土壤中分解尿素的细菌的分离与计数.pptx

会计学课题(kètí)背景3、课题的目的(mùdì)--土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一.研究(yánjiū)思路1、实例(shílì)：2、实验室中微生物的筛选(shāixuǎn)原理：15.0g问怎样证明(zhèngmíng)此培养基具有选择性呢？1、显微镜直接(zhíjiē)计数：2.间接计数法（活菌计数法）
⑴原理：在稀释度足够高时，微生物在固体培养基上所形成的一个(yīɡè)菌落是由一个(yīɡè)单细胞繁殖而成的，即一个(yīɡè)菌落代表原先的一个(yīɡè)单细胞。

⑵常用方法：稀释涂布平板法。注意事项
①为了保证结果准确，一般(yībān)选择菌落数在30——300的平板上进行计数。
②为使结果接近真实值可将同一稀释度加到三个或三个以上的平皿中，经涂布，培养计算出菌落平均数。
③统计的菌落往往比活菌的实际数目低。设置对照的主要目的是排除实验组中非测试(cèshì)因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。实例：在做分解尿素的细菌的筛选与统计菌
落数目的实验时，A同学从对应的106
倍稀释的培养基中筛选出大约150个菌
落，但是其他同学在同样的稀释度下
只选择出大约50个菌落(jūnluò)。分析其原因。小结：通过这个(zhège)事例可以看出，实验结果要有说服力，对照的设置是必不可少的。实验设计实验(shíyàn)流程实验(shíyàn)操作实验(shíyàn)操作实验(shíyàn)操作实验(shíyàn)操作注意事项：
做好标记：本实验使用的平板和试管(shìguǎn)比较多。为避免混淆，最好在使用前就做好标记。例如，在标记培养皿时，应注明培养基种类、培养日期以及平板上培养样品的稀释度等。
在进行系列稀释的时候，为避免试管(shìguǎn)相互混淆，可以将已经进行过稀释操作的试管(shìguǎn)，按稀释度递增的顺序，依次放置在试管(shìguǎn)架的另一行。这样，试管(shìguǎn)的位置就能清楚地表示出稀释进行到哪一步。实验(shíyàn)操作结果分析(fēnxī)与评价结果分析(fēnxī)与评价结果分析(fēnxī)与评价结果分析(fēnxī)与评价二.实验的具体操作
㈠.土壤取样
从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的信封(xìnfēng)中。
◆取土样用的小铁铲和盛土样的的信封(xìnfēng)在使用前都要灭菌。
㈡.制备培养基：
制备以尿素为唯一氮源的选择培养基。◆应在火焰旁称取土壤(tǔrǎng)10g。
◆在稀释土壤(tǔrǎng)溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行㈣.取样(qǔyàng)涂布㈣.取样(qǔyàng)涂布㈤.微生物的培养(péiyǎng)与观察㈤.微生物的培养(péiyǎng)与观察◆如果得到了2个或2个以上菌落数目在30——300的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数，如果同一稀释倍数的三个重复的菌落数相差较大，表明(biǎomíng)试验不精确，需要重新实验。微生物的培养(péiyǎng)与观察三.结果分析与评价
1.通过对照实验，若培养物有杂菌污染，菌落数偏高；若培养物混入其他氮源，则菌落形态多样，菌落数偏高，难以选择出分解尿素的微生物。
2.提示：选择每个平板上长有30—300个菌落的稀释倍计算每克样品的菌数最合适。同一稀释倍数(bèishù)的三个重复的菌落数不能相差悬殊，如相差较大，表示实验不精确。四、操作(cāozuò)提示五.课外延伸

在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高(shēnɡɡāo)，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素。大肠杆菌(dàchánɡɡǎnjūn)呈黑色中心,有或无金属光泽///本课题知识(zhīshi)小结:/1.对细菌群体生长规律测定的正确的表述是（）
A.在液体培养基上进行B.至少接种一种细菌
C.接种一个细菌D.及时补充消耗的营养物质
2.使用选择培养基的目的是（）
A.培养细菌
B.培养真菌
C.使需要的微生物大量繁殖(fánzhí)
D.表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别
3.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是()
A.CO2和N2B.葡萄糖和NH3
C.CO2和尿素D.葡萄糖和尿素4.下列说法不正确的是（）
A.科学家从70－80度热泉(rèquán)中分离到耐高温的TaqDNA聚合酶
B.统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5，以M3作为该样品菌落数的估计值
C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度
D.同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，种类最多。

5.为培养和分离出酵母菌并淘汰杂菌，常在培养基中加入（）
A.较多