日2023.04.25(21)申请号202310109504.6G01N30/86(2006.01)(22)申请日2023.02.10(71)申请人中国水产科学研究院珠江水产研究所地址510380广东省广州市荔湾区芳村西塱兴渔路1号(72)发明人周豪尹怡张媚玉郑光明单奇马丽莎林嘉薇李丽春(74)专利代理机构北京博尔赫知识产权代理事务所(普通合伙)16045专利代理师王灿(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/06(2006.01)G01N30/72(2006.01)权利要求书1页说明书11页附图6页(54)发明名称一种用于检测水产品中甲霜灵对映体和甲霜灵酸对映体残留的方法(57)摘要本发明提供了一种用于检测水产品中甲霜灵对映体和甲霜灵酸对映体残留的方法，涉及分析化学领域和兽药残留检测技术领域，包括以下步骤：S1.水产品的带皮肌肉组织与乙酸乙酯混合，振荡提取，上清液，氮吹干，用乙腈水溶液复溶；S2：采用固相萃取柱，进行净化，收集洗脱液，氮吹干，用乙腈水溶液复溶，滤膜过滤，得待测液；S3：对所述待测液进行手性液相色谱‑串联质谱分析检测，测得水产品中甲霜灵对映体和甲霜灵酸对映体残留。基于液液萃取和阴离子交换固相萃取净化，以及手性LC‑MS/MS技术的高选择性和高灵敏度特性，建立了提取方便、简单，可操作性强，重现好和具有通用性的检测方法。CN116008437ACN116008437A权利要求书1/1页1.一种用于检测水产品中甲霜灵对映体和甲霜灵酸对映体残留的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.水产品的带皮肌肉组织与乙酸乙酯按照1～3g：10mL混合，振荡提取1～3次，合并上清液，氮吹干所述上清液后，用乙腈水溶液复溶，得待净化液；S2：采用固相萃取柱，对所述待净化液进行净化，收集洗脱液，氮吹干所述洗脱液后，用乙腈水溶液复溶，滤膜过滤，得待测液；S3：对所述待测液进行手性液相色谱‑串联质谱分析检测，测得水产品中甲霜灵对映体和甲霜灵酸对映体残留；其中，液相色谱所用色谱柱为多糖类手性色谱柱；所述质谱采用电喷雾电离正离子多反应检测模式进行。2.如权利要求1所述检测水产品中甲霜灵对映体和甲霜灵酸对映体残留的方法，其特征在于，所述水产品为草鱼、鲫鱼、鲤鱼、乌鳢、罗非鱼和大口黑鲈中的一种。3.如权利要求1所述检测水产品中甲霜灵对映体和甲霜灵酸对映体残留的方法，其特征在于，S1中所述水产品的带皮肌肉组织与乙酸乙酯混合为涡旋混匀，涡旋时间为0.5～2min；S1中所述每次振荡提取时间为10～20min；S1中振荡提取后，离心获得上清液，离心转速为4500～5500r/min，离心时间为3～7min；S1中氮吹在35～45℃水浴中进行，S1中所述乙腈水溶液的体积浓度为5～20％，乙腈水溶液用量为2～4mL。4.如权利要求1所述检测水产品中甲霜灵对映体和甲霜灵酸对映体残留的方法，其特征在于，S2中所述净化具体为：依次用甲醇、水、氨水溶液活化固相萃取柱，将待净化液上样，氨水溶液和甲醇水溶液依次淋洗，弃去淋洗液，低真空抽干，用甲酸甲醇溶液洗脱。5.如权利要求1所述检测水产品中甲霜灵对映体和甲霜灵酸对映体残留的方法，其特征在于，S2所述淋洗用氨水溶液用量为2～4mL，体积浓度为0.1～1％，淋洗用甲醇水溶液用量为2～4mL，体积浓度为5～20％；S2中所述甲酸甲醇溶液用量为2～4mL，体积浓度为0.1～5％；S2中所述氮吹在35～45℃水浴中进行；S2中所述乙腈水溶液的体积浓度为20～70％，乙腈水溶液用量为0.3～0.7mL。6.如权利要求1所述检测水产品中甲霜灵对映体和甲霜灵酸对映体残留的方法，其特征在于，S2中所用固相萃取柱为MAX小柱，型号为3cc/60mg，60μm。7.如权利要求1所述检测水产品中甲霜灵对映体和甲霜灵酸对映体残留的方法，其特征在于，S3中所述多糖类手性色谱柱内径为2.1～4.6mm，柱长为100～250mm，填料粒径为3～10μm；固定相为硅胶表面涂覆或接枝纤维素‑三(3,5‑二甲基苯基氨基甲酸酯)；流动相为甲酸水溶液和甲酸乙腈溶液，体积比为1：(1～5)；水溶液和乙腈溶液中甲酸的体积浓度分别为0.05～0.2％；流速为0.2～0.6mL/min，柱温为20～35℃，进样体积为1～10μL。8.如权利要求1所述检测水产品中甲霜灵对映体和甲霜灵酸对映体残留的方法，其特征在于，S3中所述电喷雾电离正离子多反应监测模式，采用电喷雾离子源电离，正离子在m/z100～1000扫描，利用三重四极杆质谱仪进行选择反应监测分析；电喷雾电压为3500～5500V，滞留时间为20～100ms，氮气流速为6～12L/min，