最新精编医学专题—土壤中分解尿素尿素的细菌的分离与计数.ppt

微生物的培养(péiyǎng)与应用第二页共三十九页。一、课题(kètí)目标三、研究(yánjiū)思路在本课题提供的选择培养基的配方中尿素是培养基中的惟一氮源因此原则上只有能够利用尿素的微生物才能够生长。但实际上微生物的培养是一个非常复杂的问题有些微生物可以利用其他微生物的代谢产物生长繁殖因此能够在选择培养基上生长的微生物不一定是所需要(xūyào)的微生物还需要(xūyào)进一步的验证。第六页共三十九页。（二）统计菌落(jūnluò)数目思考题第十页共三十九页。A同学的结果与其他同学不同可能的解释(jiěshì)有两种。一是由于土样不同；二是由于培养基污染或操作失误。另一种方案：将A同学配制的培养基在不加(bùjiā)土样的情况下进行培养作为空白对照以证明培养基是否受到污染。通过这个事例可以看出实验结果要有说服力对照的设置是必不可少的。四、实验(shíyàn)案例准备牛肉(niúròu)膏蛋白胨培养基和选择培养基将菌液稀释相同的倍数在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目因此牛肉膏蛋白胨培养基可以作为对照用来判断选择培养基是否起到了选择作用。由于初次实验对于稀释的范围没有把握因此选择了一个较为宽泛的范围：稀释倍数为103～107。每个稀释度下需要3个选择培养基1个牛肉膏蛋白胨培养基因此共需要15个选择培养基5个牛肉膏蛋白胨培养基。此外还需要准备8个灭菌的试管和1个灭菌的移液管。第十五页共三十九页。将10g土样加入盛有90mL无菌生理盐水的锥形瓶中（锥形瓶体积为250mL）充分摇匀吸取上清液1mL转移至盛有9mL的生理盐水的无菌大试管中依次等比稀释至107稀释度并按照由107～103稀释度的顺序分别吸取0.1mL进行平板涂布操作(cāozuò)。按照浓度从低到高的顺序涂布平板不必更换移液管。将涂布好的培养皿放在30℃温度(wēndù)下培养。随着培养时间的延长会有不同的菌落产生。比较牛肉膏培养基和选择培养基中菌落的数量、形态等并做好记录。挑选选择培养基中不同形态的菌落接入含酚红培养基的斜面中观察能否产生如课本中图2-10的颜色反应。第十八页共三十九页。第十九页共三十九页。为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量(shùliàng)选用的稀释范围相同吗？4.细菌(xìjūn)的计数第二十二页共三十九页。关注菌落的形态、大小、边缘(biānyuán)、突起、颜色、质地等等都是区分细菌的重要手段。关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等都是区分细菌的重要(zhòngyào)手段。关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等都是区分细菌(xìjūn)的重要手段。关注菌落的形态、大小(dàxiǎo)、边缘、突起、颜色、质地等等都是区分细菌的重要手段。关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等都是区分细菌的重要(zhòngyào)手段。[一]无菌操作1、取土用的小铁铲的盛土样的信封在使用前都需要灭菌(mièjūn)。2、应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中塞好棉塞。3、在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在火焰旁操作。[二]做好标记注明培养基种类、培养日期、平板培养样品的稀释度等。[三]规划时间六、课题成果(chéngguǒ)与评价伊红—美蓝培养基是鉴别培养基可以用来检测自来水中的大肠杆菌是否超标因为的代谢产物与伊红—美蓝结合使菌落呈深紫色并带有金属光泽使大肠杆菌的菌落显示出来并没有促进(cùjìn)大肠杆菌的生长和抑制其他微生物的生长。大肠杆菌(dàchánɡɡǎnjūn)呈黑色中心有或无金属光泽如果学生选取的是同一种土样统计的结果应该接近。如果结果相差太远需要进一步分析(fēnxī)产生差异的原因。第三十三页共三十九页。本课题知识(zhīshi)小结:七、例题(lìtí)解析例2．在微生物群体生长规律的测定中种内斗争(dòuzhēng)最显著最激烈的时期是A．调整期B．对数期C．稳定期D．衰亡期例3．（2005年江苏）抗生素作为治疗细菌感染的药物其高效性和巨大的经济价值使抗生素工业经久不衰。其中青霉素的发现和应用具有划时代的意义。⑴青霉素发酵产生青霉素。青霉菌的新陈代谢类型(lèixíng)是青霉素是青霉菌的代谢产物。⑵在生产和科研中常选用处于