用于五种重要节肢/啮齿媒介传播病毒检测的引物探针组合、试剂盒及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111826463A(43)申请公布日2020.10.27(21)申请号202010542567.7(51)Int.Cl.(22)申请日2020.06.15C12Q1/70(2006.01)C12Q1/686(2018.01)(66)本国优先权数据C12N15/11(2006.01)201911405814.22019.12.31CNC12R1/93(2006.01)(71)申请人深圳市人民医院地址518003广东省深圳市东门北路1017号申请人军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所(72)发明人吴诗品金宁一李体远李昌杜寿文田明尧任琴张星艳王宇航戴少波(74)专利代理机构北京一枝笔知识产权代理事务所(普通合伙)11791代理人张庆瑞权利要求书2页说明书9页序列表3页附图4页(54)发明名称用于五种重要节肢/啮齿媒介传播病毒检测的引物探针组合、试剂盒及其应用(57)摘要本发明涉及生物检测领域，具体涉及一种用于建立同时检测黄热病毒(YFV)、拉沙病毒(LASV)、汉坦病毒(HTV)、基孔肯雅病毒(CHIKV)及登革热病毒(DENV)的极速检测引物探针组合、试剂盒及其应用。本发明具备很高的灵敏度和特异性，其建立的方法与其他荧光定量PCR相比，可在半小时内获得结果，可达到临床快速检测，有望实现真正的POCT，具有很好的应用前景。CN111826463ACN111826463A权利要求书1/2页1.引物探针组合，其特征在于，包括如下组合中的一种或两者以上：组合一：(1)、上游引物具有如SEQIDNo.1所示的核苷酸序列；和(2)、下游引物具有如SEQIDNo.2所示的核苷酸序列；和(3)、荧光探针具有如SEQIDNo.3所示的核苷酸序列；或(4)、如(1)、(2)或(3)所示的核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或多个碱基获得的核苷酸序列，且与(1)、(2)或(3)所示的核苷酸序列功能相同或相似的核苷酸序列；(5)、与(1)、(2)或(3)所示的核苷酸序列至少有80％同一性的核苷酸序列；组合二：(6)、上游引物具有如SEQIDNo.4所示的核苷酸序列；和(7)、下游引物具有如SEQIDNo.5所示的核苷酸序列；和(8)、荧光探针具有如SEQIDNo.6所示的核苷酸序列；或(9)、如(6)、(7)或(8)所示的核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或多个碱基获得的核苷酸序列，且与(6)、(7)或(8)所示的核苷酸序列功能相同或相似的核苷酸序列；(10)、与(6)、(7)或(8)所示的核苷酸序列至少有80％同一性的核苷酸序列；组合三：(11)、上游引物具有如SEQIDNo.7所示的核苷酸序列；和(12)、下游引物具有如SEQIDNo.8所示的核苷酸序列；和(13)、荧光探针具有如SEQIDNo.9所示的核苷酸序列；或(14)、如(11)、(12)或(13)所示的核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或多个碱基获得的核苷酸序列，且与(11)、(12)或(13)所示的核苷酸序列功能相同或相似的核苷酸序列；(15)、与(11)、(12)或(13)所示的核苷酸序列至少有80％同一性的核苷酸序列；组合四：(16)、上游引物具有如SEQIDNo.10所示的核苷酸序列；和(17)、下游引物具有如SEQIDNo.11所示的核苷酸序列；和(18)、荧光探针具有如SEQIDNo.12所示的核苷酸序列；或(19)、如(16)、(17)或(18)所示的核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或多个碱基获得的核苷酸序列，且与(16)、(17)或(18)所示的核苷酸序列功能相同或相似的核苷酸序列；(20)、与(16)、(17)或(18)所示的核苷酸序列至少有80％同一性的核苷酸序列；组合五：(21)、上游引物具有如SEQIDNo.13所示的核苷酸序列；和(22)、下游引物具有如SEQIDNo.14所示的核苷酸序列；和(23)、荧光探针具有如SEQIDNo.15所示的核苷酸序列；或(24)、如(21)、(22)或(23)所示的核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或多个碱基获得的核苷酸序列，且与(21)、(22)或(23)所示的核苷酸序列功能相同或相似的核苷酸序列；(25)、与(21)、(22)或(23)所示的核苷酸序列至少有80％同一性的核苷酸序列。2.根据权利要求1所述的引物探针组合，其特征在于，所述取代、缺失或添加一个或多个中的多个为2个、3个、4个、5个或6个。3.如权利要求1或2所述的引物探针组合在制备病毒检测的试剂和/或试剂盒中的应2CN111826463A权利要求书2/2页用。4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述病毒为节肢/啮齿媒介传播病毒。5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述节肢/啮齿媒介传