基因工程第四章-工具酶ppt课件.ppt
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基因工程第四章-工具酶ppt课件.ppt
ChapterFourManipulativeEnzymes一、限制性内切酶的发现与种类:二、限制性片断末端的连接作用:三、限制性内切酶的命名:四、影响酶活性的因素:3、酶切温度:4.DNA的分子结构:6、内切酶的缓冲液:不同的酶使用不同的类型7.非适宜环境包括:五、双酶切:DNA连接酶:2.特性:一、DNA聚合酶I二、klenow片断:ThankYou!
基因工程的工具酶PPT课件.ppt
基因工程的工具酶核酸酶的分类:1)根据核酸底物分RNA酶(Rnase)、DNA酶(Dnase)和底物非专一性核酸酶;2)根据作用方式分内切核酸酶(endonuclease)和外切核酸酶(exonuclease);3)根据对底物碱基专一性分碱基专一性核酸酶(切割部位的碱基序列高度专一性)和非碱基专一性核酸酶(切割部位的碱基序列随机性)在限制修饰系统中,限制作用是指一定类型的细菌可以通过限制性核酸内切酶的作用,破坏入侵的外源DNA(如噬菌体DNA等),使得外源DNA对生物细胞的入侵受到限制;而生物细胞(如宿主
第二章基因工程工具酶限制酶ppt课件.ppt
第二章基因克隆所需的工具酶一、限制性内切酶(restrictionenzyme)1.限制性核酸内切酶的发现限制性核酸内切酶,是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列,并由此切割DNA双链结构的核酸内切酶。它们主要是从原核生物中分离纯化出来的。根据1994年美国出版的《分子生物学百科全书》的统计数字,仅Ⅱ型核酸内切限制酶一项迄今就已从各种不同的微生物当中,分离出了2300种以上,可识别230种不同的DNA序列。早在本世纪中期,以Arber等人对入噬菌体在大肠杆菌不同菌株上的平板培养效应的研究为基础
基因工程工具酶培训课件.ppt
基因工程工具酶一概述细菌的R-M体系:定义:限制-修饰体系,细菌可识别自身DNA和外源DNA,降解外源DNA—对外源DNA有抵抗力原理:修饰酶从SAM(s-腺苷甲硫氨酸)上转移甲基到特定识别位点的特定碱基上,使DNA甲基化,保证内源DNA不被限制酶降解生物意义:保证内源DNA不被限制酶降解,快速降解未被甲基化的外源DNA※DNA复制过程中的甲基化:模板链是甲基化的,使子代DNA(半甲基化)不被限制酶降解,甲基化酶再将新合成链甲基化,使子代DNA完全甲基化,防止被内切酶降解二限制性内切酶(限制酶)限制酶识别
基因工程中工具酶限制酶的应用培训课件.ppt
基因工程中工具酶限制酶的应用基因工程工具酶基因工程工具酶徐师大-屈艾老师制作第一节限制性核酸内切酶和DNA片段化(九个问题)一、限制性内切酶(restrictionenzyme)的发现1.限制性核酸内切酶:---是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列,并由此切割DNA双链结构的核酸内切酶。它们主要是从原核生物中分离纯化出来的。根据1994年美国出版的《分子生物学百科全书》的统计数字,仅Ⅱ型核酸内切限制酶一项迄今就已从各种不同的微生物当中,分离出2300种以上,可识别230种不同的DNA序列。2