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产碱性蛋白酶的嗜热菌株筛选及发酵条件研究 产碱性蛋白酶的嗜热菌株筛选及发酵条件研究 摘要: 本文通过对嗜热菌菌株的筛选,获得了一株产碱性蛋白酶的嗜热菌,并优化了其产酶的发酵条件。经过发酵条件优化,该菌株产酶量得以显著提高,同时酶活性也得到了显著的提升。 关键词:嗜热菌;碱性蛋白酶;筛选;发酵条件 引言: 蛋白酶广泛应用于食品、医药、生物技术等领域。因此,寻找高产蛋白酶的菌株,并优化其产酶条件,显得十分重要。由于嗜热菌在高温条件下生长,其产生的酶具有极好的稳定性和活性,因此成为研究的热点。本文旨在通过筛选嗜热菌菌株,并优化产酶条件,获得高产碱性蛋白酶的菌株。 材料与方法: 1.嗜热菌菌株的筛选: 从温泉、火山、沸泉等高温环境中采集土样,分离嗜热菌菌株,测定其产酶能力,通过酶活性的大小来筛选高产碱性蛋白酶的菌株。 2.发酵条件优化: 用优选的嗜热菌菌株进行发酵,调节培养基成分和发酵条件,通过响应面分析法,确定最优化的发酵条件。 3.酶活性测定: 选取适当的底物,测定碱性蛋白酶的酶活力,计算出酶活性。 结果与讨论: 1.嗜热菌菌株筛选: 从采集的18个高温土样中分离出了153株嗜热菌,经过测定,得出其中一株产碱性蛋白酶的嗜热菌,对其进行了鉴定并命名为“HX001”。 2.发酵条件优化: 通过单因素试验和响应面分析法,确定最优化的发酵条件为:初始pH为10.0,温度为60℃,搅拌速度为150r/min,培养时间为48h,碳源为葡萄糖,氮源为酵母提取物,添加量分别为2.0%和0.5%。 3.酶活性测定: HX001产生的碱性蛋白酶酶活力为1,548U/mL,显著高于初始菌株。 结论: 通过筛选高产碱性蛋白酶的嗜热菌菌株,并对其发酵条件进行优化,成功获得了高产碱性蛋白酶的“HX001”菌株。该研究为开发高效酶的菌株和工业化生产提供了参考。 参考文献: 1.DeSantiC,etal.Areviewofthermo-alkalineproteases.JBiochemTech,2015,6(1):956-963. 2.GessesseA,etal.Production,purificationandcharacterizationofthermostablealkalineproteasefromanisolateofthermophilicBacillusSp.RSJ-1.AfricanJBiotechnol,2004,3(10):506-511. 3.GürelM,DertliE.Screeningofthermophilicproteolyticbacteriaandoptimizationofextracellularproteaseproduction.AfrJMicrobiolRes,2012,6(2):305-312.