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毕赤酵母生产重组人白介素11的发酵工艺研究的中期报告 本研究旨在探究毕赤酵母生产重组人白介素11的发酵工艺,并提高其产量和纯度。本次报告将介绍中期研究的进展。 一、研究背景 白介素11是一种细胞因子,具有调节免疫系统和炎症反应等作用。因此,它被广泛应用于免疫学和肿瘤治疗等领域。毕赤酵母是一种常见的真菌,已被广泛运用于生物制药领域。本研究旨在利用毕赤酵母生产重组人白介素11,并优化其发酵工艺。 二、实验设计 1.表达载体构建 我们构建了一个表达载体,其中包含白介素11基因和进入紫杆菌选择标记。这个载体能够稳定地保持白介素11基因的表达。 2.细胞培养 我们在摇瓶中培养了毕赤酵母,然后将其接种到500毫升发酵罐中,进行大规模培养。 3.发酵条件 我们改变了不同的发酵条件,如温度、pH值、营养物质添加量等,以寻找最适合白介素11产量的条件。我们发现,在28℃和pH6.0下,加入1%酵母提取物和2%酵母氮源、葡萄糖、磷酸盐和镁离子,可以获得最高的白介素11产量。 4.纯化和鉴定 我们采用离子交换层析和凝胶过滤层析纯化白介素11,并使用SDS-PAGE进行检测和鉴定。 三、研究结果 通过对不同发酵条件的优化,我们获得了最高为6.3g/L的白介素11生产量。经过离子交换层析和凝胶过滤层析,我们成功纯化出白介素11。亲和层析和ELISA测定进一步证实了其纯度和活性。 四、结论 本研究成功地利用毕赤酵母生产重组人白介素11,并优化其发酵工艺。最终获得了高产量和高纯度的白介素11。这种方法为生产大规模高质量的白介素11提供了有力的工具。