一种快速测定烟草中甲霜灵残留含量的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109358150A(43)申请公布日2019.02.19(21)申请号201811379486.9(22)申请日2018.11.20(71)申请人云南省烟草质量监督检测站地址650000云南省昆明市高新开发区科医路41号(72)发明人王春琼曾彦波陈丹张燕彭丽娟李苓(74)专利代理机构昆明协立知识产权代理事务所(普通合伙)53108代理人谢嘉(51)Int.Cl.G01N30/88(2006.01)G01N27/42(2006.01)权利要求书2页说明书7页附图3页(54)发明名称一种快速测定烟草中甲霜灵残留含量的方法(57)摘要本发明公开了一种快速测定烟草中甲霜灵残留含量的方法。运用电化学分析法，以甲霜灵作为模板分子，邻苯三酚为修饰材料，利用电聚合手段将甲霜灵分子印迹膜修饰到玻碳电极表面，制得电化学传感器。邻苯三酚的引入不仅可以增加电子传递速率，且与分子印迹膜结合后，使印迹材料的比表面积增加，电流响应信号增强，提高了传感器的灵敏度，选择性好。该方法回收率范围为98.5％～107.8％；变异系数小于4.01％；检出限和定量限分别为0.003mgKg-1、0.01mgKg-1。本发明前处理方法简单、操作简便、检测速度快，准确度和精密度高，成本低廉，具有良好的应用前景。CN109358150ACN109358150A权利要求书1/2页1.一种快速测定烟草中甲霜灵残留含量的方法，具体采用以下步骤：(1)电化学传感器的制备①玻碳电极预处理将玻碳电极依次用0.5μm和50nm的Al2O3粉在麂皮上抛光，将抛光后的玻碳电极依次用50％HNO3水溶液、无水乙醇和去离子水超声清洗5min，再用去离子水冲洗后自然晾干；②聚邻苯三酚修饰电极的制备称取1.51mg邻苯三酚置于10mL0.1mol/L的NaOH溶液中，混匀得到浓度为1.2mmol/L的邻苯三酚溶液；将预处理好的玻碳电极置于邻苯三酚溶液中，浸泡10min，用CV法在-0.4～1.0V电位范围内以20mV/S速率聚合10圈，使邻苯三酚聚合膜沉积在玻碳电极表面，再用去离子水冲洗玻碳电极表面，置于0.1mol/LNaOH中，以100mV/s速率在-0.4～1.0V电位范围内扫3圈CV以去除电极表面未聚合的邻苯三酚，得到聚邻苯三酚修饰玻碳电极；③甲霜灵印迹传感器的制备将0.16mmol苯酚与0.01mmol甲霜灵溶于10mLpH＝9的硼砂-硼酸缓冲液中，通N220min除氧制得预聚合液；将聚邻苯三酚修饰玻碳电极浸于预聚合液中以50mV/s速率在0.2～0.8V电位范围内扫40圈CV，在聚邻苯三酚修饰玻碳电极表面沉积甲霜灵分子印迹膜，得到印迹电极；接着将印迹电极浸于甲醇/乙酸v/v＝3:1的洗脱液中，用磁力搅拌洗脱20min以去除模板分子甲霜灵，得到甲霜灵印迹传感器；(2)待测样品溶液处理称取1.0g待测烟草样品置于25mL聚乙烯离心管中，加入10mL乙腈作为萃取液，超声10min，过滤后加入3gNaCl，静置待分层后，取上层乙腈层1.5mL加入试剂包净化，过滤得到待测样品溶液；所述的试剂包为150mg无水硫酸镁和25mgN-丙基乙二胺键合固相吸附剂的混合物；(3)铁氰化钾缓冲液配制称取0.1646gK3Fe(CN)6和0.7455gKCl，用水定容至100mL容量瓶中，得到铁氰化钾缓冲液；(4)绘制标准工作曲线用乙腈作为溶剂，配制甲霜灵储备液，移取甲霜灵储备液至10mL铁氰化钾缓冲液中，获得浓度为3×10-9～1.8×10-5mol/L范围内的系列标准工作液，绘制标准曲线；响应电流△i与甲霜灵的浓度c在3×10-9～1.8×10-5mol/L范围内，线性回归方程分别为△i＝1.1416+0.4070c，相关系数r2＝0.9968，c的单位为μmolL-1；(5)用电化学工作站进行分析用CHI660型电化学工作站进行检测，采用三电极系统：步骤(1)所得的甲霜灵印迹传感器为工作电极，铂电极为辅助电极，饱和甘汞电极SCE为参比电极；将三电极系统放入10mL铁氰化钾缓冲液中，平衡，待背景电流稳定后，进行循环伏安CV和差示脉冲DPV的测定；CV测定条件：扫描范围为-0.2～0.6V，扫描速率为100mV/s；DPV测定条件：扫描范围为-0.2～0.6V，扫描速率为100mV/s，电位增量为0.004V，振幅为0.05V，脉冲宽度为0.05s，采样宽度为0.016s；(6)结果计算以干基计的甲霜灵残留量R，以毫克每千克表示，按下式计算：2CN109358150A权利要求书2/2页式中：R—以干基计的甲霜灵残留量(mgKg-1)；C—标准工作曲线计算得到的结果(μmolL-1)；V—萃取液体积(mL)；M—甲霜灵的摩尔质量(gmo