固相萃取-高效液相色谱法测定枸杞中的类胡萝卜素.pdf

第#6卷第%期分析试验室VRB$#6$PR$%
#’’(年%月HJA:-/-QRC.:+BRS@:+BT/A/G+UR.+,R.T#’’(W%
"""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""

固相萃取!高效液相色谱法测定枸杞
中的类胡萝卜素

杨亚玲!"，赵榆林"，林强"，缪明明"，杨光宇#，尹家元#
（"$昆明理工大学生化学院，昆明%&’##(；#$云南大学化学系，昆明%&’’)"）

摘要：研究了固相萃取富集和预分离，高效液相色谱测定枸杞中的类胡萝卜素
的方法；枸杞中的类胡萝卜素用12固相萃取小柱预分离，以
*+,-./0,-..+34"5*+!
12（，）液相色谱柱为固定相，甲醇四氢呋喃（
,-./0,-..+34"56$)7"&’88&!8!(9
"）为流动相分离，用二极管矩阵检测器检测，检测波长为(&’:8。方法标准回收
率为)&;<"’6;。用该方法测定了几种枸杞样品中的类胡萝卜素。
关键词：高效液相色谱法；固相萃取；类胡萝卜素；枸杞
中图分类号：=%&>?>文献标识码：@文章编号："’’’!’>#（’#’’(）’%!’’#&!’6

枸杞是一种重要的中药材，富含类胡萝卜素，脂，胡萝卜素，玉米黄素单棕榈酸脂，隐黄素棕
#!#!
具有补肾养肝，润肺明目的作用。国内外已有不少榈酸脂，堇菜黄素双棕榈酸脂，玉米黄呋喃素双棕
学者研究过枸杞中的类胡萝卜素，但是这些研究只榈酸脂，花药黄素双棕榈酸脂，玉米黄素双棕榈酸
［］
是对枸杞中个别类胡萝卜素作了鉴定"<6。高效脂标准（分别购于IBCK+公司和LAM8+公司，纯度N
液相色谱技术的快速发展为植物成分研究提供了)&;）。
有力手段，并在类胡萝卜素分析中得到广泛应"$#色谱条件
用［(<>］。高效液相色谱法测定枸杞中的类胡萝卜色谱柱：12液相色谱柱（
*+,-./0,-..+34"56$)
素已有报道，但样品制备大多采用溶剂萃取，操作，）；12固相萃取小柱
887"&’88&!8*+,-./0,-..+
较麻烦［&］。固相萃取技术在分析化学中用作样品（，，）；流动相为：甲醇四氢呋喃（
"8G6’8M6’!8!(
富集和预分离已得到广泛应用［5，)］，该技术具有富
9"），流速为’$&8GO8A:；检测波长为(&’:8，进样
集倍数高，溶剂消耗少，环境污染小的优点。本文体积。上述色谱条件下标样和枸杞样品在
#’!G
研究了用固相萃取富集和预分离，高效液相色谱测
(&’:8波长处的色谱图见图"。
定枸杞中的类胡萝卜素的方法，并用紫外二级管矩
"$6样品处理
阵检测器作了辅助定性和峰纯度分析，已用于枸杞
称取枸杞样品’$&M，用蒸馏水浸泡复水，然后
中类胡萝卜素的测定。加入在研钵中磨碎，用四氢呋
"$’MP+#H=66&8G
实验部分
"喃超声振荡萃取6’8A:，过滤，滤渣再用"’8G四
仪器和试剂
"$"氢呋喃洗涤#<6次，至滤渣为白色。合并滤液并
美国公司高效液相色谱仪，包括
*+,-./#%)’定容到&’8G，取#’8G试液，用水稀释到"’’8G，
分离系统（四元泵及自动进样器），二极管矩阵
))%以"’8GO8A:流速通过预处理好的固相萃取小柱，
检测器，6#色谱管理软件；
2ABB-::AC8小柱离心脱水后，以"’8GO8A:流速用#8G四氢呋
水为石英亚沸蒸馏水并用2ABBA!D&’超纯水仪喃洗脱，洗脱液用针头过滤器过滤，进样
’$(&!8
处理，电阻（"58"·E8）；甲醇和四氢呋均为F4GH分析。
#’!G
级（IA/J-.公司）；玉米黄素，玉米黄素单肉豆蔻酸

!收稿日期：#’’6!’&!’5；修订日期：#’’6!’5!"%
作者简介：杨亚玲（")%(W），女，副教授
万方数据
—#&—
第&’卷第+期分析试验室OIK$&’$CI$+
&11)年+月AG8.;=;HIJ<."KILM."KN=8=4"#I<":I<N&11)%+
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
统的样品处理是用极性有机溶剂提取类胡萝卜素，
冷冻除去固醇等，在充氮气条件下用!11234567
溶液皂化脱脂，有机相用水反复洗涤后干燥，所得
样品重新溶解在适当的溶剂中进行分析［)］，方法操
作十分复杂且处理过程中类胡萝卜素有损失。故
我们研究了用极性有机溶剂提取类胡萝卜素，固相
萃取预分离的方法。试验了用甲醇、乙醇、丙酮、四
氢呋喃等溶剂作为枸杞中的类胡萝卜素的提取剂，
实验表明，只有用四氢呋喃才能使枸杞样品中的类
图样和枸杞样品色谱图（枸杞样品，标样）
!"#胡萝卜素完全提取，因此实验选用四氢呋喃为提取
（）
!"#$!$%&’()*