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利用巴斯德毕赤酵母表达重组中国水仙凝集素的发酵工艺研究的中期报告 一、选题背景 中国水仙凝集素(Narcissuspseudonarcissuslectin,NPL)是一种重要的植物血凝素,具有广泛的生物学活性和潜在的生物医学应用。然而,传统的NPL来源于野生植物,生产受到地理位置和季节限制,由于生产成本高、产量低等因素,限制了其在临床和研究领域的应用。 因此,利用重组DNA技术,将NPL的基因克隆到巴斯德毕赤酵母(Pichiapastoris)中表达,实现了大规模生产。本研究旨在优化重组巴斯德毕赤酵母的发酵工艺,提高NPL的生产效率。 二、研究内容 1.巴斯德毕赤酵母重组NPL的表达与纯化 将NPL基因克隆到巴斯德毕赤酵母中,表达的重组NPL比天然NPL具有更高的血凝力和稳定性。通过离心分离和吸附柱层析等纯化步骤,可以获得高纯度的重组NPL。 2.发酵条件的优化 通过实验,确定最佳的发酵条件:温度30℃,pH6.5,溶氧量大于30%。在这种条件下,可以获得较高的NPL产量。 3.发酵动力学模型的建立 利用常微分方程模型,建立巴斯德毕赤酵母重组NPL的发酵动力学模型,并通过实验数据拟合模型参数。模型可以精确地预测NPL的产量和生长曲线。 三、研究成果 1.确定了最佳的发酵条件,为NPL的大规模生产提供了工艺基础。 2.建立了巴斯德毕赤酵母重组NPL的发酵动力学模型,预测了NPL的产量和生长曲线,为工业化生产提供了理论指导。 3.确认了巴斯德毕赤酵母表达重组NPL的效果,验证了重组DNA技术在生物制药领域的应用价值。 四、研究展望 在今后的研究中,可以进一步优化巴斯德毕赤酵母重组NPL的发酵工艺,并探索NPL的更多生物学活性和应用。同时,将重组DNA技术应用到更多生物制药领域,实现更广泛的产业化应用。